Нормален хемоглобин при хора и животни. Определяне на количеството хемоглобин

УРОК 17. Получаване на кръв, определяне на скоростта на утаяване на еритроцитите и отдръпване на кръвния съсирек

Мястото на провеждане на урока е клиника и лаборатория.

    Цел на урока:

    Овладейте техниката за вземане на кръв от животни.

    Научете се да определяте скоростта на утаяване на еритроцитите и ретракцията на кръвния съсирек.

    Индикатори за ESR различни видовеживотни и отклонения.

    Стойности на индекса на ретракция на кръвния съсирек при коне и големи говедаи в патологията.

За получаване голямо количествовзема се кръв от говеда, овце, кози, коне от югуларна венас помощта на игли за кръвопускане, при прасета - от опашката, каудалната артерия и краниалната вена кава.

Малко количество кръв може да се получи при животни от кръвоносните съдове на ухото, при пилета от гребена или обеци.

Определяне на скоростта на утаяване на еритроцитите

според Неводов

0,04 g натриев цитрат на прах се претеглят в еритроседиометъра, след което кръвта се изтегля в него до „0“ от югуларната вена (предварително подготви полето). Внимателно обърнете еритроседиометъра, докато прахът се разтвори напълно. Ако има повече от “0” кръв, тогава излишъкът се изсмуква с пипета. След като поставите епруветката в стойка, наблюдавайте хода на реакцията на всеки 15 минути в продължение на един час, след което го отбележете след 24 часа.

Според Панченков

След промиване с прясно приготвен 5% разтвор на натриев цитрат, капилярът се напълва със същия разтвор до маркировката P или деление 50 и се пуска върху часовниково стъкло или в епруветка, след което се взема кръв два пъти до маркировката K или разделение. 100 и се пуска върху същото часовниково стъкло или в епруветка, смесва се и сместа се поема без въздушни мехурчета в друга капилярка, промита с натриев цитрат, която се поставя в стойка и се наблюдава протичането на реакцията. ESR се взема предвид след 1 час и се изразява в милиметри.

При здрави животни показателите на час са: за говеда - 0,5-1,5; при овце - 0,5-1,0; при коне - 40-70; при свинете - 2-9; при кучета - 2-6; при пилета - 2-3 мм.

Определяне на ретракцията на кръвния съсирек

според П. В. Каймаков

В суха епруветка, добре измита и почистена със спирт и етер, се взема кръв в количество 10 ml и се оставя за 24 часа при стайна температура.

След 24 часа утаеният серум се аспирира с пипета и количеството му се измерва в мерителна епруветка, след което се определя индексът на ретракция (RI), като количеството серум се раздели на първоначалния обем кръв.

Пример: Взимат се 10 ml кръв и 5 ml серум

I.R. 10 = 0,5

I.R при кон варира от 0,3 до 0,7, със средно 0,53

При говедата е 0,4-0,6.

    Резултати от изследвания.

    Индикатори за скорост на утаяване на еритроцитите:

    след 15 минути

    след 30 минути

    след 45 минути

    След 1 час

    след 24 часа

    Индекс на ретракция на кръвния съсирек

    Заключение

    Учебно оборудване, демонстрационни материали, животни

    Тръби на Неводов или еритроседиометри

    Апарат на Панченков

    Натриев цитрат

    5% разтвор на натриев цитрат

    Епруветки с диаметър 1,5 cm

  1. Игли за вземане на кръв

  2. Тинктура Йода

    Алкохолен етер

    Маси с Индикатори за ESRи IR при животни

Животни: Говеда, коне, прасенца

VIII. Оценка на работата на ученика от учителя.

УРОК 18. Преброяване на броя на червените кръвни клетки, определяне на хемоглобина в кръвта и цветен индекс

Мястото на провеждане на урока е клиника, лаборатория.

    Целта на урока е да се овладеят методите за преброяване на червените кръвни клетки и определяне на хемоглобина.

    Актуално проучване на студентите по следните въпроси:

    Показатели на червени кръвни клетки и хемоглобин при различни животински видове.

    Техните отклонения при различни физиологични и патологични състояния.

    Обяснение на методологията на учителя за изпълнение на работата.

    Изпълнение на работа от студенти.

Преброяване на броя на червените кръвни клетки.

Кръвта се изтегля в миксера до знака 0,5 или 1, след което се изтрива кръвта от физиологичния разтвор до знака 101. Това води до разреждане 200 или 100 пъти. Когато миксерът се напълни с кръв и физиологичен разтвор, краищата се защипват между палеца и показалеца и се разклащат енергично няколко пъти.

Преди зареждане на камерата, съдържанието на миксера се разбърква отново и се поставя под покривно стъкло. За да сте сигурни, че височината на камерата не се променя, е необходимо да избършете плътно покривното стъкло до т.нар. Нютонови пръстени.

Заредената камера се поставя под микроскопа без потапяне. Броенето на червените кръвни клетки започва с квадрата, разположен в левия ъгъл, след което преминава към други квадрати.

Трябва да преброите в 5 големи квадрата всички червени кръвни клетки, разположени вътре в квадрата и по вътрешните му линии.

Преброените червени кръвни клетки в пет големи квадрата се сумират и се определя съдържанието на броя на червените кръвни клетки в 1 кубичен метър. мм. кръв по следната формула: М. 4 000 . при

Броят на червените кръвни клетки X е равен на броя на преброените клетки в пет големи квадрата M, умножен по 4000 и степента на разреждане y, разделена на 80 (броя на малките квадрати).

Обемът на един малък квадрат е 1/4000 кубични метра. м., и следователно, за да получите количество от 1 куб. мм. броят на червените кръвни клетки трябва да се умножи по 4000.

Изчислението трябва да се направи, както следва: броят на червените кръвни клетки в 5 квадрата се умножава по 10 000, когато се разрежда с 200 и

с 5000 при разреждане със 100.

Епруветков метод за преброяване на червени кръвни клетки.

4 ml физиологичен разтвор се изсипват в чиста епруветка на Флорински. Кръвта се изтегля в пипета от хемометър Sali (0,02 ml), внимателно се издухва в епруветка с физиологичен разтвор, пипетата се измива, затваря се с капачка и се разбърква старателно. Разреждане 1:200.

Взетата в епруветката кръв се разклаща няколко пъти, преди да се напълни камерата. Камерата се пълни с помощта на пастьорова пипета или края на кръгла стъклена пръчица, като е важно цялата повърхност, върху която се нанася решетката, да е пълна с течност. Изчислението се извършва по обичайния начин, като се вземе предвид разреждането.

Във връзка с преминаването към използване на Международната система от единици SI в клинично-лабораторната диагностика, в семинара наред със старите физически единици се представят и нови единици. Например: вместо да се изразява броят на еритроцитите в милиони/μl и левкоцитите в хиляди/μl, броят на еритроцитите трябва да се посочи в 10 12 l, а левкоцитите в 10 9 l.

Броят на еритроцитите при възрастни здрави животни в милиони/μl или 10 12 l;

KRS 4,5-7,5; овце - 7,6-11,2; коне - 5,5-9,0; свине - 4,0-7,5; кучета - 5,2–8,4; пилета - 2,5–5,0.

Определяне на хемоглобин. Методът на Сали

С помощта на пипета измервайте до 10-то деление или до кръглата маркировка с числото 2 g процента в градуирана епруветка. децинормален разтвор на солна киселина. Кръвта се изтегля в капиляр до 20 mm и внимателно, след почистване на края на капиляра, кръвта се прехвърля в епруветка с децинормален разтвор на HCl, така че да няма следи от кръв по стените на капиляра, изплаква се още три пъти със същата киселина, като се опитва да не разпенва течността.

Кръвта се хемолизира и се образува хематин със солна киселина.

След 5-7 минути в епруветката се добавя дестилирана вода. Привеждане на оцветяването в стандарт.

Числото, съответстващо на нивото на течността по долния менискус в епруветката, показва количеството на хемоглобина по Saly или g\100 ml.

Определяне на цветен индекс

Цветният индекс се изчислява по формулата:

където CPU е цветният индекс;

H1 - средното количество хемоглобин е нормално, g на 100 ml (или g\l);

H2-количество хемоглобин в изследваното животно, g на 100 ml (или g/l);

E1 - средният брой червени кръвни клетки е нормален, милион \ μl (или 10 12 \ l);

E2-брой на еритроцитите в изследваното животно, mdn\µl

(или 10 12 \l).

Цветният индекс на кръвта при здрави животни е: при говеда - 0,7-1,1; при овце - 0,5-0,7; при коне - 0,8-1,2; при свине - 0,8-1,0; при кучета - 0,8-1,2; при пилета - 2-3.

    Резултати от определяне:

    Червени кръвни телца.

    Хемоглобин.

    Цветен индекс.

    Заключение.

    Микроскоп.

    Преброителната камера на Горяев.

    Миксер за червени кръвни клетки.

    Физиологичен разтвор.

    Покривни стъкла.

    Хемоглобинометър Sali.

    Дестилирана вода.

    Децинормален разтвор на солна киселина.

    Пипети, градуирани на 1 и 5 мл, пипети от хемометъра на Сали.

    Таблици с показатели на червени кръвни клетки и хемоглобин при животни.

Животни: Говеда, коне, прасенца.

УРОК 19. Преброяване на броя на левкоцитите. Приготвяне и оцветяване на намазки. Снемане на хемограма, хематологичен и левкоцитен профил

Мястото на провеждане на урока е клиниката и лабораторията на катедрата.

    Цел на урока:

    Овладейте техниката за броене на левкоцити.

    Придобийте умения за приготвяне и боядисване на мазки.

    Изведете левкоцитни формули на различни животински видове.

    Определете левкоцитния профил при говеда.

    Актуално проучване на студентите по следните въпроси:

    Показатели на левкоцитите при различни животински видове.

    Техните промени в зависимост от определени физиологични и патологични състояния.

    Концепцията за левкоцитна формула и левкоцитен профил.

    Индикатори левкоцитна формулапри говеда и коне.

    Морфологични промени в левкоцитите.

    Обяснение на методологията на учителя за изпълнение на работата.

    Изпълнение на работа от студенти.

Броят на левкоцитите.

Кръвта се изтегля в миксер или меланжер до ниво 0,5 или 1 (от ухото или цитратна кръв). След това към същия меланжор се добавя 2% разтвор оцетна киселинадо маркировка 11 се получава 20-кратно разреждане. След старателно разбъркване, първите две капки се отстраняват от миксера и капка със среден размер се поставя под покривно стъкло в камерата (предварително смляна). Критерият за триене на стъкло в камерата е образуването на Нютонови пръстени. Правилото за броене е, че заредената камера се поставя под микроскопа без потапяне. Левкоцитите се преброяват в 100 големи квадрата (т.е. 1600 малки). Позволено е да се преброят 75 големи квадрата (т.е. 1200 малки).

a x 4000 x b

Формула за изчисляване: X =

където X е необходимият брой оформени елементи в 1 m 3;

a е сумата от фасонните елементи, преброени в определен обем на камерата;

b-брой преброени малки квадратчета;

c-разреждане на кръвта.

Обемът на малък квадрат е 1\100 mm 3 , тогава в 1 mm 3 кръв ще има 400 пъти повече от тях.

Пример: (разреждане на кръвта 20 пъти).

В 1600 малки квадратчета (т.е. 100 големи) се преброяват 150 левкоцита, тогава в 1 m3 ще има:

150 x 4000 x 20

1600 = 150 x 50 = 7500

тези. сумата от левкоцити, преброени в 100 големи квадрата, трябва да се умножи по 50.

Брой на левкоцитите (тръбен метод)

Пипетирайте 0,4 ml разтвор на оцетна киселина в чиста епруветка. Кръвта се взема с пипета от хемометър Sali-0,02 ml и внимателно се прехвърля в епруветка с 3% оцетна киселина. Разреждане 1:20. Камерата се пълни с пастьор или края на кръгла стъклена пръчка; важно е цялата повърхност на мрежата да е пълна с течност. Изчислението се извършва по обичайния начин, като се вземе предвид разреждането.

Броят на левкоцитите при възрастни здрави животни (хиляда µl или 10 9 \l); за говеда - 6,5-9,5; при овце - 6,6-10,6; при коне - 7,0-12,0; при свинете - 6,7-23,0; при кучета - 8,5-10,5; при пилета - 20,0-40,0.

Извеждане на левкоцитна формула.

Преброяването на отделните класове левкоцити се извършва под имерсионен микроскоп. Общо в намазката трябва да се преброят най-малко 100 клетки, за предпочитане 200. Има методи за преброяване според Меандър-4-полюс и Мухин (три линии, перпендикулярни на намазката в центъра му).

Кръвна левкограма на здрави животни, %

Неутрофили

Животни B E M Y P S L M

*) Псевдоеозинофили.

Определяне на левкоцитния профил.

Левкоцитите се преброяват по класове на базата на 100 клетки, извежда се левкоцитната формула, след което се извършва преизчисляване според броя на левкоцитите в mm 3.

Пример: ако има 60 лимфоцита на 100 преброени клетки и общият брой левкоцити в 1 mm 3 е 10 000, тогава според формулата:

100-60 10 000 x 60

10 000- X X = 100 = 6 000

След това се преизчисляват други класове.

Получените данни се отбелязват с точка в съответната колона на специален формуляр.

Чрез свързване на точките с линия се получава графично изображение на левкоцитния профил. Позволява да се определи дали животното има относителна или абсолютна левкоцитоза.

    Резултати от изследвания.

Индикатори за левкоцитна формула и патологични

промени в левкоцитите.

I. Левкоцити (хиляда \ µl):

    базофили%;

    еозинофили%;

    миелоцити%;

  • прът %;

    сегментиран %;

    лимфоцити%;

    моноцити %;

    тюркски клетки%.

    Патологични промени:

    анизоцитоза;

    пойкилоцитоза;

Определяне на левкоцитния профил.

Определяне на хематологичен профил

    Заключение

    Учебно оборудване, демонстрационни материали, животни:

    Микроскоп

    Преброителната камера на Горяев

    Мелангери за левкоцити

    Покривно стъкло.

    2-3% разтвор на оцетна киселина, оцветен с метиленово синьо.

    Лабораторни епруветки с гумени запушалки

    Пипети, градуирани до 1 и 5

    Пипети от хемометъра на Сали

    Слайд (чист, обезмаслен)

    Матово стъкло

    Боя Романовски-Гимза

    Дестилирана вода

    Емайлирани вани

    Имерсионно масло

    Таблици с показатели на левкоцитната формула, левкоцитния и хематологичния профил.

VIII. Оценяване на работата на учениците от учителя.

УРОК 20. Определяне на общия калций и неорганичния фосфор в кръвния серум

    Целта на урока е да научите как да определите количеството на калций и неорганичен фосфор в кръвния серум и да дадете клинична оценкарезултати от изследвания.

    Актуално проучване на студентите по следните въпроси:

    Физиологичната роля на калция в животинския организъм.

    Показатели за общ калций в кръвния серум при различни видове селскостопански животни и техните промени.

    Физиологичната роля на фосфора в животинския организъм.

    Показатели за неорганичен фосфор в кръвния серум при селскостопански животни и техните промени

    Обяснение на методологията на учителя за изпълнение на работата.

    Изпълнение на работа от студенти.

Определяне на калций в кръвен серум по метода на Де-Вард.

Поставете 0,5 ml кръвен серум в една малка центрофужна епруветка и 0,5 ml дестилирана вода в другата. След това към всяка епруветка се добавят 0,5 ml наситен воден разтвор на амониев оксалат.

След 30 минути епруветките се центрофугират за 15 минути. Серумът се изсмуква, към утайката се добавят 1-2 ml дестилирана вода и отново се центрофугира за 3-5 минути.

След това течността се изсмуква и към утайката се добавят 0,3 ml сярна киселина, разредена 1:2 с вода. Сместа се загрява на водна баня до 50-65% и се титрува със сантинормален разтвор на перманганат (KMnO4) до поява на розово оцветяване, което се задържа 2 минути.

Количеството калций в милиграм проценти се изчислява по формулата: (a - k) x 2 x 0,2 x 100, където

a е количеството сантинормален разтвор на перманганат, използвано за титруване на серума;

k е количеството перманганат, изразходван за контролно титруване на дестилирана вода;

0,2 - количеството калций в милиграми, съответстващо на 1 ml сантинормален разтвор на перманганат;

2 - множител за изчисляване на количеството калций в 1 ml кръвен серум;

100 е множител за изчисляване на количеството калций в милиграм проценти в 100 ml кръвен серум.

Количеството на общия калций (mg на 100 ml) при говеда е 10,1-12,5; при коне - 12,0-15,5; при свинете - 10,5-12,5; при птици - 11,0-15,0.

Определяне на неорганичен фосфор в кръвен серум

според Амон и Гинсбърг (модифициран от S.A. Ivanovsky).

Добавете 3 ml дестилирана вода, 1 ml тестов серум и 1 ml 20% разтвор на трихлороцетна киселина в центрофужна епруветка и разбъркайте добре. След 5 минути центрофугирайте при 3000 rpm. в рамките на 15 мин. (или филтрирайте през бензолов филтър). След това в епруветката се изсипват 2,5 ml прозрачен центрофугат (или филтрат), 0,5 молибденов реагент, 1 ml 1% разтвор на аскорбинова киселина и 6 ml дестилирана вода. В същото време в друга епруветка (стандарт) се добавят 3 ml работен стандартен разтвор на фосфор, 0,5 ml молибденов реагент, 1 ml 1% разтвор на аскорбинова киселина и 5,5 ml дестилирана вода. След 10 минути течностите в двете епруветки се колориметрират с помощта на фотоелектричен колориметър, използващ зелен филтър в кювети с ширина 10 mm.

Изчислението се извършва по формулата:

Пример x 0,05 x 100 Пример x 10

X = Ek x 0,5 Ek, където

X е количеството неорганичен фосфор в тествания кръвен серум, mg на 100 ml;

Ex - оптична плътност на пробата със серумен центрофугат;

Ek е оптичната плътност на пробата със стандартен разтвор на фосфор (стандарт);

0,05 - количество фосфор в обема на работен стандартен разтвор на фосфор, взет за анализ, mg; 100-коефициент за изброяване на количеството фосфор на 100 ml кръвен серум.

Кръвният серум на възрастни животни обикновено съдържа следното количество неорганичен фосфор (mg на 100 ml); за говеда - 5,0-6,5; при свинете - 7,7-9,5; при коне - 5,1-6,0; при домашни птици - 5,6-8,0; при овце - 4,5-7,5.

    Резултати.

Количество калций (mg%).

Количество неорганичен фосфор (mg%).

    Заключение.

    Учебно оборудване, демонстрационни материали.

    Реактиви: наситен воден разтвор на амониев оксалат,

centinormal разтвор на калиев перманганат, сярна киселина, разредена 1: 2, 20% разтвор на трихлороцетна киселина; молибденов реактив (приготвен чрез смесване на разтвор, състоящ се от 5 g амониев молибдат и 60 ml дестилирана вода с разтвор, приготвен от 15 ml концентрирана H2SO4 и 25 ml дестилирана вода); 1% разтвор на аскорбинова киселина в 0,1 N разтвор на НС1; основен стандартен разтвор на фосфор (4,394 g KN 2 PO 4) изсушен до постоянно тегло над HSO в ексикатор и дестилирана вода до 1 l); работен стандартен разтвор на фосфор (2 ml изходен разтвор и дестилирана вода до 100 ml + 20 ml 20% разтвор на трихлороцетна киселина; 3 ml разтвор съдържа 0,5 mg фосфор; дестилирана вода).

    Епруветки.

    Градуирани пипети.

    Бензенови филтри.

  1. Фотоелектрически колориметър.

  2. Кръвен серум.

    Водна баня.

    Химически термометър.

    Центрофуга.

    Оценяване на работата на учениците от учителя.

УРОК 21. Определяне на киселинен капацитет и каротин в кръвния серум

Мястото на провеждане на урока е лабораторията на катедрата.

    Цел на урока:

    Усвоява методиката за изследване на киселинния капацитет на кръвта.

    Научете се да определяте каротина в кръвния серум и да давате диагностична оценка на резултатите от теста.

    Актуално проучване на студентите по следните въпроси:

    Какво е резервоар за киселина и нормални показателикиселинен капацитет при различни видове селскостопански животни.

    Видове нарушения на киселинно-алкалния баланс.

    Физиологичната роля на каротина, неговото съдържание при животни в нормални условия и при патология.

    Обяснение на методологията на учителя за изпълнение на работата.

    Изпълнение на работа от студенти.

Определяне на резервната алкалност на кръвния серум

според И.П. Кондрахин.

Стъклени съдове: сдвоени колби, пипети.

Реактиви:

    0,01 N разтвор на NaOH (сода каустик);

    5% разтвор на H2SO4;

    1% алкохолен разтвор на фенолфталеин;

    0,01 N разтвор на H2SO4 (сярна киселина).

Напредък на изследването. 0,5 ml серум (или кръвна плазма) се добавят към едната половина на колбата; не се допуска издухване на останалата течност от пипетата, тя се затваря плътно със запушалка. Вземете 2 ml 0,01 N разтвор на натриев хидроксид във втората половина на колбата и я затворете със запушалка. След това отворете първата половина на колбата и добавете 1 ml 5% разтвор на сярна киселина към намиращия се там кръвен серум и бързо затворете запушалката. Използвайки въртеливи движения, смесете старателно серума с киселината. По време на реакцията смесването се повтаря 3-4 пъти.

Добавете 2 ml 0,01 N разтвор на натриев хидроксид към контролната епруветка и я затворете плътно със запушалка. Вземете 1 ml от 5% разтвор на сярна киселина във втората половина на сдвоената колба и я затворете със запушалка. Преди затваряне на отворите на колбата, запушалките се навлажняват с дестилирана вода.

За по-голяма точност всяка серумна проба се тества в две сдвоени колби. Контролният опит се провежда в три двойни колби.

След 4-6 часа (допустимо е до 12 часа) колбите се отварят. В който има разтвор на натриев хидроксид, добавете една капка 1% алкохолен разтвор на фенолфталеин. Смесете (появява се червен цвят). След това течността в колбата се титрува с 0,01 N сярна киселина до пълно обезцветяване, което се случва при pH 8. Титруването трябва да се извърши внимателно и с еднаква скорост във всички проби и контроли.

Изчислението се извършва по формулата:

X = (a - 6) x 0,224 x 200 = (a - 6) x 44,8

където: X-резервна алкалност (в обемни проценти) CO;

а-количеството 0,01 N разтвор на сярна киселина, използвано за титруване на пробата, ml;

b-количество 0,01 N разтвор на сярна киселина, използвано за титруване на пробата, ml;

0,224-фактор на превръщане на 0,01 N разтвор на сярна киселина в CO за тази реакция;

200 - коефициент за преизчисляване на количеството кръвен серум (плазма), взето за анализ (0,5 ml на 100 ml.)

Нормални показателикапацитет на кръвната киселина (mg на 100 ml); Говеда-460-540, овце-460-540, кози-380-520, коне-500-600, свине-500-600, кучета-450-550.

Определяне на каротин в кръвен серум

(според V.F. Koromyslov и L.A. Kudryavtseva)

Добавете 1 ml кръвен серум и 3 ml 95% етилов алкохол в епруветка, разбъркайте добре със стъклена пръчка, добавете 6 ml петролев етер, разклатете енергично в продължение на 2 минути и внимателно изсипете 0,5 ml дестилирана вода по стената на епруветката се оставя да престои до ясно разделяне на водната и органичната фаза. След това внимателно се отлива 4,5 ml екстракт от каротин и се прехвърля в кювета.

Колориметризирайте с помощта на фотоелектроколориметър в кювети от 1 cm със син филтър срещу петролев етер (бензин). В същото време се колориметрира работен стандартен разтвор на калиев дихромат (5 ml дестилирана вода се смесват с 5 ml основен калиев дихромат).

Изчислението се извършва по формулата: А

където: X е количеството каротин в серума, mg на 100 ml;

А-оптична плътност на пробата за изследване;

B-оптична плътност на работния стандартен разтвор

дихромат;

1,248 е коефициентът за пренос на каротин в mg на 100 ml кръвен серум.

    Резултати от изследвания.

    1. Показатели за киселинния капацитет на кръвния серум.

    Заключение.

    Учебно оборудване, демонстрационни материали, животни.

    0,5% разтвор на химически чист натриев хлоридприготвен в неутрална бидестилирана вода.

    Сантин нормален разтвор на солна киселина.

    Индикаторът е 1% воден разтвор на боя за гниене на ализарин.

    Петролеев етер.

    Работен стандартен разтвор на калиев дихромат.

    Дестилирана вода

    Епруветки

  1. Кръвен серум от различни животни

    Фотоелектрически колориметър

Всички съдове, използвани за неутрализация, са предварително обработени с хромна смес.

VIII. Оценяване на работата на учениците от учителя.

УРОК 22 . Определяне на билирубин и общ протеин

в кръвния серум

Мястото на провеждане на занятието е лабораторията на катедрата.

    Целта на урока е да научите как да определяте в серума кръвен билирубин, общ протеин и предоставят клинична оценка на резултатите от изследването.

    Актуално проучване на студентите по следните въпроси:

    Значението на изследването на кръвния серум за съдържанието на билирубин за диференциране на различни форми на жълтеница.

    Показатели за общия серумен протеин при здрави животни и техните промени.

    Обяснение на методологията на учителя за изпълнение на работата

    Изпълнение на работа от студенти.

Качествено определяне на билирубин в кръвния серум

(според Ван ден Берг)

Вземете 2 малки тапи. В първия се добавят 0,5 ml тестов серум и се добавят 0,3 ml смес от диазореагенти; във втория - 0,5 серум, 0,5 ml 96 0 алкохол и 0,3 ml смес от диазореагенти (алкохолът се добавя към втората епруветка, за да се разруши връзката на индиректния билирубин с кръвния глобулин).

Съдържанието на епруветката се разбърква с тънка чиста пръчка. Розовото оцветяване в първата епруветка показва директна реакция, във втората епруветка показва непряка реакция.

Количествено определяне (по Бокалчук)

За многократни разреждания на серума вземете 6 малки епруветки и налейте 0,5 ml физиологичен разтвор на натриев хлорид във всяка, с изключение на първата, след това добавете 0,5 ml от тестовия серум в първата и втората епруветки.

Серумът във втората епруветка се смесва старателно с физиологичен разтвор, след което 0,5 ml от сместа се прехвърлят в третата епруветка и също се смесват старателно, 0,5 ml от сместа от третата епруветка се прехвърлят в четвъртата епруветка, и т.н. Остатъкът (0,5 ml) от последната епруветка се излива в чаша за изплакване. Резултатът е разреждане:

Тръба № 1 2 3 4 5 6

Скорост на разреждане 1 2 4 8 16 32

След това във всяка епруветка се добавя 0,5 ml абсолют (или 96 градуса алкохол), разклаща се и се получава суспензия от протеин в алкохолен извлек от билирубин. В течността, която е станала мътна поради утаяване на протеини, се излива 0,5 ml смес от диазореактиви и съдържанието на епруветките внимателно се разбърква със стъклена пръчка. В резултат на реакцията серумът придобива розов цвят. Краят на реакцията се счита за разреждане, което дава фин розов цвят. Чрез умножаване на силата

като се раздели на 0,016, се определя количеството билирубин в 1 ml кръвен серум и чрез умножаването му по 100 се определя количеството билирубин в милиграм% в 100 ml серум. В първата епруветка това количество ще бъде 1,6 mg%, във втората - 3,2, в третата - 6,4, в четвъртата - 12,8, в петата - 25,6 и в шестата - 51,2 mg%.

Определяне на билирубин в кръвния серум (според Казаков)

Осем чисти и сухи епруветки се поставят в стойка. След това към всяка епруветка се добавят 0,5 ml от тестовия серум и съдържанието се смесва. От тази епруветка с помощта на пипета вземете 0,5 ml от сместа и я прехвърлете във втората епруветка, от втората 0,5 ml течност се прехвърля в третата и т.н. От последната (осма) епруветка 0,5 ml от сместа се изваждат в отцедника. По този начин се получават серумни разреждания, кратни на две. След това добавете 1 ml 20% разтвор на трихлороцетна киселина към всяка епруветка и разклатете добре. След това съдържанието на епруветките се излива в предварително подготвени фунии от филтърна хартия, които трябва да бъдат маркирани в съответствие с разреждането на кръвта. Фунийките се оставят да съхнат на стайна температура. Реакцията се записва на следващия ден. За край на реакцията се счита разреждането, при което върху филтъра остава ясно видим зелен цвят.

Можете да използвате таблицата за изчисления.

Епруветка № Степен на разреждане Количество билирубин

в 100 ml серум

Определяне на общия протеин в кръвния серум

рефрактометричен метод

Индексът на пречупване на светлинните лъчи (рефракция) е характерна величина за различни вещества. Съществува връзка между концентрацията на вещество (в този случай протеини) и степента на пречупване, която се използва за определяне на протеини в кръвния серум.

За загряване на призмите водата се пропуска през гумени тръби, за да се установи постоянна температура от + 20 0. Преди работа прегънете горната част на измервателната глава. Нанесете една капка от тестовия серум върху повърхността на измервателната призма със стъклена пръчка и внимателно затворете главата.

Чрез наблюдение през окуляра на телескопа и въртене на ръчното колело отляво се намира границата между светлина и сянка. Използвайте ръчното колело отдясно, за да премахнете цветната рамка. След това, като се използва ръчното колело отляво, интерфейсът се подравнява прецизно с мерника и се отчита по скалата на индекса на пречупване. Съдържанието на протеин в изследвания серум се изчислява с помощта на специална таблица.

Индексите на пречупване на кръвния серум и съответните количества общ протеин.

Показатели за общ протеин в кръвния серум при здрави животни (g на 100 ml); за говеда – 6-8,5; при овце - 6-7,5; при свинете - 6,5-8,5; при коне - 6,5-7,8; при кучета - 5,9-7,6; при пилета е 4,3-5,9.

    Резултати от изследвания.

Количество билирубин (mg%)

Количество общ протеин (g%)

    Заключение.

    Учебно оборудване, демонстрационни материали, животни.

1. Реактиви:

    сулфанилова киселина-1g; солна киселина(специфично тегло 1,19) - 10 g;

    дестилирана вода - 200,0;

    натриев нитрат - 0,5 g, дестилирана вода - 100 ml.

Преди изследването пригответе смес на базата на 10 ml от 1-ви реактив 0,3 или 0,6 ml от 2-ри реактив.

    Епруветки.

    Градуирани пипети

  1. Рефрактометър IRF-22

    Изплакнете чаши

    Капки за очи

    Алкохолен етер

    Кръвен серум

    Физиологичен разтвор на готварска сол.

    96 0 алкохол.

    20% разтвор на трихлороцетна киселина

    Филтърна хартия

VIII. Оценяване на работата на учениците от учителя.

Следродилната хемоглобинурия при говедата (Haemoglobinuria puerperalis) е форма на хемолитична анемия при кравите; Регистрира се, като правило, през зимния период при високопродуктивни крави на 5-7 години през първите 5 седмици след отелването и протича със симптоми на тежка хемоглобинурия. Това заболяване е особено често срещано в райони, където има липса на фосфор в почвата.

Етиология. Причините за следродилна хемоглобинурия при крави не са точно установени. Обикновено появата му се свързва с грешки в храненето и поддръжката, хипотермия и интоксикация от стомашно-чревния тракт, дългосрочно хранене на кравата с големи количества люцерна, пулп от цвекло, цвекло и листата му с липса на фосфор и други необходими минерални соли. за животното в диетата (по-често се случва след сухо лято).

Патогенеза. Болна крава бързо развива хемолиза, придружена от натрупване на хемоглобин в плазмата. Хемоглобинът се използва в малки количества в черния дроб и далака, но по-голямата част от него се екскретира в урината, което води до развитие на хемоглобинурия при животното. Впоследствие кравата развива уробилинова жълтеница. Намаляването на способността на кръвта да абсорбира кислород и въглероден диоксид поради липса на хемоглобин в червените кръвни клетки причинява кислороден глад и ацидоза при животното.

Унищожените червени кръвни клетки и разтвореният в кръвта хемоглобин стават за тялото на болна крава чужди вещества, причиняват прояви на парентерален протеинов разпад и са придружени от повишаване на телесната температура и увреждане на паренхимните органи.

Адхезията и разпадането на червените кръвни клетки води до запушване на кръвоносните капиляри с последващо развитие на дегенеративни промени в тъканите, особено интралобуларна некроза в черния дроб. Чернодробна дисфункция, развитие на хемолитична анемия причини сериозно нарушениевсеки метаболитни процесикоето в крайна сметка води до смъртта на кравата.

Патологични промени. При аутопсия на мъртви крави се установява изразена анемия и пожълтяване на тъканите. Кръвта е течна, оцветена кафяв цвят. Черният дроб, далакът и бъбреците са увеличени по размер и са в състояние на мастна дегенерация. При отваряне на черния дроб се отбелязва интралобуларна некроза. На епикарда има кръвоизливи, дегенерация на сърдечния мускул, а в червата има кръвоизливи.

Клинични признаци. Първите признаци на следродилна хемоглобинурия при крави понякога се появяват във връзка с раждането и се проявяват чрез симптоми на депресия, умерена треска (39-39,8 ° C, понякога до 42 ° C), апетитът на кравата намалява, става апатичен, симптоми на хипотония на proventriculus се появяват и настъпва дисфункция на червата и намалено производство на мляко. След началото на заболяването след 1-2 дни урината на кравата става тъмно черешова, прозрачна, сироповидна и има алкална реакция. При изследване на урината в него се откриват протеини, хемоглобин, уробилин и в някои случаи кетонови тела в утайката - продукти на разпадане на червени кръвни клетки, клетки бъбречен епител, понякога бъбречни отливки. При изследване на кръвта в първите дни на заболяването се регистрира рязко намаляване на броя на червените кръвни клетки (до 1,2 - 1,5 милиона на mm³) и хемоглобина (до 16% по Sali). Цветовият индекс е над единица (1,15); осмотичната устойчивост на еритроцитите е намалена; СУЕ е леко ускорена. В натривки от периферна кръв откриваме анизопойкилоцитоза, полихроматофилия, ретикулоцити (20:1000), еритроцити с базофилна пункция и отделни нормобласти. Общият брой на левкоцитите при повечето болни крави е нормален или се увеличава до 15 - 20 хиляди на 1 mm³. Левкоформулата се характеризира с неутрофилия (до 72%) и изразена регенеративна промяна. Отбелязваме тромбоцитоза. При тежка следродилна хемоглобинурия при крави броят на левкоцитите в кръвта намалява до 4-5 хиляди на 1 mm³. В кръвния серум отбелязваме повишено съдържаниеиндиректен билирубин и появата на метхемоглобин, тежка хипофосфатемия, при някои болни крави, намаляване на нивото на каротин и алкален резерв.

При следродилна хемоглобинурия при крави показателите за пункция на костния мозък са нарушени. При остро протичанезаболяване, броят на ядрените елементи в костния мозък се увеличава с 20-30%. Еритробластограмата се характеризира с увеличаване на процента на младите еритробластни форми - проеритробласти и базофилни еритробласти, докато процентът на нормобластите намалява. В същото време броят на гранулофилоцитите е 10 пъти по-висок от нормалното. В същото време с регенеративни процесиВ костния мозък на болна крава се наблюдават дегенеративни явления, които са придружени от пойкилоцитоза, анизоцитоза, бучка структура на протоплазмата на еритроцитите и пикноза на ядрата на някои еритробласти.

Неадекватната еритропоеза поддържа хемолизата на червените кръвни клетки и забавя процеса на възстановяване на кръвта при болна крава.

При изследване на миелограмата отбелязваме намаляване на готовите резерви на миелобласти и ретикулоендотелни клетки.

Когато абсолютната неутрофилия се промени в относителна, неутрофилите се увеличават вляво и сред гранулоцитите се откриват лизис и вакуолизация на ядрото и протоплазмата.

При клиничен преглед на болна крава отбелязваме бледност и умерено пожълтяване на видимите лигавици. По време на перкусия отбелязваме увеличаване на зоната на чернодробна тъпота и чрез дълбока палпация установяваме болезненост на черния дроб. При аускултация на сърцето сърдечните тонове са усилени, сърдечният ритъм е учестен. Пулсът е ускорен - до 100-120 удара в минута. Дишането е затруднено и учестено (30-40 и повече в минута). Понякога усещаме миризмата на ацетон в издишания въздух. Изпражненията стават течни, със слуз и има гнилостна миризма. Млякото на някои животни има червеникав цвят.

Потокостро заболяване. В тежки случаи заболяването може да продължи 3-5 дни. При благоприятен изход от заболяването, нормализиране на кръвния състав и подобрение общо състояниеболна крава се появява в рамките на 1-2 месеца. При крави, които преди това са страдали от следродилна хемоглобинурия, заболяването може да се повтори.

Диагноза. Диагнозата следродилна хемоглобинурия при крави се прави въз основа на факта, че:

  • Предимно високопродуктивните крави заболяват през първите седмици след отелването;
  • при болни животни с лабораторни методи установяваме хемолитична анемия с хемоглобинурия;
  • Заболяването се регистрира най-често през зимния период, когато животните се държат в боксове (от ноември до април).

Диференциална диагноза. При диагностициране на следродилна хемоглобинурия ветеринарният лекар трябва да изключи хемоспоридиозни заболявания, отравяне с растителни и минерални отрови.

Лечение. Собствениците трябва да осигурят на болните крави топли, сухи помещения без течение. Лошокачественият фураж (замразен, гнил, плесенясал, силаж с високо съдържание на маслена киселина и др.) незабавно се изключва от диетата за хранене на животните. Превод на диетично хранене, състоящ се от фураж, богат на растителни протеини, въглехидрати и каротин, от минерали– осигурете достатъчно фосфор. Като минерална фосфорна добавка включваме двузаместен натриев фосфат в диетата в доза от 50 g на ден. За да се предотврати появата на дегенеративни промени в бъбреците на болна крава, на болните крави трябва да се дава обезмаслено мляко или суроватка в количество от 5-10 литра на ден. За повишаване на съпротивителните сили на организма и нормализиране на метаболитните процеси се прилагат интрамускулно тетравит в доза 10 мл, селевит и др.

За облекчаване на ацидозата и неутрализиране на токсините, образувани в предстомаха, на кравата се дават перорално 80-100 g натриев бикарбонат под формата на 5-10% разтвор два пъти дневно в продължение на 3-4 дни.

Прилагаме венозно 20-40% разтвори на глюкоза по 150-200 ml, 2 mg строфантин, 20-30 ml метапирин на приблизително 500 kg живо тегло. Това лечение се извършва ежедневно, докато има забележимо подобрение в общото състояние на кравата. За поддържане на чернодробната функция могат да се предписват препарати с метионин, витамини В12 и Е. За поддържане на сърдечната дейност се инжектират подкожно 4-5 g кофеин в 20% разтвор 2-3 пъти на ден в продължение на 3-5 дни.

При дефицит на фосфор в организма се прилага: парентерално (урзолит, 500 ml/500 kg телесно тегло) или през устата (50 g динатриев фосфат или 250 g рахитин).

За стимулиране на хематопоезата предписваме кръвопреливане на съвместима кръв (до 4 литра) едновременно с пероралното приложение на железни и медни препарати и интрамускулно железни декстринови препарати. По време на периода на възстановяване се предписват интрамускулни инжекции Campolon (0,05 - 0,08 ml на 1 kg телесно тегло) с интервал от 8-14 дни, Vitogepad.

Предотвратяване. Предотвратяването на следродилна хемоглобинурия при крави се основава на балансирана диета за хранене на дълбоко бременни и прясно отелени крави. Диетите трябва да са пълноценни по отношение на протеини, въглехидрати, витамини и минерали, да съдържат достатъчно количество фосфор и правилното му съотношение с калций. Крави в миналия месецбременност не трябва да се хранят в големи количества захарно цвеклои неговите продукти. Всеки ден трябва да добавяте към диетата си 150-200 g минерална смес, съдържаща голямо количество фосфор. През зимния период животните трябва да използват активни упражнения.

Определянето на съдържанието на хемоглобин в кръвта на животните е един от най-важните и широко разпространени показатели. За определяне на хемоглобина най-често се анализират производни на хемоглобина, образувани при неговото окисление и добавянето на различни химични групи към гена, което води до промяна във валентността на желязото и цвета на разтвора.

За рутина лабораторни изследванияколориметричните методи са най-предпочитани, тъй като са най-евтини, най-прости и

бърз в изпълнение. Животинската кръв е нормална смес от производни на хемоглобина с различни спектри на абсорбция. При количествено определяне на хемоглобина чрез колориметрични методи възниква проблемът с избора на реагент, който да преобразува всички производни на хемоглобина само в една форма преди фотометричния анализ. Най-добрите методи за количествено превръщане на хемоглобина в неговите производни се оказаха хемиглобин цианид (HbCN), хемихром (HbChr) и хемиглобиназид (HbN3), които, когато са фотометрични, дават най-малката грешка при определяне сред другите методи за анализ.

Увеличаване: някои форми на хемобластоза, по-специално еритремия, дехидратация.

Намалена (анемия): различни видове анемия, включително поради загуба на кръв.

Принципът на метода с хемиглобин цианид се основава на превръщането на всички форми на хемоглобина в една - хемиглобин цианид. Превръщането на хемоглобина в хемиглобин цианид се осъществява чрез взаимодействието му с трансформиращ разтвор, съдържащ калиев ферицианид, калиев цианид, калиев дихидроген фосфат и нейонен детергент. Калиевият дихидроген фосфат поддържа ниво на pH, при което реакцията протича за 3-5 минути. Детергентът засилва хемолизата на червените кръвни клетки и предотвратява помътняването, свързано с плазмените протеини. Калиевият ферицианид окислява всички форми на хемоглобина в метхемоглобин, който образува хемиглобин цианид с калиев цианид, който има червеникав цвят, чийто интензитет на цвета е право пропорционален на концентрацията на хемоглобин в пробата.

Принципът на хемихромния метод се основава на превръщането на всички форми на хемоглобин в една - хемихром. Когато хемоглобинът взаимодейства с трансформиращ разтвор, съдържащ мастни киселини с калиев ферицианид или натриев додецилсулфат, той се превръща в окислена нискоспинова форма - хемихром (HbChr), който има червеникав цвят, чийто интензитет на цвета е право пропорционален на концентрация на хемоглобин в пробата.

При широкомащабни тестове на хемихромния метод беше показано, че в диапазона на концентрациите на хемоглобина от 40 до 200 g/l, калибровъчните графики на хемиглобинцианида и хемихрома представляват права линия, излизаща от началото, и близки ъгли на наклона на правите линии показват сравнимостта на двата метода.

При определяне на хемоглобина по два метода Ахрем А.А. et al. показаха, че хемихромният метод осигурява по-голяма точност (и по-ниски s). Авторите предполагат, че SDS насърчава разтварянето на мембранните частици и предотвратява адсорбцията на протеин върху стъклото на епруветки и кювети, като по този начин осигурява висока точност на анализа.

Сравнителна оценкаРезултатите от определянето на хемоглобина в кръвта по два метода показват, че резултатите са сравними, а коефициентът на корелация на методите е 0,99. По този начин хемихромният метод за определяне на хемоглобин в кръвта има всички предимства на метода на хемиглобин цианид, които се допълват от липсата на силно токсични цианиди и други токсични вещества в трансформиращия реагент.

Производителност. Добавете 5 ml от трансформиращия разтвор в сухи, чисти епруветки с дозатор, добавете 20 µl кръв към тях с помощта на сертифицирана пипета Sali или механичен дозатор с всички предпазни мерки, изброени в предишния раздел. Разбъркайте старателно пробата с помощта на микрошейкър или ръчно, докато се постигне хомогенен разтвор. Съхранявайте разтворите на стайна температура за времето, посочено в инструкциите за комплекта, и измервайте оптичната плътност на разтворите на проверено, калибрирано устройство в кювета, която има нулева абсорбция на дестилирана вода спрямо подобна контрола (с оптичен дължина на пътя 10 mm). Цветът на разтворите е стабилен до 5 часа или повече, което позволява да се правят измервания по всяко удобно време в този интервал от време. Изчислете съдържанието на хемоглобин в кръвта, като използвате калибрационната графика или фактор, определен на това устройство. Ако са изпълнени всички изброени условия за подготовка и провеждане на описания по-горе анализ, грешката при определяне на хемоглобина в кръвта няма да надвишава ±2%. Нека обобщим накратко източниците на възможни грешки при определяне на хемоглобина: използването на некалибрирани пипети и несъвършени техники за дозиране на кръвни проби; използването на непроверено оборудване, което не осигурява линейна зависимост на оптичната плътност от концентрацията на хемоглобина в необходимия диапазон на измерване; нестабилност на устройството; липса на вътрешнолабораторен контрол на качеството; недостатъчна чистота на кюветите, особено на проточните; грешки при конструиране на калибровъчни графики и изчисляване на коефициенти; използване на разтвори за контрол на хемоглобина Ниско качество; операторски грешки, грешки, направени в преданалитичната фаза.

Хемоглобинът (Hb) е сложен протеин (хромопротеин), който оцветява червените кръвни клетки в червено и се състои от глобиновия протеин и четири хем молекули. Хемът е активната част и съдържа двувалентно желязо; една молекула хем е способна да прикрепи и дари една молекула кислород. Глобинът е протеинов носител на хема. Хемоглобинът в белите дробове прикрепя към себе си кислород, образувайки крехко, лесно дисоциирано съединение - оксихемоглобин (HbO2). Кръвта, наситена с оксихемоглобин (артериална), навлиза в тъканите на тялото, където оксихемоглобинът се разпада на редуциран хемоглобин и кислород. Намаленият хемоглобин (деоксихемоглобин) в тъканите се свързва с въглероден диоксид, образувайки също крехкото съединение карбхемоглобин (HbCO2). Кръвта, наситена с намален хемоглобин и карбхемоглобин (венозна), навлиза в белодробната циркулация. Кръвта на плода съдържа фетален хемоглобин (HbF), който може да бъде значително по-наситен с кислород от хемоглобина на майката. Смята се, че феталният хемоглобин се синтезира в черния дроб, а хемоглобинът при възрастни животни се синтезира в червения костен мозък. Хемоглобинът лесно се свързва с въглероден оксид (въглероден оксид), образувайки карбоксихемоглобин (HbCO), който губи способността си да пренася кислород. Вече със само 0,04% въглероден окис във вдишания въздух, тежко отравяне, а при концентрация 0,1% - смъртта на животното. При леко отравяне въглеродният окис постепенно се разгражда и хемоглобинът възстановява способността си да свързва и пренася кислород. Когато хемоглобинът е изложен на силни окислители ( Бертолетова сол, водороден прекис, анилин и др.) се образува доста силно съединение на хемоглобин с кислород - метхемоглобин (MtHb), в който двувалентното желязо преминава в тривалентна форма. Това съединение здраво задържа кислорода и не може да бъде освободено от тъканите. Когато се образува голямо количество метхемоглобин, животното умира от задушаване. В животновъдната практика метхемоглобинът се образува при хранене на животни с храна, съдържаща големи количества нитрати, от прилагането на големи дози азотни торове в почвата. Качественото определяне на хемоглобина и неговите производни може да се извърши с помощта на спектрален анализ, а количествено – чрез различни калориметрични методи (Таблица 7.).

За да определите насищането на червените кръвни клетки с хемоглобин, определете цветен индексили индекс g.

„Hb“ в изследваното животно x нормално количествочервени кръвни телца

„Nb“ е нормално х броя на червените кръвни клетки в изследваното животно

Обикновено тази цифра е 1 ± 0,15%

Миоглобинът е сложен протеин, открит в скелетните и сърдечните мускули. Миоглобинът може да свърже 14-15% от общото количество кислород. Миоглобиновият кислород се използва от мускулите по време на тяхното съкращаване, когато притока на кръв в техните капиляри намалява. Когато мускулите се отпуснат, миоглобинът получава отново кислород. В значително големи количествамиоглобинът се намира в мускулите на морските бозайници, което им позволява да останат под вода дълго време.

ХЕМОГЛОБИН

Хемоглобинът (Hb) е основният компонент на червените кръвни клетки. Основни функции - пренос на кислород от белите дробове до тъканите, екскреция въглероден двуокисот организма и регулиране на киселинно-алкалния статус.
Нормалната концентрация на хемоглобин при кучета е 110-190 g/l, при котки 90-160 g/l.

Причини за повишена концентрация на хемоглобин:
1. Миелопролиферативни заболявания (еритремия);
2. Първична и вторична еритроцитоза;
3. Дехидратация;


Причини за намаляване на концентрацията на хемоглобин:
1. Желязодефицитна анемия (сравнително умерено понижение - до 85 g/l, по-рядко - по-изразено - до 60-80 g/l);
2. Анемия поради остра загуба на кръв(значително намаление - до 50-80 g/l);
3. Хипопластична анемия (сигнификантно намаление - до 50-80 g/l);
4. Хемолитична анемия след хемолитична криза (значително понижение - до 50-80 g/l);
5. В12 - дефицитна анемия (значително понижение - до 50-80 g/l);
6. Анемия, свързана с неоплазия и/или левкемия;
7. Свръххидратация (хидремично пълнокровие).


Причини за фалшиво повишаване на концентрацията на хемоглобина:
1. Хипертриглицеридемия;
2. Висока левкоцитоза;
3. Прогресиращи чернодробни заболявания;
4. Сърповидноклетъчна анемия (поява на хемоглобин S);
5. Миелом (с мултиплен миелом (плазмоцитом) с появата на голям брой лесно утаяващи се глобулини).

ХЕМАТОКРИТ

Хематокрит (Ht)- обемна фракция на еритроцитите в цяла кръв (съотношението на обемите на еритроцитите и плазмата), което зависи от броя и обема на еритроцитите.
Нормалният хематокрит при кучета е 37-55%, при котки 30-51%. Стандартният диапазон на хематокрит е по-висок при хрътките (49-65%). В допълнение, понякога се открива леко повишен хематокрит при отделни породи кучета като пудел, немска овчарка, боксер, бигъл, дакел и чихуахуа.


Причини за намаляване на хематокрита:
1. Анемия от различен произход (може да намалее до 25-15%);
2. Увеличаване на обема на циркулиращата кръв (бременност, особено 2-ра половина, хиперпротеинемия);
3. Свръххидратация.


Причини за повишен хематокрит:
1. Първична еритроцитоза (еритремия) (увеличава се до 55-65%);
2. Еритроцитоза, причинена от хипоксия с различен произход (вторична, нараства до 50-55%);
3. Еритроцитоза при бъбречни тумори, придружена от повишено образуване на ериропоетин (вторично, нараства до 50-55%);
4. Еритроцитоза, свързана с бъбречна поликистоза и хидронефроза (вторична, нараства до 50-55%);
5. Намаляване на обема на циркулиращата плазма ( болест на изгаряне, перитонит, повтарящо се повръщане, малабсорбционна диария и др.);
6. Дехидратация.
Колебанията в хематокрита са нормални.
Способността на далака да се свива и разширява може да причини значителни промени в хематокрита, особено при кучета.


Причини за повишаване на хематокрита с 30% при котки и 40% при кучета поради свиване на далака:

1. Физическа активност непосредствено преди вземане на кръв;
2. Вълнение преди вземане на кръв.
Причини за спад на хематокрита под стандартните граници поради уголемяване на далака:
1. Анестезия, особено при използване на барбитурати.
Най-пълната информация се предоставя чрез едновременна оценка на хематокрита и концентрацията на общия протеин в плазмата.
Интерпретация на данни за определяне на хематокрит и концентрация на общ протеин в плазмата:

Нормален хематокрит
1. Загуба на протеин през стомашно-чревния тракт;
2. Притеинурия;
3. Сериозно заболяванечерен дроб;
4. Васкулит.
б) Нормалната концентрация на общия протеин в плазмата е нормално състояние.
1. Повишен протеинов синтез;
2. Анемия, маскирана от дехидратация.

Висок хематокрит
а) Ниска концентрацияобщ протеин в плазмата - комбинация от "свиване" на далака със загуба на протеин.
1. “Контракция” на далака;
2. Първична или вторична еритроцитоза;
3. Хипопротеинемия, маскирана от дехидратация.
V) Висока концентрацияобщ протеин в плазмата - дехидратация.

Нисък хематокрит
а) Ниска концентрация на общ протеин в плазмата:
1. Значителна настояща или скорошна кръвозагуба;
2. Прекомерна хидратация.
б) Нормална концентрация на общ протеин в плазмата:
1. Повишено разрушаване на червени кръвни клетки;
2. Намалено производство на червени кръвни клетки;
3. Хронична кръвозагуба.
в) Висока концентрация на общ протеин в плазмата:
1. Анемия при възпалителни заболявания;
2. Множествен миелом;
3. Лимфопролиферативни заболявания.

СРЕДЕН ОБЕМ ЕРИТРОЦИТИ

(корпускуларен обем)
MCV (среден корпускуларен обем)- среден корпускуларен обем - средна стойностобем на червените кръвни клетки, измерен във фемтолитри (fl) или кубични микрометри.
MCV е нормален при котки 39-55 fl, при кучета 60-77 fl.
Изчисляване на MCV = (Ht (%) : брой червени кръвни клетки (1012/l))x10
Средният обем на червените кръвни клетки не може да бъде определен, ако има голям брой необичайни червени кръвни клетки (например сърповидни клетки) в кръвта, която се тества.
Стойностите на MCV в нормалните граници характеризират еритроцита като нормоцит, по-малко от нормалния интервал - като микроцит, над нормалния интервал - като макроцит.


Макроцитоза (високи стойности на MCV) - причини:
1. Хипотоничен характер на нарушенията на водно-електролитния баланс;
2. Регенеративна анемия;
3. Нерегенеративна анемия, причинена от нарушение на имунната система и/или миелофиброза (при някои кучета);
4. Миелопролиферативни заболявания;
5. Регенеративна анемия при котки - носители на вируса на котешка левкемия;
6. Идиопатична макроцитоза (без анемия или ретикулоцитоза) при пудели;
7. Наследствена стоматоцитоза (кучета с нормален или леко повишен брой ретикулоцити);
8. Хипертиреоидизъм при котки (леко повишен при нормален или повишен хематокрит);
9. Новородени животни.


Фалшива макроцитоза - причини:
1. Артефакт, дължащ се на аглутинация на червени кръвни клетки (при имунно-медиирани нарушения);
2. Постоянна хипернатриемия (когато кръвта се разрежда с течност преди преброяване на броя на червените кръвни клетки в електромер);
3. Дългосрочно съхранениекръвни проби.
Микроцитоза (ниски стойности на MCV) - причини:
1. Хипертоничен характер на нарушението на водно-електролитния баланс;
2. Желязодефицитна анемия поради хронично кървенепри възрастни животни (около месец след началото им поради изчерпване на запасите от желязо в организма);
3. Желязодефицитна хранителна анемия при бозаещи животни;
4. Първична еритроцитоза (кучета);
5. Дългосрочна терапия с рекомбинантен еритропоетин (кучета);
6. Нарушения в синтеза на хем - продължителен дефицит на мед, пиридоксин, отравяне с олово, лекарства (хлорамфеникол);
7. Анемия при възпалителни заболявания (MCV е леко понижен или в долната граница на нормата);
8. Портосистемна анастомоза (кучета, с нормален или леко понижен хематокрит)
9. Портосистемна анастомоза и чернодробна липидоза при котки ( лек спад MVC);
10. Може да е с миелопролиферативни заболявания;
11. Нарушена еритропоеза при английски спрингер шпаньоли (в комбинация с полимиопатия и сърдечни заболявания);
12. Персистираща елиптоцитоза (при кръстосани кучета в резултат на липсата на един от протеините в еритроцитната мембрана);
13. Идиопатична микроцитоза при някои породи японски кучета (Акита и Шиба) - не е придружена от анемия.

Фалшива микроцитоза - причини (само когато се определя в електронен брояч):
1. Тежка анемия или тежка тромбоцитоза (ако тромбоцитите са включени в изчисляването на MCV при броене с помощта на електронен брояч);
2. Постоянна хипонатриемия при кучета (поради свиване на червените кръвни клетки при разреждане на кръвта in vitro за преброяване на червените кръвни клетки в електронен брояч).

СРЕДНА КОНЦЕНТРАЦИЯ НА ХЕМОГЛОБИН В ЧЕРВЕНИТЕ КЛЕТКИ
Средна концентрация на хемоглобин в еритроците (MCHC)- индикатор за насищане на еритроцитите с хемоглобин.
В хематологичните анализатори стойността се изчислява автоматично или се изчислява по формулата: MCHC = (Hb (g\dl)\Ht (%))x100
Обикновено средната концентрация на хемоглобин в еритроцитите при кучета е 32,0-36,0 g\dl, при котки 30,0-36,0 g\dl.


Повишен MSHC (изключително рядко) - причини:
1. Хиперхромна анемия (сфероцитоза, овалоцитоза);
2. Хиперосмоларни нарушения на водно-електролитния метаболизъм.


Фалшиво увеличение на MSHC (артефакт) - причини:
1. Хемолиза на еритроцити in vivo и in vitro;
2. Липемия;
3. Наличие на телца на Хайнц в еритроцитите;
4. Аглутинация на еритроцитите при наличие на студени аглутинини (при отчитане в електромер).


Намаляване на MCHC - причини:
1. Регенеративна анемия (ако в кръвта има много стресирани ретикулоцити);
2. Хронична желязодефицитна анемия;
3. Наследствена стоматоцитоза (кучета);
4. Хипоосмоларни нарушения на водно-електролитния метаболизъм.
Фалшиво понижаване на MCHC- при кучета и котки с хипернатриемия (тъй като клетките набъбват при разреждане на кръвта, преди да бъдат преброени в електронен брояч).

СРЕДНО СЪДЪРЖАНИЕ НА ХЕМОГЛОБИН В ЕРИТРОЦИТИТЕ
Изчисляване на средното съдържание на хемоглобин в еритроцит (MCH):
MCH = Hb (g/l)/брой червени кръвни клетки (x1012/l)
Обикновено при кучета е 19-24,5 pg, при котки е 13-17 pg.
Индикаторът няма самостоятелно значение, тъй като зависи пряко от средния обем на еритроцита и средната концентрация на хемоглобин в еритроцита. Обикновено тя пряко корелира със стойността на средния обем на еритроцитите, с изключение на случаите, когато в кръвта на животните присъстват макроцитарни хипохромни еритроцити.

Приета е класификацията на анемията според параметрите на еритроцитите, като се вземат предвид средният обем на еритроцитите (MCV) и средната концентрация на хемоглобин в клетката (MCHC) - виж по-долу.

БРОЙ ЧЕРВЕНИ ЦИТИ
Нормалното съдържание на червени кръвни клетки в кръвта на кучетата е 5,2 - 8,4 x 1012/l, при котките 6,6 - 9,4 x 1012/l.
Еритроцитозата е повишаване на съдържанието на червени кръвни клетки в кръвта.

Относителна еритроцитоза- поради намаляване на обема на циркулиращата кръв или освобождаване на червени кръвни клетки от кръвните депа ("свиване" на далака).

Причини:
1. Свиване на далака
- възбуда;
- физическа дейност;
- болка.
2. Дехидратация
- загуба на течности (диария, повръщане, прекомерна диуреза, прекомерно изпотяване);
- лишаване от пиене;
- повишена съдова пропускливост с освобождаване на течности и протеини в тъканите.

Абсолютна еритроцитоза- увеличаване на масата на циркулиращите червени кръвни клетки поради повишена хемопоеза.

Причини:
2. Първична еритроцитоза
- еритремията е хронично миелопролиферативно заболяване, което възниква в резултат на автономната (независима от производството на еритропоетин) пролиферация на еритроидни прогениторни клетки в червения костен мозък и навлизането в кръвта на голям брой зрели червени кръвни клетки.
3. Вторична симптоматична еритроцитоза, причинена от хипоксия (с компенсаторно увеличение на производството на еритропоетин):
- белодробни заболявания (пневмония, неоплазми и др.);
- сърдечни дефекти;
- наличие на абнормни хемоглобини;
- повишена физическа активност;
- остани голяма надморска височинанад морското равнище;
- затлъстяване;
- хронична метхемоглобинемия (рядко).
4. Вторична симптоматична еритроцитоза, свързана с неподходящо повишено производство на еритропоетин:
- хидронефроза и поликистоза на бъбреците (с локална хипоксия на бъбречната тъкан);
- рак на бъбречния паренхим (произвежда еритропоетин);
- рак на чернодробния паренхим (произвежда протеини, подобни на еритропоетина).
5. Вторична симптоматична еритроцитоза, свързана с излишък на адренокортикостероиди или андрогени в организма
- Синдром на Кушинг;
- феохромоцитом (тумор на надбъбречната медула или други хромафинови тъкани, които произвеждат катехоламини);
- хипералдестеронизъм.

Еритроцитопенията е намаляване на броя на червените кръвни клетки в кръвта.

Причини:
1. Анемия от различен произход;
2. Увеличаване на обема на циркулиращата кръв (относителна анемия):
- хиперхидратация;
- секвестрация на червени кръвни клетки в далака (когато се отпусне по време на анестезия, спленомегалия);
- хиперпротеинемия;
 хемоделуция (разреждане на кръвта) в случай на напредване на разширяването на съдовото пространство на разпределението на общата маса на червените кръвни клетки в тялото (анемия на новородени, анемия на бременни жени).

Класификация на анемията според параметрите на еритроцитите, като се вземат предвид средният обем на еритроцитите (MCV) и средната концентрация на хемоглобин в клетката (MCHC)

а) Нормоцитна нормохромна анемия:
1. Остра хемолиза през първите 1-4 дни (преди появата на ретикулоцити в кръвта);
2. Остро кървене през първите 1-4 дни (преди появата на ретикулоцити в кръвта в отговор на анемия);
3. Умерена загуба на кръв, която не стимулира значителна реакция отвън костен мозък;
4. Ранен периоддефицит на желязо (все още няма преобладаване на микроцити в кръвта);
5. Хронично възпаление (може да бъде лека микроцитна анемия);
6. Хронична неоплазия (може да бъде лека микроцитна анемия);
7. Хронично бъбречно заболяване (с недостатъчно производство на еритропоетин);
8. Ендокринна недостатъчност (хипофункция на хипофизата, надбъбречните жлези, щитовидната жлеза или половите хормони);
9. Селективна еритроидна аплазия (вродена и придобита, включително като усложнение от ваксинация срещу парвовирус при кучета, заразени с вируса на котешка левкемия, при използване на хлорамфеникол, продължителна употреба на рекомбинантен човешки еритропоетин);
10. Аплазия и хипоплазия на костния мозък от различен произход;
11. Отравяне с олово (може да липсва анемия);
12. Дефицит на кобаламин (витамин B12) (развива се, когато вроден дефектусвояване на витамини, тежка малабсорбция или чревна дисбиоза).


б) Макроцитна нормохромна анемия:
1. Регенеративна анемия (средната концентрация на хемоглобин в еритроцита не винаги е намалена);
2. При инфекции, причинени от вирус на котешка левкемия без ретикулоцитоза (обикновено);
3. Еритролевкемия (остра миелоидна левкемия) и миелодиспластични синдроми;
4. Медиирана от нерегенеративна имунна система анемия и/или миелофиброза при кучета;
5. Макроцитоза при пудели (здрави мини-пудели без анемия);
6. Котки с хипертиреоидизъм (слаба макроцитоза без анемия);
7. Дефицит на фолат ( фолиева киселина) - Рядко.


в) Макроцитна хипохромна анемия:
1. Регенеративна анемия с изразена ретикулоцитоза;
2. Наследствена стоматоцитоза при кучета (често лека ретикулоцитоза);
3. Повишена осмотична нестабилност на еритроцитите на абисински и сомалийски котки (обикновено е налице ретикулоцитоза);


г) Микроцитна или нормоцитна хипохромна анемия:
1. Хроничен дефицитжелязо (месеци при възрастни животни, седмици при бозаещи животни);
2. Портосистемни шънтове (често без анемия);
3. Анемия при възпалителни заболявания (обикновено нормоцитна);
4. Чернодробна липидоза при котки (обикновено нормоцитна);
5. Нормално състояниеза японски кучета акита и шиба (без анемия);
6. Продължително лечение с рекомбинантен човешки еритропоетин (умерена анемия);
7. Дефицит на мед (рядко);
8. Лекарства или агенти, които инхибират синтеза на хема;
9. Миелопролиферативни заболявания с нарушен метаболизъм на желязото (рядко);
10. Дефицит на пиридоксин;
11. Фамилно нарушение на еритропоезата при английски спрингер шпаньоли (рядко);
12. Наследствена елиптоцитоза при кучета (рядко).

БРОЙ НА ТРОМБОЦИТИТЕ

Нормалният брой на тромбоцитите при кучета е 200-700 x 109/l, при котки 300-700 x 109/l. Физиологичните колебания в броя на тромбоцитите в кръвта през деня са приблизително 10%. U здрави кучетаПородите Greyhound и Cavalier King Charles Spaniels имат нормален брой тромбоцити, който е по-нисък от този на кучета от други породи (приблизително 100 x 109/L).

Тромбоцитозата е увеличаване на броя на тромбоцитите в кръвта.

1. Първична тромбоцитоза - е резултат от първична пролиферация на мегакариоцити. Причини:
- есенциална тромбоцитемия (броят на тромбоцитите може да се увеличи до 2000-4000 x 109/l или повече);
- еритремия;
- хронична миелоидна левкемия;
- миелофиброза.
2. Вторична тромбоцитоза- реактивен, възникващ на фона на някакво заболяване в резултат на повишено производство на тромбопоетин или други фактори (IL-1, IL-6, IL-11). Причини:
- туберкулоза;
- цироза на черния дроб;
- остеомиелит;
- амилоидоза;
- карцином;
- лимфогрануломатоза;
- лимфом;
- състояние след спленектомия (в рамките на 2 месеца);
- остра хемолиза;
 състояние след операция (в рамките на 2 седмици);
- остро кървене.
Тромбоцитопенията е намаляване на броя на тромбоцитите в кръвта. Спонтанно кървене се появява при 50 х 109/l.


Причини:
I. Тромбоцитопения, свързана с намалено образуване на тромбоцити (хемопоетична недостатъчност).
а) закупени
1. Цитотоксично увреждане на червения костен мозък:
- цитотоксични противотуморни химиотерапевтични лекарства;
- приложение на естрогени (кучета);
- цитотоксични лекарства: хлорамфеникол (котки), фенилбутазон (кучета), триметоптим-сулфадиазин (кучета), албендазол (кучета), гризеофулвин (котки), вероятно тиацетарсемид, меклофенамова киселина и хинин (кучета);
- цитотоксични естрогени, произведени от тумори от клетки на Сертоли, интерстициални клетки и гранулозноклетъчни тумори (кучета);
- повишена концентрация на цитотоксични естрогени във функциониращи кистозни яйчници (кучета).
2. Инфекциозни агенти:
 Ehrlichia canis (кучета);
- парвовирус (кучета);
 инфекция с вируса на котешка левкемия (FLV инфекция);
 панлевкопения (котки - рядко);
- инфекция с котешки имунодефицитен вирус (FIV инфекция).
3. Имуномедиирана тромбоцитопения със смърт на мегакариоцити.
4. Облъчване.
5. Миелофтиза:
- миелогенна левкемия;
- лимфоидна левкемия;
- множествена миелома;
- миелодиспластични синдроми;
- миелофиброза;
- остеосклероза;
- метастатични лимфоми;
- метастатични мастоцитни тумори.
6. Амегакариоцитна тромбоцитопения (рядко);
7. Дългосрочна употреба на рекомбинантен тромбопоетин;
8. Липса на ендогенен тромбопоетин.
б) наследствени
1. Умерена циклична тромбоцитопения с вълнообразно намаляване и увеличаване на производството на тромбоцити при сиви коли с наследствена циклична хемопоеза;
2. Тромбоцитопения с поява на макротромбоцити при Cavalier King Charles Spaniels (асимптомна).
II. Тромбоцитопения, причинена от повишено разрушаване на тромбоцитите:
1. Имунно-медиирани:
 първична автоимунна (идиопатична) - идиопатична тромбоцитопенична пурпура (може да се комбинира с автоимунна хемолитична анемия - синдром на Evans) - често срещана при кучета, по-често при женски, породи: кокер шпаньол, той и той пудел, староанглийски и немски овчарки;
- вторично за системен лупус еритематозус, ревматоиден артрит;
- вторични за алергични и лекарствено-алергични;
- вторично при инфекциозни заболявания, придружени от отлагане на комплекси антиген-антитяло-комплемент върху повърхността на тромбоцитите (ерлихиоза, рикетсиоза);
- вторично при хронична лимфоцитна левкемия.
2. Хаптен - свързан със свръхчувствителност към определени лекарства (лекарствено-токсични) и уремия;
3. Изоимунна (посттрансфузионна тромбоцитопения);
4. Инфекциозни процеси(виремия и септицемия, някои възпаления).
III. Тромбоцитопения, причинена от повишено използване на тромбоцитите:
1. DIC синдром;
2. Хемангиосарком (кучета);
3. Васкулит (например с вирусен перитонит при котки);
4. Други заболявания, причиняващи увреждане на ендотела;
5. Възпалителни процеси (поради увреждане на ендотела или повишени концентрации на възпалителни цитокини, особено тромбоцитни адхезионни и агрегационни фактори);
6. Ухапвания от змии.
IV. Тромбоцитопения, свързана с повишена секвестрация (отлагане) на тромбоцитите:
1. Секвестрация в хемангиома;
2. Секвестрация и деструкция в далака с хиперспленизъм;
3. Секвестрация и деструкция в далака със спленомегалия (с наследствена хемолитична анемия, автоимунни заболявания, инфекциозни заболявания, лимфом на далака, конгестия в далака, миелопролиферативни заболявания със спленомегалия и др.);
4. Хипотермия.
V. Тромбоцитопения, свързана с външно кървене:
1. Остро кървене (лека тромбоцитопения);
2. Масивна кръвозагуба, свързана с отравяне с антикоагулантни родентициди (тежка тромбоцитопения при кучета);
3. При трансфузия на донорска кръв или червени кръвни клетки с изчерпано съдържание на тромбоцити на животни, претърпели голяма кръвозагуба.
Псевдотромбоцитопения може да възникне, когато се използват автоматични броячи на тромбоцити за преброяване на тромбоцитите.

Причини:
1. Образуване на тромбоцитни агрегати;
2. При котки, тъй като техните тромбоцити са много големи по размер и устройството не може надеждно да ги различи от червените кръвни клетки;
3. При Cavalier King Charles Spaniels кръвта им обикновено съдържа макротромбоцити, които устройството не различава от малките червени кръвни клетки.

БРОЙ ЛЕВКОЦИТИ

Нормалното съдържание на левкоцити при кучета е 6,6-9,4 x 109/l, при котки 8-18 x 109/l.
Броят на левкоцитите зависи от скоростта на приток на клетки от костния мозък и скоростта на освобождаването им в тъканта.
Левкоцитозата е увеличение на броя на белите кръвни клетки над нормалните граници.
Основни причини:
1. Физиологична левкоцитоза(поради отделянето на катехоламини - появява се след 2-5 минути и продължава от 20 минути до час; броят на левкоцитите на най-високия прагнормално или малко по-високо, има повече лимфоцити, отколкото полиморфонуклеарни левкоцити):
- страх;
- възбуда;
- грубо отношение;
физически упражнения;
- конвулсии.
2. Левкоцитоза при стрес(причинено от увеличаване на количеството на екзогенни или ендогенни глюкокортикоиди в кръвта; реакцията се развива в рамките на 6 часа и продължава ден или повече; наблюдават се неутрофилия с изместване вляво, лимфопения и еозинопения, късни етапи- моноцитоза):
- наранявания;
- хирургични операции;
- пристъпи на болка;
- злокачествени новообразувания;
- спонтанен или ятрогенно заболяванеКушинг;
- втора половина на бременността (физиологична с изместване вдясно).
3. Възпалителна левкоцитоза(неутрофилия с ляво изместване, броят на левкоцитите на ниво 20-40x109; неутрофилите често имат токсични и неспецифични промени - тела на Döhle, дифузна цитоплазмена базофилия, вакуолизация, лилави цитоплазмени гранули):
- инфекции (бактериални, гъбични, вирусни и др.);
- наранявания;
- некроза;
- алергии;
- кървене;
- хемолиза;
- възпалителни състояния;
- остри локални гнойни процеси.
4. левкемия;
5. уремия;
6. Неадекватни реакции на левкоцитите
- под формата на дегенеративно изместване вляво (броят на несегментираните надвишава броя на полиморфните); ляво изместване и неутропения; левкемоидна реакция (ясна левкоцитоза със силно ляво изместване, включително мегамиелоцити, миелоцити и промиелоцити) с моноцитоза и монобластоза:
- тежък гнойни инфекции;
- грам-отрицателен сепсис.
- под формата на еозинофилия - хипереозинофилен синдром (котки).
Левкопенията е намаляване на броя на левкоцитите под нормалните граници.
Най-често левкопенията се причинява от неутропения, но има лимфопения и панлекопения.
Повечето често срещани причини:
1. Намаляване на броя на левкоцитите в резултат на намалена хемопоеза:
 инфекция с вирус на котешка левкемия (котки);
 инфекция с котешки имунодефицитен вирус (котки);
 вирусен ентерит на котки (котки);
парвовирусен ентерит(кучета);
- котешка панлевкопения;
- хипоплазия и аплазия на костния мозък;
- увреждане на костния мозък химикали, лекарства и др. (виж причините за нерегенеративна анемия, придружена от левкопения и тромбоцитопения (панцитопения));
- миелопролиферативни заболявания (миелодиспластични синдроми, остра левкемия, миелофиброза);
- миелофтиза;
- прием на цитотоксични лекарства;
- йонизиращо лъчение;
- остра левкемия;
- метастази на неоплазми в костния мозък;
- циклична левкопения при мраморно синьо коли (наследствена, свързана с циклична хемопоеза)
2. Секвестрация на левкоцитите:
- ендотоксичен шок;
- септичен шок;
- анафилактичен шок.
3. Повишено използване на левкоцитите:

- виремия;
- тежки гнойни инфекции;
- токсоплазмоза (котки).
4. Повишено разрушаване на левкоцитите:
- грам-отрицателен сепсис;
- ендотоксичен или септичен шок;
 DIC синдром;
- хиперспленизъм (първичен, вторичен);
- имунно-свързана левкопения
5. Резултат от действието лекарства(може да е комбинация от разрушение и намалено производство):
- сулфонамиди;
- някои антибиотици;
- нестероидни противовъзпалителни средства;
- тиреостатици;
- антиепилептични лекарства;
- спазмолитични перорални лекарства.


Намаляването или повишаването на левкоцитите в кръвта може да се дължи на отделни видовелевкоцити (по-често) и общи при запазване на процента на отделните видове левкоцити (по-рядко).
Увеличаването или намаляването на броя на някои видове левкоцити в кръвта може да бъде абсолютно (с намаляване или увеличаване на общото съдържание на левкоцити) или относително (с нормално общо съдържание на левкоцити).
Абсолютното съдържание на отделните видове левкоцити в единица обем кръв може да се определи чрез умножаване на общото съдържание на левкоцити в кръвта (х109) по съдържанието определен типлевкоцити (%) и полученото число се разделя на 100.

ЛЕВКОЦИТНА КРЪВНА ФОРМУЛА

Левкоцитна формула- процентно съдържание на различни видове левкоцити в кръвна натривка.
Левкоцитната формула на котки и кучета е нормална

Клетки Процент от общите левкоцити
Кучета Котки
Миелоцити 0 0
Метамиелоцити (млади) 0 0 - 1
Ивица неутрофили 2 - 7 1 - 6
Сегментирани неутрофили 43 - 73 40 - 47
Еозинофили 2 - 6 2 - 6
Базофили 0 - 1 0 - 1
Моноцити 1 - 5 1 - 5
Лимфоцити 21 - 45 36 - 53
При оценката на левкоцитната формула е необходимо да се вземе предвид абсолютното съдържание на отделните видове левкоцити (виж по-горе).
Изместване наляво - промяна в левкограмата с увеличаване процентмлади форми на неутрофили (лентоядни неутрофили, метамиелоцити, миелоцити).


Причини:
1. Остри възпалителни процеси;
2. Гнойни инфекции;
3. Интоксикация;
4. Остри кръвоизливи;
5. Ацидоза и кома;
6. Физическо пренапрежение.


Регенеративна лява смяна- броят на лентовите неутрофили е по-малък от броя на сегментираните неутрофили, общият брой на неутрофилите се увеличава.
Дегенеративно изместване вляво- броят на лентовите неутрофили надвишава броя на сегментираните неутрофили, общият брой на неутрофилите е нормален или съществува левкопения. Резултат повишена нуждав неутрофилите и/или повишено разрушаване на тях, което води до разрушаване на костен мозък. Признак, че костният мозък не може да отговори на повишената нужда от неутрофили в краткосрочен план (няколко часа) или дългосрочно (няколко дни).
Хипосегментация- изместване наляво, поради наличието на неутрофили, които имат кондензиран ядрен хроматин на зрели неутрофили, но различна ядрена структура в сравнение със зрелите клетки.


Причини:
 аномалия на Pelger-Huyne (наследствена черта);
 преходна псевдоаномалия при хронични инфекции и след прием на определени лекарства (рядко).

Преместване наляво с подмладяване- В кръвта присъстват метамиелоцити, миелоцити, промиелоцити, миелобласти и еритробласти.


Причини:
1. Хронична левкемия;
2. Еритролевкемия;
3. Миелофиброза;
4. Метастази на неоплазми;
5. Остра левкемия;
6. Коматозни състояния.


Преместване надясно (хиперсегментация)- промяна в левкограмата с увеличаване на процента на сегментирани и полисегментирани форми.


Причини:
1. Мегалобластна анемия;
2. Бъбречни и сърдечни заболявания;
3. Състояния след кръвопреливане;
4. Възстановяване от хронично възпаление(отразява увеличеното време на престой на клетките в кръвта);
5. Екзогенно (ятрогенно) повишаване на нивото на глюкокортикоидите (придружено от неутрофилия; причината е забавяне на миграцията на левкоцитите в тъканта поради вазоконстриктивния ефект на глюкокортикоидите);
6. Ендогенно (стресови ситуации, синдром на Кушинг) повишаване на нивата на глюкокортикоидите;
7. Стари животни;
8. Кучета с наследствен дефект в усвояването на кобаламин;
9. Котки с дефицит на фолат.

НЕУТРОФИЛИ

Около 60% от всички неутрофили се намират в червения костен мозък, около 40% са в тъканите и по-малко от 1% циркулират в кръвта. Обикновено по-голямата част от неутрофилите в кръвта е представена от сегментирани неутрофили. Полуживотът на циркулацията на неутрофилните гранулоцити в кръвта е 6,5 часа, след което те мигрират в тъканите. Времето на живот в тъканите варира от няколко минути до няколко дни.
Съдържание на неутрофили
(абсолютно и относително - процент от всички левкоцити)
нормално в кръвта
Тип Граница на флуктуация, x109/l Процент неутрофили
Кучета 2,97 - 7,52 45 - 80
Котки 3,28 - 9,72 41 - 54


Неутрофилоза (неутрофилия)- повишаване на съдържанието на неутрофилни левкоцити в кръвта над горните граници на нормата.
Може да се развие в резултат на повишено производство на неутрофили и/или освобождаването им от костния мозък; намаляване на миграцията на неутрофили от кръвния поток в тъканите; намален преход на неутрофили от маргиналния към циркулиращия пул.


а) Физиологична неутрофилия- развива се с освобождаване на адреналин (преходът на неутрофилите от маргиналния към циркулиращия басейн намалява). Най-често причинява физиологична левкоцитоза. По-силно е изразено при младите животни. Броят на лимфоцитите е нормален (при котките може да се увеличи), няма изместване вляво, броят на неутрофилите се увеличава не повече от 2 пъти.


Причини:
1. Физическа активност;
2. Конвулсии;
3. Уплаха;
4. Вълнение.
б) Стрес неутрофилия - при повишена ендогенна секреция на глюкокортикоиди или при екзогенното им приложение. Причинява стресова левкоцитоза. Глюкокортикоидите увеличават добива на зрели левкоцити от костния мозък и забавят прехода им от кръв към тъкан. Абсолютният брой на неутрофилите рядко се увеличава повече от два пъти в сравнение с нормата, изместването вляво липсва или е слабо изразено, често се наблюдават лимфопения, еозинопения и моноцитоза (по-често при кучета). С течение на времето броят на неутрофилите намалява, но лимфопенията и еозинопенията продължават, докато концентрацията на глюкокортикоиди в кръвта остава повишена.


Причини:
1. Повишена ендогенна секреция на глюкокортикоиди:
- болка;
- продължителен емоционален стрес;
- анормална телесна температура;
- хиперфункция на надбъбречната кора (синдром на Кушинг).
2. Екзогенно приложение на глюкокортикоиди.
V) Възпалителна неутрофилия- често основният компонент на възпалителната левкоцитоза. Често има изместване вляво - силно или слабо, често е намален броят на лимфоцитите.


Причини за изключително висока неутрофилия (над 25x109/l) с висока левкоцитоза (до 50x109/l):
1. Местен тежки инфекции:
- пиометра, пиотеракс, пиелонефрит, септичен перитонит, абсцеси, пневмония, хепатит.
2. Имунно-медиирани нарушения:
- имуномедиирана хемолитична анемия, полиартрит, васкулит.
3. Туморни заболявания
- лимфом, остър и хронична левкемия, мастноклетъчен тумор.
4. Заболявания, придружени от обширна некроза
 в рамките на 1-2 дни след операция, травма, панкреатит, тромбоза и жлъчен перитонит.
5. Първите 3 седмици след прилагане на токсична доза естроген (кучетата впоследствие развиват генерализирана хипоплазия или аплазия на костен мозък и панлевкопения).


Левкемоидна реакция от неутрофилен тип- рязко повишаване на броя на неутрофилните левкоцити в кръвта (над 50x109 / l) с появата на голям брой хемопоетични елементи, до миелобласти. Наподобява левкемия в степента на увеличаване на броя на левкоцитите или в клетъчната морфология.


Причини:
1. Остра бактериална пневмония;
2. Злокачествени туморис множество метастази в костния мозък (с и без левкоцитоза):
- рак на бъбречния паренхим;
- рак на простатата;
- рак на гърдата.


Неутропения- намаляване на абсолютното съдържание на неутрофили в кръвта под долната граница на нормата. Често абсолютната неутропения причинява левкопения.
а) Физиологична неутропения- при кучета от породата белгийски тервюрен (заедно с намаляване на общ бройлевкоцити и абсолютно числолимфоцити).
б) Неутропениясвързано с намаляване на освобождаването на неутрофили от червения костен мозък (поради дисгранулопоеза - намаляване на броя на прекурсорните клетки или нарушено съзряване):


1. Миелотоксични ефекти и потискане на гранулоцитопоезата (без промяна в левкоцитната формула):
- някои форми на миелоидна левкемия, някои миелодиспластични синдроми;
- миелофтиза (с лимфоцитна левкемия, някои миелодиспластични синдроми, миелофиброза (често свързана с анемия, по-рядко с левкопения и тромбоцитопения), остеосклероза, в случай на лимфоми, карциноми и мастоцитни тумори);
- при котки инфекции, причинени от вирус на котешка левкемия, вирус на котешка имунна недостатъчност (заедно с левкопения);
- токсичен ефект върху ендогенни (хормонопродуциращи тумори) и ендогенни естрогени при кучета;
- йонизиращо лъчение;
противотуморни лекарства(цитостатици и имуносупресори);
- някои лекарства (хлорамфеникол)
 инфекциозни агенти - ранен стадий на вирусна инфекция (инфекциозен хепатит и кучешки парвовирус, котешка панлевкопения, Ehrlichia canis инфекция при кучета);
- литиев карбонат (забавено узряване на неутрофилите в костния мозък при котки).
2. Имунна неутропения:

- изоимунни (посттрансфузионни).


в) Неутропения, свързана с преразпределение и секвестрация в органите:


1. Спленомегалия от различен произход;
2. Ендотоксичен или септичен шок;
3. Анафилактичен шок.


г) Неутропения, свързана с повишено използване на неутрофили (често с дегенеративно изместване на левкоцитната формула наляво):


1. Бактериални инфекции(бруцелоза, салмонелоза, туберкулоза);
2. Тежки гнойни инфекции (перитонит след чревна перфорация, абсцеси, които са се отворили вътре);
3. Септицемия, причинена от грам-отрицателни бактерии;
4. Аспирационна пневмония;
5. Ендотоксичен шок;
6. Токсоплазмоза (котки)


д) Неутропения, свързана с повишено разрушаване на неутрофилите:


1. Хиперспленизъм;
2. Тежки септични състояния и ендотоксемия (с дегенеративно изместване вляво);
3. DIC синдром.


е) Наследствени форми:


1. Наследствен дефицит на усвояване на коболамин (кучета - заедно с анемия);
2. Циклично хематопоеза (при синьо коли);
3. Синдром на Chediak-Higashi (персийски котки с частичен албинизъм - светложълти очи и опушено синя козина).


В допълнение към горните случаи, неутропенията може да се развие веднага след остра загуба на кръв. Неутропенията, придружаваща нерегенеративна анемия, показва хронично заболяване(например рикетсиоза) или процес, свързан с хронична загуба на кръв.


Агранулоцитоза- рязко намаляване на броя на гранулоцитите в периферната кръв до пълното им изчезване, което води до намаляване на устойчивостта на организма към инфекции и развитие на бактериални усложнения.


1. Миелотоксичен - развива се в резултат на действието на цитостатични фактори, съчетано с левкопения, тромбоцитопения и често анемия (т.е. панцитопения).
2. Имунен
- хаптенични (идиосинкразия към лекарствени вещества) - фенилбутазон, триметоприм/сулфадиазин и други сулфонамиди, гризеофулвин, цефалоспорини;
- автоимунни (със системен лупус еритематозус, хронична лимфоцитна левкемия);
- изоимунни (посттрансфузионни).

ЕОЗИНОФИЛИ

Еозинофили- клетки, които фагоцитират комплексите антиген-антитяло (IgE). След узряване в костния мозък те циркулират в кръвта за около 3-4 часа, след което мигрират към тъканите, където живеят приблизително 8-12 дни. Дневният ритъм на колебания в кръвта е характерен: най-много висока производителностпрез нощта, най-ниска през деня.


Еозинофилия - повишено ниво на еозинофили в кръвта.


Причини:


Еозинопенията е намаляване на нивото на еозинофилите в кръвта под долната граница на нормата. Концепцията е относителна, тъй като те може да не присъстват нормално при здрави животни.


Причини:


1. Екзогенно приложение на глюкокортикоиди (секвестрация на еозинофили в костния мозък);
2. Повишена адренокортикоидна активност (първичен и вторичен синдром на Кушинг);
3. Начална фаза на инфекциозно-токсичния процес;
4. Тежко състояние на пациента в следоперативния период.

БАЗОФИЛИ

Продължителността на живота е 8-12 дни, времето на циркулация в кръвта е няколко часа.
Главна функция - участие в незабавни реакции на свръхчувствителност. Освен това те участват в реакции на свръхчувствителност от забавен тип (чрез лимфоцити), във възпалителни и алергични реакции и в регулацията на пропускливостта на съдовата стена.
Съдържание на базофили
в кръвта е нормално.
Тип Граница на вариация, x109/l Процент базофили
Кучета 0 - 0,094 0 - 1
Котки 0 - 0.18 0 - 1

ЛИМФОЦИТИ

Лимфоцитите са основният клетъчен елемент на имунната система, образуват се в костния мозък и активно функционират в лимфоидна тъкан. Основната функция е разпознаване на чужд антиген и участие в адекватен имунен отговор на организма.
Съдържание на лимфоцити
(абсолютно и относително - процент от всички левкоцити)
в кръвта е нормално.
Тип Граница на вариация, x109/l Процент лимфоцити
Кучета 1,39 - 4,23 21 - 45
Котки 2,88 - 9,54 36 - 53


Абсолютната лимфоцитоза е увеличение на абсолютния брой на лимфоцитите в кръвта над нормалните граници.


Причини:


1. Физиологична лимфоцитоза - повишено съдържание на лимфоцити в кръвта на новородени и млади животни;
2. Прилив на адреналин (особено котки);
3. Хронични вирусни инфекции (сравнително редки, често относителни) или виремия;
4. Реакция на ваксинация при млади кучета;
5. Хронична антигенна стимулация поради бактериално възпаление(при бруцелоза, туберкулоза);
6. Хронична алергични реакции(тип IV);
7. Хронична лимфоцитна левкемия;
8. Лимфом (рядко);
9. Остра лимфобластна левкемия.


Абсолютната лимфопения е намаляване на абсолютния брой на лимфоцитите в кръвта под нормалните граници.


Причини:


1. Повишена концентрация на ендогенни и екзогенни глюкокортикоиди (с едновременна моноцитоза, неутрофилия и еозинопения):
- лечение с глюкокортикоиди;
- първичен и вторичен синдром на Кушинг.
2. Вирусни заболявания(кучешки парвовирусен ентерит, котешка панлевкопения, кучешка чума; инфекция с вирус на котешка левкемия и вирус на котешка имунна недостатъчност и др.);
3. Началните етапи на инфекциозно-токсичния процес (поради миграцията на лимфоцити от кръвта в тъканите до огнища на възпаление);
4. Вторични имунни дефицити;
5. Всички фактори, които могат да причинят намаляване на хемопоетичната функция на костния мозък (вижте левкопения);
6. Имуносупресори;
7. Облъчване на костен мозък и имунни органи;
8. Хронична уремия;
9. Сърдечна недостатъчност (циркулаторна недостатъчност);
10. Загуба на богата на лимфоцити лимфа:
- лимфангиектазия (загуба на аферентна лимфа);
- руптура на гръдния канал (загуба на еферентна лимфа);
- лимфен оток;
- хилоторакс и хиласцит.
11. Нарушаване на структурата на лимфните възли:
- мултицентричен лимфом;
- генерализирано грануломатозно възпаление
12. След стрес за дълго време, заедно с еозинопения - признак на недостатъчна почивка и лоша прогноза;
13. Миелофтиза (заедно с намаляване на съдържанието на други левкоцити и анемия).

МОНОЦИТИ

Моноцитите принадлежат към мононуклеарната фагоцитна система.
Те не образуват резерв в костния мозък (за разлика от другите левкоцити), циркулират в кръвта от 36 до 104 часа, след което мигрират в тъканите, където се диференцират в органо- и тъканно-специфични макрофаги.
Съдържание на моноцити
(абсолютно и относително - процент от всички левкоцити)
в кръвта е нормално.
Тип Граница на флуктуация, x109/l Процент моноцити
Кучета 0,066 - 0,47 1 - 5
Котки 0,08 - 0,9 1 - 5


Моноцитозата е увеличаване на броя на моноцитите в кръвта.


Причини:


1. Инфекциозни заболявания:
 период на възстановяване след остри инфекции;
- гъбични, рикетсиозни инфекции;
2. Грануломатозни заболявания:
- туберкулоза;
- бруцелоза.
3. Болести на кръвта:
- остра монобластна и миеломонобластна левкемия;
- хронична моноцитна и миеломоноцитна левкемия.
4. Колагенози:
- системен лупус еритематозус.
5. Остри възпалителни процеси (с неутрофилия и изместване вляво);
6. Хронични възпалителни процеси (с нормално нивонеутрофили и/или без ляво изместване);
7. Некрози в тъканите (възпалителни или туморни);
8. Повишаване на ендогенни или въвеждане на екзогенни глюкокортикоиди (при кучета, заедно с неутрофилия и лимфопения);
9. Токсичен, супраспинален възпалителен или тежък вирусни инфекции(кучешки парвовирусен ентерит) - заедно с левкопения.
Моноцитопенията е намаляване на броя на моноцитите в кръвта. Моноцитопенията е трудна за оценка поради ниските нива на моноцити в кръвта при нормални условия.
Намаляване на броя на моноцитите се наблюдава при хипоплазия и аплазия на костния мозък (вижте левкопения).

ПЛАЗМОЦИТИ

Плазмени клетки- клетки от лимфоидна тъкан, които произвеждат имуноглобулини и се развиват от В-лимфоцитни прекурсорни клетки през по-млади етапи.
Обикновено в периферната кръв няма плазмени клетки.


Причини за появата на плазмени клетки в периферната кръв:


1. Плазмоцитом;
2. Вирусни инфекции;
3. Дългосрочно персистиране на антигена (сепсис, туберкулоза, актиномикоза, автоимунни заболявания, колагенози);
4. Новообразувания.

СКОРОСТ НА УТАЯВАНЕ НА ЕРИТРОЦИТИТЕ (ESR)

Скоростта на утаяване на еритроцитите в плазмата е право пропорционална на масата на еритроцитите, разликата в плътността на еритроцитите и плазмата и обратно пропорционална на вискозитета на плазмата.
IN нормална СУЕпри кучета 2,0-5,0 mm/час, при котки 6,0-10,0 mm/час.


Ускорете ESR:


1. Образуване на монетни колони и аглутинация на червените кръвни клетки (масата на утаяващите се частици се увеличава) поради загубата на отрицателен заряд на повърхността на червените кръвни клетки:
- повишена концентрация на някои кръвни протеини (особено фибриноген, имуноглобулини, хаптоглобин);
- кръвна алкалоза;
- наличие на антиеритроцитни антитела.
2. Еритропения.
3. Намален плазмен вискозитет.
Заболявания и състояния, придружени от ускорена СУЕ:
1. Бременност, следродилен период;
2. Възпалителни заболяванияразлични етиологии;
3. Парапротеинемия (мултиплен миелом - особено изразена СУЕ до 60-80 mm/час);
4. Туморни заболявания (карцином, сарком, остра левкемия, лимфом);
5. Болести на съединителната тъкан (колагенози);
6. Гломерулонефрит, бъбречна амилоидоза, протичаща с нефротичен синдром, уремия);
7. Тежки инфекциозни заболявания;
8. Хипопротеинемия;
9. Анемия;
10. Хипер- и хипотиреоидизъм;
11. Вътрешен кръвоизлив;
12. Хиперфибриногенемия;
13. Хиперхолестеролемия;
14. Странични ефектилекарства: витамин А, метилдопа, декстран.


Левкоцитоза, повишена ESR и съответните промени в левкоцитната формула - надежден знакналичието на инфекциозни и възпалителни процеси в организма.


Забавете ESR:


1. Ацидоза на кръвта;
2. Повишаване на плазмения вискозитет
3. Еритроцитоза;
4. Изразени промени във формата и размера на червените кръвни клетки (сърповидност, сфероцитоза, анизоцитоза - тъй като формата на клетките предотвратява образуването на монетни колони).
Болести и състояния, придружени от забавяне на ESR:
1. Еритремия и реактивна еритроцитоза;
2. Тежки симптоми на циркулаторна недостатъчност;
3. Епилепсия;
4. Сърповидноклетъчна анемия;
5. Хиперпротеинемия;
6. Хипофибриногенемия;
7. Механична жълтеница и паренхимна жълтеница (предполага се поради натрупване на жлъчни киселини в кръвта);
8. Прием на калциев хлорид, салицилати и живачни препарати.