Висок риск от синдром на Даун, анализ и скрининг. Какъв риск се счита за нисък и какъв за висок? Диабет и бременност

В профилактиката на мултифакторни заболявания с наследствена предразположеност, които включват IDDM, необходима връзка емедицинско и генетично консултиране. Основната задача на медико-генетичната консултация е да определи генетичния риск от дадено заболяване и да обясни значението му в достъпна форма. При диабет най-често съпрузите се обръщат към медико-генетична консултация, за да се прецени рискът от заболяването при бъдещи деца поради наличие на това заболяване при предишни деца или при самите съпрузи и/или техните роднини.Популационните генетични изследвания позволиха да се изчисли това принос на генетичните фактори за развитието на диабет споставя 60-80%.В тази връзка изключително актуално и перспективно е медико-генетичното консултиране на близките на болните от диабет.

Основните въпроси, с които обикновено трябва да се занимава лекарят, са свързани с риска от развитие на диабет съществуващи деца или братя и сестриболен, способността да го класифицирате, както и прогноза във връзка сбъдещи (планирани) членове на семейството.

Консултирането на семействата на пациенти с диабет тип 1 се състои от няколко общоприети етапа, които имат свои собствени характеристики за тази популация.

11.1. Етапи на консултиране

Първи етап на консултация – уточняване на диагнозата на заболяването.

Обикновено диагностицирането на диабет тип 1 в детска и юношеска възраст не е трудно. Въпреки това, ако други членове на семейството имат диабет, е необходимо да се провери техният тип диабет, което в някои случаи може да бъде трудна задача и ще изисква от лекаря внимателно да събере медицинската история на болния роднина. Диференциалната диагноза между двата основни типа диабет (1 и 2) се извършва по общоприети критерии.

Генетичната разнородност на двата основни типа диабет, доказана в популационни генетични изследвания, показва тяхната нозологична самостоятелност и независимост на наследяване. Това означава, че случаите на диабет тип 2 в родословието на отделните пациенти са случайни и не трябва да се вземат предвид при оценката на семейния риск.

При провеждане на медицинско генетично консултиране също е необходимо да се изключи генетични синдроми, които включват захарен диабет, тъй като се характеризират с моногенно унаследяване.

Втори етап на консултация – определяне на риска от развитие на заболяването по отношение на съществуващите членове на семейството и планираното потомство.

Емпирично са получени средни оценки на риска от развитие на диабет за членове на семейството с роднини с диабет тип 1. Най-голям риск имат роднините от първа степен на родство (деца, родители, братя и сестри) – средно от 2,5-3% до 5-6%. Установено е, че заболеваемостта от диабет при деца от бащи с диабет тип 1 са с 1-2% по-високиотколкото от майки с диабет тип 1.

Във всяко конкретно семейство рискът от развитие на заболяването зависи от много фактори: броя на болните и здрави роднини, възрастта на проява на диабет при членовете на семейството, възрастта на лицето, което се консултира и др.

Таблица 8

Емпиричен риск за роднини на пациенти с диабет тип 1

С помощта на специален метод те се изчисляват таблици на риска за развитиеDM 1вид в зависимост от броя на болните и здрави роднини и възрастта на консултираното лице За семейства от различен тип. Типовете семейства, родителският статус и броят на засегнатите братя и сестри са представени в таблица 9.

Поздравления! Ако си спомняте деня, в който вие или вашето дете сте били диагностицирани с диабет, ще си спомните и въпросите, които започнаха да тревожат вашия трескав мозък. Смея да предположа, че никога не сте получили отговор на въпроса: „Откъде се е появил захарният диабет тип 1, ако в семейството ви няма човек с това заболяване?“, както и на въпроса: „Захарен диабет тип 1 ли е. наследени и/или какво ще се случи с останалите деца и членове на семейството?“ Вероятно те все още ви притесняват и до днес.

Днес ще се опитам да отговоря на тези въпроси. Диабет тип 1 е мултифакторно и полигенно заболяване. Никога не можеш да кажеш кой фактор е водещ или основен. Някои учени разделят диабет тип 1 на подтипове: А и В. Между другото, диабет тип 1 не е единствената форма, която може да се появи при. по-младото поколение. Ако прочетете статията „“, тогава ще научите повече за този проблем

Подтип А е свързан с автоимунно увреждане на панкреаса и откриването на антитела потвърждава това. Този подтип най-често се открива при деца и юноши. Но се случва, че антителата не се откриват, но има диабет. В такъв случай ние говорим заза подтип B, който възниква по съвсем различни причини, несвързани с работата имунна система. Към днешна дата тези причини не са известни и затова диабетът се нарича идиопатичен.

Генетично изследване за диабет тип 1

Едно е ясно: тип 1 е заболяване с наследствена предразположеност. Какво означава това и как се различава от просто наследствено заболяване? Факт е, че наследствено заболяванее предаване на ген от поколение на поколение или мутация на ген в бъдещ организъм. В такъв случай нов човеквече се ражда с патология или някакъв друг дефект.

При диабета всичко е по-сложно. Има определени гени и генни участъци (ще говоря с опростени думи), които, комбинирани по определен начин по време на срещата на яйцеклетката и спермата, повишават риска от развитие на диабет тип 1. С други думи, не се предава по наследство дефектен ген, и степента на риск за на това заболяване. А за да се материализира болестта, тоест да се развие, са необходими провокиращи фактори и висока степен на риск. Ако проведете генетично изследване, можете да идентифицирате определена степен на риск, която може да бъде висока, средна и ниска. Следователно, изобщо не е необходимо, ако човек е застрашен от развитие на диабет тип 1, той ще го получи. Най-често развитието на диабет се свързва със следните гени или генни региони – HLA DR3, DR4 и DQ.

В това отношение няма никакво значение дали нямате известна история на диабет тип 1 във вашето семейство сега или в минали поколения. Напълно възможно е вашите предци да са имали малък риск, което така и не се осъществи. И освен това, колко добре познавате родословното си дърво? От какво са умирали деца и възрастни? в млада възраст? Все пак диагностиката преди 100 години не е била от най-прогресивните и лекарите не са били често посещавани, особено в селските райони.

Затова смятам, че е напълно безсмислено да се търсят виновни за разпространението на диабета. Освен това не трябва да се упреквате (обръщам се към родителите), че сте пропуснали, не сте гледали и не сте спасили детето. За да облекча вината ви, ще кажа това автоимунен процесвъзниква много преди това клинични проявлениядиабет, след около няколко години, а в някои случаи и над дузина години. Оттогава много вода е изтекла под моста и е трудно да се сети кой за какво е виновен. В крайна сметка, колкото и да ни се иска, не можем да предпазим нито себе си, нито децата си от всичко лошо. Случват се лоши неща и ако това се е случило, тогава да мислим, че това е СЪДБАТА, която не може да се излъже.

Имуноанализ за захарен диабет тип 1

Когато в семейството има роднина с диабет тип 1, за да се предскаже честотата на диабет в други членове на семейството, се използва не само генетично изследване, но и определяне на автоантитела, т.е. антитела, които се борят срещу тъканите. собствено тяло. Например, ако по-голямо дете има диабет тип 1, тогава родителите могат да проведат генетични изследвания и тестове за антитела на по-малкото дете, за да идентифицират рисковете от развитие на диабет, тъй като антителата се появяват много преди очевидните.

• антитела към островни бета клетки - ICA (откриват се в 60-80% от случаите) Когато се комбинира с GAD, рязко повишава риска от развитие на диабет, но изолирано рискът от диабет е малък.
• антиинсулинови антитела - IAA (откриват се в 30-60% от случаите) В изолирана форма има малък ефект върху развитието на диабет; рискът се увеличава при наличие на други антитела.
• антитела към глутамат декарбоксилаза - GAD (откриват се в 80-95% от случаите) Повишава риска от развитие на диабет, дори в изолирана форма.

Но и тук всичко е двусмислено. Откриването на която и да е група антитела при дете изобщо не означава, че то ще развие диабет в бъдеще. Това означава само, че това дете има висок риск от развитие на диабет, който може да не се осъществи. И тогава никой не е застрахован от лабораторна грешка, така че се препоръчва да се повторят тестовете след 1-2 месеца.

Затова не препоръчвам да се правят изследвания за антитела при здрави членове на семейството. IMHO. Какво можете да направите, ако знаете, че имате антитела? Разбира се, можете да влезете в експериментални групи, където тестват методи за предотвратяване на диабет във високорискови групи, но бихте ли искали да се изложите на повече здраво детенеизвестни манипулации? Лично аз не съм готов, а и живеем далеч от центъра на страната.

Освен ненужни проблеми, тези действия не носят нищо добро. Постоянните очаквания и мисли може един ден да се сбъднат. Лично аз вярвам, че нашите мисли са материални и всичко, което мислим, ще се сбъдне някой ден. Следователно не е нужно да мислите за лошото, просто привличайте положителни мисличе всичко ще бъде наред и всички останали членове на семейството ще бъдат здрави. Единственото, което може да се направи, е периодично определяне на глюкоза на гладно и/или гликиран хемоглобин, за да не се пропусне проявата на диабет. Защото засега няма доказани методи, които на 100% да предотвратят развитието на диабет, а и изобщо няма.

Друг въпрос, който засяга всеки с диабет тип 1: „Какви са рисковете от заболеваемост при деца, чиито родители имат диабет или ако семейството вече има дете с диабет?“ Наскоро приключи 16-годишно проучване, което изследва прогнозата на заболяването в семействата на пациентите. Ето неговите резултати.

Рискът от развитие на диабет без известен роднина с диабет е само 0,2 - 0,4%. Колкото по-голям е броят на роднините с диабет в семейството, толкова по-висок е рискът. Рискът от развитие на диабет за членове на семейството на човек с диабет тип 1 е средно 5%. Ако две деца в семейството са болни, рискът за третото е 9,5%. Ако двама родители са болни, тогава рискът от развитие на диабет тип 1 за детето вече се увеличава до 34%. В допълнение, рискът от развитие на диабет тип 1 зависи от възрастта, на която заболяването се проявява при пациента. Колкото по-рано се разболее дете в семейството, толкова по-голям е рискът за второто. Ако проявата на заболяването е настъпила преди 20-годишна възраст, тогава рискът за второто дете е 6,4%, а ако проявата на заболяването е на възраст над 20 години, тогава рискът е 1,2%.

Профилактика на диабет тип 1

Но какво може да се направи, за да се намали влиянието на тези прословути фактори, които отключват автоимунния процес? И въпреки че всичко се свежда до „късмет или нещастие“, все пак можете да се опитате да им повлияете колкото е възможно повече. Ето списък с начини за първична профилактикаДиабет тип 1.

• Внимание вътрематочна инфекцияИ вирусни инфекциимайки по време на бременност.
• Профилактика на някои вирусни инфекции при деца и юноши, като рубеола, морбили, паротит, ентеровируси, варицела, грип.
• Навременно лечение хронични огнищаинфекции (синузит, кариозни зъби и др.).
• Провеждане на навременна ваксинация, стриктно по правилата и доказани ваксини.
• Изключване на протеини краве млякоот диетата на кърмачетата.
• Дългосрочно кърмене (минимум 18 месеца).
• С изключение на въвеждането на допълващи храни, съдържащи продукти, съдържащи глутен, на възраст под една година.
• Изключване от диетата на храни, съдържащи нитрати, консерванти и оцветители.
• Нормален прием на витамин D.
• Добавяне на добавки с омега 3 мастни киселини към вашата диета.
• Намалена консумация бързи въглехидратизащото прекомерно натоварваневърху панкреаса.

В заключение искам да кажа. Всички сме различни, с в различна степенбезпокойство и „не му пука“. Следователно от вас зависи да решите дали детето ви да бъде диагностицирано с диабет или да отидете сами. Запитайте се: „Готови ли сте за положителен резултат? Готови ли сте да разберете, че детето ви е изложено на риск от развитие на това заболяване и в същото време да продължите да живеете спокойно? Ако да, тогава можете да се подложите на пълен генетичен и имунен преглед. Най-добре е да направите това в самото сърце на страната и ендокринологията - Ендокринологичния научен център в Москва.

Завършвам дотук и искрено пожелавам на здравите хора да избягват „удоволствията” на диабет тип 1. До следващия път.

Нурия пита:

Здравейте, аз съм на 25 години. В 16 седмица от бременността ме изследваха за AFP 30.70/0.99 mΩ/ и hCG 64.50/3.00 mΩ/. Моля, кажете ми какво означават числата каква е вероятността ми за SD? Бременността ми е 27-28 седмица. Току-що разбрах за резултатите от скрининга. По това време пиех Duphaston. Кажете ми колко висок е рискът. Благодаря ти.

Въз основа на данните, които предоставихте, рискът детето да има генетична патология на синдрома на Даун е нисък.

Нурия пита:

Благодаря за пояснението. Но центърът ми даде праг на риска, така че съм много притеснен. Какви други данни се вземат предвид, за да се идентифицира рискът от диабет? TVP - 1,5, ДНК - 3,2. Ултразвукът на 20 седмица е добър. Благодаря отново.

Най-вероятно степента на риск е изчислена, като се вземе предвид повишена стойност HCG, тъй като останалите показатели от изследването, което си представил са в норма.

Наталия пита:

Здравейте. Помогнете, моля, получих резултата от скрининга и се разстроих. Те поставят:
Свързан с възрастта риск от диабет 1:371
Стойност на риска от DM 1:306
AFP 26.04 Mohm 0.86, HCGb 29.74 Mohm 1.87
Пълни 35 години, втора бременност, скрининг в 15 седмица 6 дни, с разлика - направиха ултразвук и след 2 дни взеха кръв.
Заключение - прагов риск.
Кажете ми, че всичко е лошо? Благодаря ти

Рискът от генетична патология може да се оцени като малко над средния. Няма причина за паника. Скринингът оценява само вероятността от раждане на дете с генетична патология.

Наталия пита:

в допълнение към предишния.
Направен е ултразвук на 16 седмица. TVP 4 мм (четох, че обикновено мерят до 14 седмица).
на 17,5 седмици, носни кости 6,3 мм
Явно на базата на TVP е поставен прагът за SD. Трябва ли да се страхуваме? Благодаря ти.

Размерът на носната кост наистина е нормален, дебелината на TVP се измерва преди 14-та седмица от бременността, като CTE на плода (кокцигеално-париетален размер) не е по-висок от 84 mm, по-късно от този период или по-късно високи ставкиРезултатите от KTE от проведеното изследване престават да бъдат информативни. Следователно във вашия случай няма място за притеснение. Вашият праг на риск не е определен въз основа на анализ на резултатите от скрининг и ултразвук, а въз основа на вашата възраст.

Елена пита:

Здравейте! Моля, кажете ми резултати от пренатален скрининг: 1-ви триместър риск от тризомия 21 1: 2472; 2-ри триместър 1:29 Как е възможно това? Комплексен риск 1:208 Резултати от изследването 13 седмици: St. ) 17 седмици: AFP 32,39 IU/ml (1,16 MoM) hCG 207,00 IU/l (6,44 MoM) Вторият ултразвук ще бъде на 12 септември (21 седмица), първият на 12 седмица. 4 дни не са открити отклонения. Какви действия да предприемете? На 34 години съм и имам един плод.

Резултатите от втория скрининг показаха рязко повишено ниво на hCG, моля, изяснете дали сте приемали някакви лекарства преди да вземете кръв за анализ?

Оксана пита:

скрининг 18 седмици 4 дни.
възрастов риск 1:135, рискова стойност 1:322
AFP 51,99 на месец 1,16
HCGb 15.60 MoM 1.61
Задават праг на риска, какво да правя?
Аз съм на 39 години, второ дете, ултразвук в 21,3 седмици. без отклонения

Уважаема Оксана, параметрите на биохимичния скрининг са напълно нормални. Ако според резултатите ултразвукова диагностика, няма отклонения - няма и показания за инвазивна диагностика. Обикновено, в подобна ситуация, на 22 седмица от бременността се извършва експертен ултразвук за това изследване, максималния брой на квалифициран специалистс опит в пренаталната диагностика рожденни дефектиразвитие. Въпреки това, ако се доверите на квалификацията на специалиста, извършил последния ултразвук на 21,3 седмици, няма нужда да повтаряте изследването. Можете да прочетете повече за дешифрирането на резултатите от биохимичния скрининг през втория триместър на бременността в нашия раздел с медицинска информация, посветен на този методдиагностика, със същото име: Скрининг. .

Наталия пита:

Здравейте! Моля, помогнете ми да разбера резултатите от 1 скрининг в рамките на 10 седмици. На 41 години съм, тежа 48 кг. Предстои първото раждане.
КТР 31мм
TVP до 2 мм
hCGb маркер: конц. 100,1 ng/mL, кор. ВОМ 1.28
маркер PAPP-A: конц. 623,9 mU/L, кор. PTO 0,58
Те диагностицираха висок риск от синдром на Даун, възрастов риск 1:70, изчислен риск 1:65
Доколкото знам границите на нормата за ВОМ са 0,5-2,0. Моите показания на ВОМ не отговарят ли на стандарта? Имам ли повод за безпокойство? Нито на моето семейство, нито на съпруга ми вродени патологииНе. Ще съм ви много благодарна за отговора.

За съжаление, когато определят риска от хромозомни аномалии, те се ръководят не само от показателите на IOM, но оценяват резултатите от всички изследвания в комбинация. Ако рискът се окаже висок, се препоръчва консултация с генетик, който заедно с лекуващия гинеколог може да вземе решение за диагностична интервенция като амниоцентеза. Повече подробности за този проблемМожете да получите информация в тематичния раздел на нашия уебсайт: Синдром на Даун

Научете повече по тази тема:

• Кръвен тест за антитела - откриване на инфекциозни заболявания (морбили, хепатит, хеликобактер, туберкулоза, ламблия, трепонема и др.). Кръвен тест за наличие на Rh антитела по време на бременност.
• Кръвен тест за антитела - видове (ELISA, RIA, имуноблотинг, серологични методи), норма, интерпретация на резултатите. Къде мога да направя кръвен тест за антитела? Цена за изследване.
• Биохимичен кръвен тест - норми, значение и интерпретация на показателите при мъже, жени и деца (по възраст). Концентрация на йони (електролити) в кръвта: калий, натрий, хлор, калций, магнезий, фосфор
• Биохимичен кръвен тест - норми, значение и интерпретация на показателите при мъже, жени и деца (по възраст). Показатели за метаболизъм на желязо: общо желязо, трансферин, феритин, хаптоглобин, церулоплазмин

Генетика на захарния диабет

Прогноза за диабет тип 1 във високорискови групи

Т. В. Никонова, И. И. Дедов, Я.И.П. Алексеев, М.Н. Болдирева, О.М. Смирнова, И.В. Дубинкин*.

Ендокринологични научен център I (директор - академик на RAMS I.I. Дедов) RAMS, I *SSC „Институт по имунология“ I (директор - академик на RAMS R.M. Khaitov) M3 RF, Москва. аз

В момента се наблюдава увеличение на заболеваемостта от диабет тип 1 в целия свят. Това се дължи на редица фактори, включително увеличаване на продължителността на живота на пациентите с диабет поради подобрена диагностика и медицински грижи, повишена плодовитост и влошаване на екологичните ситуации. Честотата на диабета може да бъде намалена чрез предпазни мерки, прогнозиране и предотвратяване на развитието на болестта.

Предразположението към диабет тип 1 е генетично обусловено. Честотата на диабет тип 1 се контролира от редица гени: инсулиновият ген на хромозома 11p15.5 (YOM2), гени на хромозома \\ts (YOM4), 6ts (YOM5). Най-висока стойностот известните генетични маркери на диабет тип 1, те имат гените на HLA региона на хромозома 6p 21.3 (SHOM1); до 40% от генетичната предразположеност към диабет тип 1 е свързана с тях. Никой друг генетичен регион не определя риска от развитие на заболяването, сравним с HLA.

Висок рискразвитието на диабет тип 1 се определя от алелни варианти на HLA гените: OYAB1*03,*04; OOA1 *0501,*0301, OOB1*0201, *0302. 95% от пациентите с диабет тип 1 имат антигени OT*3 или 011*4, а от 55 до 60% имат и двата антигена. Алелът OOB1*0602 е рядък при диабет тип 1 и се счита за защитен.

Клиничните прояви на диабета се предхождат от латентен период, характеризиращ се с наличието на островни маркери клетъчен имунитет; тези маркери са свързани с прогресивно разрушаване.

По този начин, за членове на семейството с анамнеза за диабет тип 1, прогнозата на заболяването е особено важна.

Целта на тази работа беше да се формират групи с висок риск от развитие на диабет тип 1 в руската популация на жителите на Москва въз основа на изследване на генетични, имунологични и метаболитни маркери на диабета, използвайки семеен подход.

Материали и методи на изследване

Изследвахме 26 семейства, в които един от родителите има диабет тип 1, от които 5 бяха „нуклеарни“ семейства (общо 101 души). Броят на анкетираните членове на семейството варира от 3 до 10 души. Има 13 бащи с диабет тип 1 и 13 майки с диабет тип 1. Няма семейства, в които и двамата родители са с диабет тип 1.

Изследвани са 37 потомци на пациенти с диабет тип 1 без клинични прояви на заболяването, от които 16 жени, 21 мъже. Възрастта на изследваното потомство варира от 5 до 30 години. Разпределението на изследваните приплоди по възраст е представено в табл. 1.

маса 1

Възраст на изследваните деца (потомства)

Възраст (години) Брой

В семейства с майки с диабет са прегледани 17 деца (8 момичета, 9 момчета), в семейства с бащи с диабет - 20 деца (8 момичета, 12 момчета).

Автоантитела към (3-клетки (ICA) се определят по два начина: 1) върху криосекции на човешки панкреас от кръвна група I (0) в индиректна имунофлуоресцентна реакция; 2) в имуноензимния тест “ISLETTEST” на “Biomerica”. Инсулиновите автоантитела (IAA) са определени в ензимен имуноанализ“ISLETTEST” от “Biomerica”. Определянето на антитела срещу HDK се извършва с помощта на стандартни комплекти„Диаплети против GAD“ от Boehringer Mannheim.

Определянето на С-пептид се извършва с помощта на стандартни комплекти от Sorrin (Франция).

HLA типизиране на пациенти с диабет и членове на техните семейства е извършено за три гена: DRB1, DQA1 и DQB1, като се използват специфични за последователността праймери, използвайки полимераза верижна реакция(PCR).

Изолиране на ДНК от лимфоцити периферна кръвпроведено по метода на R. Higuchi N. Erlich (1989) с някои модификации: 0,5 ml кръв, взета с EDTA, се смесва в 1,5 ml епруветки за микроцентрофуга на Eppendorf с 0,5 ml разтвор за лизис, състоящ се от 0,32 М захароза, 10 mM Tris - НС1 рН 7.5, 5 mM MgC12, 1% Triton X-100, центрофугира се за 1 минута при 10 000 rpm, супернатантата се отстранява и пелетите от клетъчно ядро ​​се промиват 2 пъти с посочения буфер. Последващата протеолиза се извършва в 50 μl буферен разтвор, съдържащ 50 mM KCI, 10 mM Tris-HC1 рН 8.3, 2.5 mM MgCI2, 0.45% NP-40, 0.45% Tween-20 и 250 μg/ml протеиназа К при 37° C за 20 минути. Протеиназа К се инактивира чрез нагряване в твърдотелен термостат при 95 ° С в продължение на 5 минути. Получените ДНК проби веднага се използват за типизиране или се съхраняват при -20°C. ДНК концентрацията се определя от

флуоресценцията с Hoechst 33258 на ДНК флуориметър (Hoefer, САЩ) е средно 50-100 μg/ml. Общо времеПроцедурата по извличане на ДНК продължи 30-40 минути.

PCR се провежда в 10 μl реакционна смес, съдържаща 1 μl ДНК проба и следните концентрации на останалите компоненти: 0,2 mM всеки dNTP (dATP, dCTP, dTTP и dGTP), 67 mM Tris-HCl pH=8,8, 2,5 mM MgC12, 50 mM NaCl, 0.1 mg/ml желатин, 1 mM 2-меркаптоетанол и 1 единица термостабилна ДНК полимераза. За да се предотвратят промени в концентрациите на компонентите на реакционната смес поради образуването на кондензат, реакционната смес се покрива с 20 μl минерално масло (Sigma, САЩ).

Амплификацията се извършва на многоканален термоциклер "MS2" (JSC DNA-Technology, Москва).

Типизирането на DRB1 локуса беше извършено на 2 етапа. По време на първия кръг геномната ДНК беше амплифицирана в две различни епруветки; в 1-ва епруветка е използвана двойка праймери, които амплифицират всички известни алели на гена DRB1, във 2-ра епруветка е използвана двойка праймери, които амплифицират само алели, включени в групите DR3, DR5, DR6, DR8. И в двата случая температурен режимамплификацията (за термоциклер “MC2” с активно регулиране) е както следва: 1) 94°C - 1 мин.; 2) 94°С - 20 s (7 цикъла), 67°С - 2 s; 92“C - 1 s (28 цикъла); 65°C - 2 s.

Получените продукти се разреждат 10 пъти и се използват във 2-рия кръг при следните температурни условия: 92°C - 1 s (15 цикъла);

Типизирането на DQA1 локуса се извършва на 2 етапа. На 1-ви етап се използва двойка праймери, усилващи всички специфики на локуса DQA1, използвани са двойки праймери, усилващи спецификите *0101, *0102, *0103, *0201, *0301; 0401, *0501, *0601.

Първият етап се проведе по програма: 94 “C - 1 минута; 94°C - 20 s (7 цикъла), 58"C - 5 s; 92"C - 1 s, 5 s (28 цикъла), 56"C - 2 s.

Продуктите на амплификация от 1-ви етап се разреждат 10 пъти и се използват на 2-ри етап: 93“C - 1 s (12 цикъла), 62“C - 2 s.

Типизирането на DQB1 локуса също беше извършено на 2 етапа; на 1-ви се използва двойка праймери, които усилват всички специфики на локуса DQB1, температурният режим е както следва: 94°C - 20 s (7 цикъла); - 5 s. - 1 s (28 цикъла);

На 2-ри етап са използвани двойки праймери, които усилват специфичностите: *0201, *0301, *0302, *0303, *0304, *0305, *04, *0501, *0502, *0503, *0601, *0602/ 08 ; Продуктите от 1-ви етап се разреждат 10 пъти и се извършва амплификация в следния режим: 93°C - 1 s (12 цикъла);

Идентифицирането на продуктите на амплификация и тяхното разпределение по дължина се извършва в ултравиолетова светлина (310 nm) след електрофореза за 15 минути или в 10% PAAG, 29:1 при напрежение 500 V, или в 3% агарозен гел при напрежение 300 V (и в двата случая дължината е 3-4 cm) и се оцветява с етидиев бромид. Разграждане на плазмид pUC19 с Msp I рестрикционен ензим се използва като маркер за дължина.

Резултати и тяхното обсъждане

Установено е, че в 26 семейства от 26 родители с диабет тип 1, 23 души (88,5%) са носители на HLA генотипове, свързани с диабет тип 1 DRB1 *03- DQA1 *0501 - DQB1 *0201; DRB1 *04-DQAl *0301-DQB 1*0302 или техните комбинации (Таблица 2). При 2 пациенти генотипът съдържа алел DQB 1*0201, свързан с диабет тип 1; само 1 пациент в тази група имаше DRB1 *01 /01 генотип, който

Разпределение на генотипове сред родителите с диабет тип 1

01?B 1 4/4 2 E1?B 1 - -

Общо 23 (88,5%) Общо 3

0I?B1- POAI-ROI хаплотипове, открити при изследваните индивиди

оигви оаии рови

В популационни проучвания, които не са свързани с диабет тип 1, не разграничихме подтипове на OK B1 *04, въпреки че полиморфизмът на този локус може да повлияе на риска от развитие на диабет тип 1.

При генотипизиране на преките потомци на пациенти с диабет тип 1 беше установено, че от 37 души, 30 (81%) са наследили генотиповете OYAV1*03, 011B1*04 и тяхната комбинация, свързана с диабет тип 1; 3 индивида са имали свързани алели с диабет тип 1 в техния генотип: при 1 - TOA 1*0501, при 2 пациенти - TOA 1*0201. Общо 4 от 37 субекта са имали неутрален генотип по отношение на диабет тип 1.

Разпределението на генотиповете на потомството е показано в табл. 3. Редица проучвания отбелязват, че бащите с диабет тип 1 са по-склонни да предадат генетична предразположеност.

предразположеност към диабет (по-специално HLA-01*4 генотипове) при техните деца, отколкото при техните майки. Проучване в Обединеното кралство обаче не потвърди значим ефект на родителския пол върху HLA-зависимото предразположение при децата. В нашата работа също не можем да отбележим подобен модел на предаване на генетична предразположеност: 94% от децата са наследили HLA генотипове, свързани с диабет тип 1, от болни майки и 85% от болни бащи.

Известно е, че ЗД е мултигенно, мултифакторно заболяване. Като фактори външна среда, играейки ролята на отключващ фактор, се разглежда храненето - консумация в кърмаческа възраст и ранно детствопротеини от краве мляко. де-

Таблица 3

Разпределение на генотипове сред деца, чиито родители имат диабет тип 1

Генотипове, свързани с диабет тип 1 Брой носители Генотипове, които не са свързани с диабет тип 1 Брой носители

0!*B 1 4/4 4 01*B 1 1/15 1

Общо 30 (81%) Общо 7 (19%)

тези с новодиагностициран диабет имат повишени ниваантитела срещу белтъка на кравето мляко, p-лактоглобулин и говежди серумен албумин в сравнение със здрави братя и сестри, което се счита за независим рисков фактор за развитието на диабет.

В групата от 37 изследвани деца само 4 са били на кърменедо 1 година са получили 26 души кърмадо 1,5-3 месеца, 4 - до 6 месеца, 3 са били на адаптирано мляко от първите седмици от живота. От 5 деца с положителни антитела към β-клетките 2 са кърмени до 6 месеца, 3 до 1,5 - 3 месеца; след това се получават смеси от кефир и мляко. Така 89% от изследваните деца са получавали протеини от краве мляко в ранна детска възраст, което може да се разглежда като рисков фактор за развитие на диабет при генетично предразположени лица.

В изследваните семейства клинично здрави потомци са оценени за цитоплазмени антитела, автоантитела към инсулин и HDC. От 37 изследвани 5 деца са положителни за наличие на антитела към β-клетките, като всички 5 са ​​носители на генетична предразположеност към диабет (табл. 4). 3 от тях (8%) са имали антитела към HDK, 1 - към ACTC, 1 - антитела към ACTC

Таблица 4

Генотипове на деца, положителни за антитела към (3-клетъчни

Генотип Брой положителни антитела

и инсулин. Така 5,4% от децата имат антитела към ACTC; 2 деца с положителни антитела към HDC са потомци на „нуклеарни“ семейства. Възрастта на децата към момента на откриване на антитела е посочена в табл. 5. За прогнозиране на диабет голямо значениеимат нива на ACTC титър: колкото по-висок е титърът на антитялото, толкова по-вероятноразвитие на диабет, същото важи и за антитела срещу инсулин. Според литературата, високи ниваантителата срещу HDK се свързват с по-бавна скорост на развитие на диабет (10% на 4 години), отколкото ниски нива(50% на 4 години), вероятно защото високите нива на анти-HDC антитела показват „преференциално“ активиране хуморален имунитети в по-малка степен върху активирането на клетъчно медиираните

Таблица 5

Възраст на изследваните деца към момента на откриване на антитела

Възраст на изследваните деца (години) Брой деца, положителни за антитела

отслабен имунитет (диабет тип 1 се причинява главно от клетъчно медиирано разрушаване на Р клетки от цитотоксични Т лимфоцити). Комбинацията от различни антитела осигурява най-оптималното ниво на прогнозиране.

Децата с ниско тегло при раждане (под 2,5 kg) развиват диабет много по-рано от децата, родени с нормално тегло. От данните от анамнезата прави впечатление, че от 5 деца с положителни антитела, 2 са родени с телесно тегло над 4 kg, 2 - под 2,9 kg.

При преки потомци на пациенти с диабет тип 1 е определено основното ниво на С-пептида; при всички тях този показател е в рамките на нормата (включително при деца с положителни антитела към Р-клетките); С-пептид не е извършен.

1. Пациентите с диабет тип 1 в 88,5% от случаите са носители на генотипове OYAVROZ, OOA1*0501, BOV1*0201, OYAV1*04, BOA1*0301, EOV1*0302 или техните комбинации.

2. При деца от семейства, в които един от родителите има диабет тип 1, в 89% от случаите се открива генетична предразположеност към диабет (при наличие на един болен родител), докато 81% наследяват генотипове, напълно свързани с диабет тип 1, което им позволява да се считат за група с много висок риск от развитие на диабет.

3. Сред преките потомци на пациенти с диабет тип 1, които имат генетично предразположение, положителни антителакъм GDC са открити в 8% от случаите, ACTC - в 5,4% от случаите. Тези деца имат нужда от диагностичен тесттитри на антитела, гликохемоглобин и изследване на инсулиновата секреция.

*1 итерация

1. Atkinson M.A., McLaren N.K. // N.Engl.J.Med.-l 994 -331. P.l 4281436.

2. Aanstoot H.J., Sigurdsson E., Jaffe M. et al // Diabetologia-1994-37.

3. Baekkeskov S., Aanstoot H.J., Christgan S. et al // Nature-1 990-377.

4. Bain S.C., Rowe B.R., Barnett A.H., Todd J.A. // Диабет-1994-43(12). С. 1432-1468.

5. B/ng/ey P.J., Christie M.R., Bonifacio E., Bonfanti R., Shattock Mw Fonte M.T., Bottazzo C.F. // Диабет-1 994-43. С. 1304-1310.

6. Boehn B.O., Manifras B., Seibler J. и др // Диабет-1991-40. P.1435-1439.

7. Chern M.M., Anderson V.E., Barbosa J. // Diabetes-1982-31. P.l 1 151118.

8. Дейвис Дж.Л., Кавагучи Ю., Бенет С.Т. и др. // Природа-1994-371.

9. Erlich H.A., Rotter J.I., Chang J. et al. // Nature Gen.-1993-3. P.358-364.

10. Hahl J., Simell T., Ilonen J., Knip M., Simmel O. // Diabetologia-1 99841. P.79-85.

11. Harrison L.C., Honeyman M.C., DeAizpurua H.J. et al // Lancet-1993341. P.l 365-1369.

12. Hashimoto L., Habita C., Beresse J.P. и др. // Природа-1994-371. С.161-164.

1 3. Karjalainen J., Martin J.M., Knip M. et al // N.Engl.J.Med.-l 992-327. P.302-303.

14. Khan N., Couper T.T., // Diabetes Care-1994-17. С. 653-656.

15. Landin-OIsson M., Palmer J.P., Lernmark A. et al // Diabetologia-1992-40. P.l068-1 073.

16. Leslie R.D.C., Atkinson M.A., Notkins A.L. // Диабетология-1999-42. С.3-14.

17. Levy-Marchal C., Dubois F., Neel M., Tichet J., Czernichow P. // Diabetes-1995-44. P.1029-1032.

1 8. Lorenzen T., Pociot F., Hougaard P., Nerup J. // Diabetologia-1994-37. P.321-321.

19. Lorenzen T„ Pociot F., Stilgren L. et al // Diabetologia-1998-41. P.666-673.

20. Непом Г., Ерлих Х.А. // Ann.Rev.Immunol.-1 991-9. P.493-525.

21. Nerup J., Mandrup-Poulsen T., Molvig J. // Diabetes Metab. Rev.-1987-3. P.779-802.

22. Owerbach D., Gabbay K.H. // Диабет-1995-44.p.l 32-136.

23. PociotF. U Dan.Med.Bull.-l996-43. С.216-248.

24. Rewers M., Bugawan T.L., Norris J.M., Blair A. et al. // Диабетология-1996-39. P.807-812.

25. Rei/onen H., Ilonen J., Knip N., Akerblom H. // Diabetes-1 991-40.

26. Saukkonen T., Virtanen S.M., Karppinen M. et al // Diabetologia-1998-41. С.72-78.

27. Schatz D., Krischer J., Horne G. et al. // J. Clin. инвест.-1994-93. P.2403-2407.

28. Spielman R.S., Baker L, Zmijewski C.M. //Ан. тананикам Генет.-1980-44. С. 135-150.

29. Thivolet C., Beaufrere B., Gebuhrer Y., Chatelain P., Orgiazzi J. // Diabetologia-1991-34. P.l86-191.

30. Tillil H., Kobberling J.// Диабет-1982-36. С.93-99.

31. ToddJ.A. U Proc. Natl. акад. Sci. САЩ-1990-377. P.8560-8565.

32. ToddJ.A., Farral M. // Hum.Mol.Gen.-5. P.1443-1448.

33. Tuomilehto J., Zimmet P., Mackay I.R. и др. // Lancet-1994-343.

34. Van der Anvera B., Van Waeyenberge C., Schuit F. et al. // Диабет-1995-44. P.527-530.

35. Walker A., ​​​​Goodworth A.G. // Диабет-1980-29. P.1036-1039.

36. Warram J., Krolewski A.S., Gottlieb M., Kahn C.R. // N.Engl.J.Med.-1984-311. С.149-151.

37. Ziegler A.G., Herskowitz R.D., Jackson R.A. et al // Diabetes Care-1990-13. P.762-775.

Реших да опиша моята история с екрани, в случай че е полезна за някого, като положителен пример

Първият път, когато B не направи никакви прожекции, тя просто не знаеше какво е това. Гинекологът направи ултразвук в 12 седмица, всичко беше наред и тя реши да не прави нищо повече. Мъдра жена!

Второто Б е много желано и дългоочаквано (за мен, но не по стандартите на планиране) (мина точно година). И сега ултразвукът е 11 седмици и 3 дни и първият звънец бие. Добре, но дебелината на яката (TN) е 2,9 мм. Узистката видя подутината и насочи вниманието си към нея. На следващия ден дарих кръв за биохимичен скрининг. Резултатите са гранични, препоръчителна е генетична консултация.

Срещата с първия генетик обаче не ме зарадва допълнителни тактикиТя го описа правилно, но не каза нищо конкретно за ситуацията или анализ. Оставих я в състояние на несигурност и тревога. Ако дадете числата, тогава всичко изглеждаше така: bHCG = 3,11 мама, PAPP-A = 1,32 майка, комбиниран риск от диабет, като се вземе предвид TVP 1:262 (о, боже, плаках заради тези числа!). Генетикът препоръча пункция на хорион/плацента. Или изчакайте втория скрининг и експертен ултразвук на 22 седмици. И тя също ме посъветва да се подложа на втори ултразвук преди 14 седмици; ако TVP се увеличи, тогава вече не си струва да чакате втория скрининг, но си струва да се подложите на инвазивна диагностика.

Тогава много се страхувах от нашествието, след като бях чувал много страшни истории от онези, които нямаха никаква представа какво е това. За това как „една приятелка на сестра на приятел й направи сестрата им” и как свърши... Ходих на ултразвук в 13 седмица и 3 дни, всичко беше наред, TVP беше 1,5 мм (т.е. отокът беше изчезнал), без CA маркери. Решихме да изчакаме 2-рата прожекция, като уж се успокоихме. Но в периферията мисълта все още сърбеше.. „Ами ако?“ Не купих нито един „бременен“ артикул, забраних си да гледам по посока на детските отдели, да се радвам на ритниците, да измислям име ...

17 седмици, биохимичен скрининг в Invitro, като се вземе предвид TVP на 12 седмици. И резултатът: риск от диабет 1:10. Плаках няколко дни, струваше ми се, че това е смъртна присъда, че детето определено има диабет. Беше много страшно. По съвет на приятел, преминал през всички тези изпитания, си записах час при генетик в Сеченовка. Веднага за ехограф, кръводаряване и консултация. На ултразвука бяхме доволни, че няма маркери за хромозомни аномалии и ще имаме момче, биохимични резултати (без TVP) 1:59. Препоръки от генетик: амнио- или кордоцентеза. Защото в такава ситуация, от една страна, ни е важно да знаем дали детето има диабет или не (за какво, това е десетото, но определено не бих понесла такава новина в родилния дом, би било по-добре предварително), а от друга страна, тя, колко генетика, страшно е да пропуснете диабет при такива тестове. Коментарът на лекаря: тя не вижда нищо „такова“ при нас, такова подуване се среща в 3% от случаите с диабет, в останалите 97 - само Господ Бог и майката природа знаят причината; Феталните хормони са нормални; много повишен hCG (4,12 MΩ) може да се дължи на ниска плацентация (вижда се на ултразвук). Така че нейната прогноза беше, че рискът от диабет е 5%, шансовете за здраво раждане са много по-високи. Но отидох за амнио (много четох и много мислих).

Насрочиха го за понеделник, а в неделя температурата ми се вдигна до 38, гласът ми изчезна - болки в гърлото. Отложено за петък. Лекувах се интензивно цяла седмица, в четвъртък нова настинка(остра респираторна вирусна инфекция ме удари някъде), гадни херпесни мехури се появиха на лицето ми, пак го отложиха за понеделник, а срокът за амнио вече наближаваше... Дойдох в болницата на ден Х, без изобщо да съм сигурна, че са. нямаше да ме изпрати вкъщи сега. И тогава е кордо, не спазваме крайния срок (екваторът вече е минал). Във всичките тези тревоги някак забравих да се страхувам от самата процедура.

Разпределиха ме в стая и ме оставиха да чакам обаждане. Хората бавно пристигаха. Един час по-късно, не издържах, седнах на леглото с въпроса „кога е вече?!“, а след това сестрата ме покани в стаята за процедури. В стаята за процедури беше много студено, халатът и чехли бяха оставени в „чакалнята“. Този ден бях първият. Тя легна на дивана, нави нощницата на гърдите си и лекуваше стомаха си. Лекарят забеляза херпес и започна смут. И сега лежа там, готов, и разбирам, че сега, вместо процедурата, ще се прибера вкъщи... Но в крайна сметка узистът внимателно прегледа мехурчетата и „реши“, че това вече е не-остра фаза на оздравяване. Щом издишах, че ще го направят, сензорът веднага ми беше поставен на корема и тръгнахме. Избрахме място, монтирахме щипка за иглата на сензора и самата игла. Сестрата ме помоли да се отпусна колкото е възможно повече и притисна раменете ми към дивана. Пункция. Изобщо не ми се струваше болезнено, веднъж си правих пиърсинг на пъпа, много повече ме впечатли. Няколко минути и това е. Опитвах се да не напрягам корема си, но от прохладата неволно исках да се свия. Някак си тя изпълзя от дивана, като държеше марлята на мястото на убождането и ми помогна да облека халат. Пропълзях в отделението, където ми инжектираха noshpa и HyperRow (аз съм Rh отрицателен). Най-много ме болеше инжекцията от ношпата, на всеки половин час ме питаше как се чувствам. Тези, които имаха оплаквания (макар че симптомите бяха по-скоро от пренапрежение), бяха оставени до вечерта. След 3 часа бях вкъщи.

Първата седмица след процедурата имах чувството, че ми тече вода. Ужасно се страхувах от инфекция - усложнения от нелекувана настинка. След това някак си се отпусна и беше забравен. Седмица по-късно отидохме на експертен ехограф, който показа липса на видими патологии. Чакането стана по-лесно. Седмица по-късно се обадих, за да разбера резултатите. Лекарят поиска да се обади след 10 минути, като провери от списанието. През тези 10 минути непрекъснато гледах часовника, а главата ми биеше: „Ами ако... Ами ако?.. Ами ако?!“. И ето гласът на лекаря: всичко е наред, момче. Бърморя подготвени благодарствени думи, но все не разбирам, не осъзнавам... и след думите на лекаря: „Честито, слънце, ще имате здраво дете!" Бях завладяна от сълзи, градушка, ОСЪЗНАНИЕ, целият стрес от изминалите седмици... Изревах и се обадих на мъжа си: „СЛАВКА Е ЗДРАВА!"

Вечерта съпругът ми донесе букет бели рози и шампанско!

Предстоят ни още много тревоги и тревоги, но най-важните вече са зад гърба ни, остават в старата година.

Пожелавам на никой да не се сблъсква с това, но ако трябва, не се притеснявайте, момичета, всичко ще бъде наред! проверих