Анализ кала методом пцр на хеликобактер пилори. Кал на Хеликобактер Пилори: кому рекомендуется анализ и как к нему подготовиться. Как сделать анализ кала на хеликобактер

Нарушение работы желудочно-кишечного тракта — одна из наиболее распространенных проблем со здоровьем современного человека. Тошнота, тупая или острая боль в животе, чувство тяжести в желудке после приема пищи, отрыжка свидетельствуют о появлении в организме опасного и коварного врага — бактерии Хеликобактер пилори (Helicobacter pylori). Игнорирование симптомов и откладывание посещения врача могут привести к другим, более грозным заболеваниям — гастриту, язве желудка и двенадцатиперстной кишки, раку и некоторым видам лимфом. Поэтому при первых же проблемах с пищеварительной системой следует сдать анализы крови и , выявить вредителя и обезвредить, проведя соответствующее лечение.

В отличие от многих других бактерий хеликобактер прекрасно чувствует себя в кислой среде, что делает желудок его любимым местом пребывания и размножения. Подвижные жгутики и спиралевидная форма позволяют микроорганизмам передвигаться в густой среде (слизистой внутренних органов). При неблагоприятных условиях хеликобактер принимает круглую форму, напоминающую споры, и может затаиться на долгое время в организме.

Впервые обнаруженная более века назад только в 1994 году вредоносная бактерия была официально признана одной из главных причин рецидивирующих гастритов и язв желудка. Ученые Робин Уорелл и Барри Маршал не один год посвятили изучению хеликобактер пилори и способам ее обезвреживания, за что были удостоены Нобелевской премии по медицине в 2005 году.

Показания к проведению обследования

Несмотря на то что хеликобактер пилори — одна из самых распространенных инфекций человека (по некоторым данным носителями бактерии являются более 70 % земного населения старше 40 лет), ее наличие в организме не всегда приводит к патологическим нарушениям. У большинства инфицированных не наблюдается никаких симптомов. Причины же, указывающие на необходимость консультации гастроэнтеролога, следующие:

• неприятие белковой (мясной) пищи;
• ощущение тяжести в желудке;
• рвота;
• тошнота, изжога, частая отрыжка;
• боли в области желудка (особенно стихающие после приема пищи) и других отделах живота;
• метеоризм;
• нарушение аппетита;
• дисфагия (затрудненное глотание);
• потеря веса;
• запоры, поносы;
• появление в рвотных или каловых массах крови.

Необходимо сдать бак анализ также в случае:

• наличия в анамнезе таких заболеваний, как язва желудка и двенадцатиперстной кишки, диспепсия и атрофический гастрит;
• обнаружения рака желудка у кровного родственника;
• первичного выявления хеликобактер пилори у одного из совместно проживающих членов семьи.

Чаще всего заражение происходит внутри семьи и тесно общающихся групп (школах, детских садах) бытовым путем через слизь и слюну. Скученность, нарушение правил гигиены, использование общей посуды увеличивают риск заражения. В случае же бессимптомного носительства толчком к развитию заболеваний могут стать такие негативные факторы, как курение, неправильное питание, злоупотребление алкоголем, стрессы.

Методы диагностики

На сегодняшний день медицина предлагает несколько методов исследования организма на наличие бактерий хеликобактер пилори без традиционного бак посева. Наиболее эффективно зарекомендовали себя следующие виды диагностики:

Анализ крови на наличие антител к инфекции

В организме человека антиген хеликобактер вызывает ответную реакцию иммунной системы в виде выработки антител (иммуноглобулинов). Анализ крови предусматривает определение титра этих антител.

Исследование кала на антиген хеликобактер

Одним из самых удобных и безболезненных методов диагностики является анализ кала на антиген с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР). Подходит детям, людям пожилого возраста и тяжелобольным. Данный бак анализ характеризуется высокой точностью (до 95%) даже при условии изменения активных форм бактерий и снижения их концентрации в кале.

Уреазный дыхательный тест или хелик тест

Данная диагностика основана на способности микроорганизмов вырабатывать особый фермент — уреазу, защищающую бактерии от агрессивного воздействия кислой среды желудка. Уреаза расщепляет мочевину в желудочно-кишечном тракте, в результате чего образуются аммиак и углекислый газ, выделяемый при дыхании. Наличие этих веществ и определяется с помощью хелик теста. Данный вид исследования является максимально безопасным, поэтому рекомендован маленьким детям и беременным женщинам.

Экспресс-тест на уреазную активность хеликобактер при гастроскопии (ФГДС)

С помощью специального зонда при гастроскопии (зрительном исследовании) проводится забор микроскопических частей слизистой желудка, которые впоследствии помещаются в специальную тестовую среду. Если слизистая заселена хеликобактер пилори, то выделяемая ими уреаза будет расщеплять мочевину, входящую в состав тестовой среды.

Биопсия и цитологическое исследование

Метод клеточного исследования с максимальной точностью позволяет определить наличие в организме инфекции, практически исключая ложноположительный результат. Биопсию слизистой берут из наиболее подозрительных участков, не тревожа эрозии и язвы.

Для достоверного подтверждения наличия или отсутствия хеликобактериоза врач назначает как минимум два вида анализов, из которых наиболее эффективен бактериологический анализ кала, позволяющий обнаружить ДНК микроорганизмов в образце (метод ПЦР).

Правила сбора материала

Помимо информированности об исследованиях важно знать, как сдавать бак анализ правильно, чтобы получить максимально точный диагноз. Существуют особые правила сбора материала для каждого вида диагностики:

1. Для проведения анализа на антитела берут кровь из вены. Сдавать кровь лучше всего в утренние часы натощак. Накануне следует ограничить употребление жирной и острой пищи.
2. Забор кала для исследования можно проводить как минимум через месяц после приема каких-либо антибиотиков. За трое суток до анализа следует исключить из рациона красящие продукты, грубую клетчатку, медикаментозные препараты, усиливающие перистальтику кишечника. Собранный кал помещается в стерильную емкость и как можно быстрее доставляется на исследование. На результат также могут повлиять присутствие в биологическом образце желчи, крови, неорганических солей, поэтому в случае некоторых заболеваний кишечника лучше выбрать другую диагностику хеликобактериоза.
3. Дыхательный тест имеет несколько вариантов проведения, но все они включают в себя процесс дыхания через трубку. Берутся несколько проб воздуха — первая на голодный желудок, а последующие после употребления специального тестового раствора. Накануне сдачи теста следует ограничить употребление жидкости и пищи, за сутки исключить продукты, повышающие газообразование в ЖКТ, за трое суток ввести запрет на алкоголь. Необходимо исключить факторы, повышающие слюноотделение (курение, жевание жевательной резинки). Если пациент принимает какие-либо медикаменты, следует уведомить об этом врача и лаборанта.
4. Перед проведением гастроскопии необходимо пройти клиническое обследование: сдать общие анализы крови и мочи, определить группу крови и резус-фактор, свертываемость крови, провести диагностику на антиген гепатита С и В. Пожилым пациентам рекомендовано проведение ЭКГ и измерение артериального давления. Забор биопсии проводится натощак. Может применяться местная анестезия.

Более подробно о том, как подготовиться и правильно сдавать анализ кала, читайте в .

После проведения исследований необходимо показать результаты врачу-гастроэнтерологу, который верно их расшифрует, поставит правильный диагноз, успокоит пациента, а в случае обнаружения хеликобактер пилори назначит грамотное лечение. Враг коварен, но не так страшен, как кажется, если его вовремя обнаружить и обезвредить. Будьте здоровы!

Положительный результат анализа кала на хеликобактер служит достоверным доказательством заражения человека. Исследование относится к прямым видам, когда выявляется конкретный возбудитель или его ДНК, а не последствия его воздействия или продукты распада (как при проведении иммунологических анализов крови).

Кроме того, достоинством способа является его неинвазивность - отсутствие необходимости применять для забора материала более или менее травматичные процедуры (прокола вены для взятия крови, введения дуоденального зонда).

Проведение анализа кала не связано с присутствием пациента, достаточно своевременной доставки в лабораторию испражнений. Это особенно важно для обследования детей.

Существуют разные методики выявления Helicobacter pylori, каждая обладает своими достоинствами и недостатками.

Лечащий врач определяет необходимость и выбор способа исследования. Немалое значение имеет доступность анализа для конкретного пациента из-за цены. Большая часть выполняется только в частных клиниках и лабораториях, поскольку требует дорогостоящего оборудования.

Цель исследования - выявление причинной связи заболевания с хеликобактер и назначение целевого курса лечения для избавления от возбудителя.

Что представляет собой хеликобактерия?

Название Helicobacter pylori переводится как «спиралевидная привратниковая». Оно привязано к характерной форме бактерии, локализации в области привратника (приграничная зона желудка с двенадцатиперстной кишкой). Микроорганизм имеет жгутики, помогающие ему перемещаться даже в густой слизи.

Хеликобактерия способна выдерживать кислую среду желудочного сока. Для жизнеобеспечения использует энергию молекул водорода, которую вырабатывают кишечные бактерии.

Бактерия синтезирует около 20 ферментов

Наиболее известные ферменты хеликобактер:

• оксидаза,
• уреаза,
• каталаза.

К особенностям микроорганизма относятся:

• сложность выделения культуральным способом, поскольку хеликобактерия не растет на обычных питательных средах;
• длительный период отсутствия симптоматики, указывающей на заражение;
• возможность в «опасной» ситуации трансформироваться в шаровидную форму и покрываться защитной пленкой.

Агрессивность бактерии является основной причиной атрофической формы хронического гастрита с дальнейшим переходом в язвенную болезнь и раковую опухоль.

В кале спиралевидную форму обнаружить невозможно, поскольку кишечная среда неблагоприятна для существования хеликобактерии. Здесь не имеется нужной кислотности, мало кислорода, действуют сильные разрушающие ферменты желчи, поджелудочной железы. Поэтому в каловых массах находится кокковая форма бактерии.

Симптомы поражения желудка, вызванные хеликобактерией, могут быть минимальными или соответствовать клинике обострения заболевания. У пациента наблюдаются:

• вздутие живота;
• отрыжка;
• изжога;
• болевой синдром, особенно при обострениях весной и осенью;
• запоры или поносы;
• чувство тяжести в эпигастрии;
• снижение аппетита;
• резкое падение веса.

Показаниями к исследованию могут быть:

• необходимость проверки перед длительным курсом терапии нестероидными противовоспалительными лекарствами, ингибиторами протонной помпы, поскольку они снижают выработку соляной кислоты в желудке;
• признаки железодефицитной анемии;
• неясная тромбоцитопения;
• возможность заражения членов семьи;
• контроль проведенного курса антибиотикотерапии;
• выяснение связи с генетической предрасположенностью.

У ребенка о признаках заражения говорят жалобы на тошноту, неясные боли в животе, плохой аппетит и отказ от еды, частое обильное срыгивание, а также вздутие и урчание живота.

Способ бактериологического посева

Выделение культуры возбудителя - микробиологический вид исследования. Классика способа требует посева материала на питательную среду, подсчета выросших колоний, исследования микроорганизма из колонии под микроскопом. Также необходимо проведения биохимических проб для изучения его свойств и дополнительного посева на среду с антибиотиками для выявления чувствительности к разным препаратам.

Среда для посева довольно дорогая, готовится специально

Анализ кала на хеликобактер пилори с помощью культурального способа провести сложно:

• посев должен проходить без доступа кислорода;
• можно выделить только спиралевидные формы, которые редко попадают в кал, а не кокковые;
• результаты реакции на чувствительность к антибиотикам in vitro (инвитро означает «на стекле, в пробирке») на практике оказываются обманчивыми и в некоторых случаях не совпадают с фактическим применением у пациента (in vivo), обнаруженный оптимальный антибиотик оказывается недостаточно эффективным;
• анализ требует длительного срока (7–10 дней) для полного проведения.

По этим причинам использование метода для диагностики ограничено.

Иммунологические способы исследования

Суть иммунологического анализа - выявление комплексов антитело+антиген, в котором чужеродным агентом является хеликобактерия. Более привычно использование по исследованию крови. Но фактически косвенные признаки наличия антигена можно подтвердить по наличию в стуле, слюне, моче, у беременных в околоплодной жидкости.

В методиках используются готовые «помеченные» антитела. При обработке ими кала пациента, содержащего антигены (остатки хеликобактерии) возникает реакция соединения со стандартными антителами. Длительность исследования - сутки. Анализ кала на антиген хеликобактер назначается, если у пациента имеются любые симптомы нарушения пищеварения.

Наиболее распространенный вариант - первичный скрининг населения (обследование всех обратившихся или определенных групп), не имеющего специфических жалоб. В России не применяется из-за отсутствия достаточного количества иммунологических тестов в лабораториях поликлиник.

Метод ПЦР

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) относится к молекулярно-генетической диагностике. С ее помощью выявляется не бактерия, а ее специфическая ДНК. Даже при малом количестве, в случае выздоровления или бессимптомного носительства метод позволяет с достаточной точностью связать изменения в организме с действием хеликобактер.

Длительность анализа экспресс-методом 5–6 часов, обычным - 2–3 суток

Методика рассчитана на искусственный синтез отдельных частей ДНК, удвоение и построение цепочки из 30 циклов. Процесс не происходит в случае отсутствия малейших остатков биоматериала. Для реакции необходим прибор ампликатор. Полимераза - фермент, ускоряющий процесс.

ПЦР кала назначают для подтверждения роли хеликобактерии в патологии и определения целесообразности специфической терапии:

• при эрозиях и язвах в желудке, пищеводе и двенадцатиперстной кишке;
• желудочно-пищеводном рефлюксе (заброс содержимого в обратном направлении);
• атрофическом поражении слизистой желудка;
• полипах;
• опухолях желудка;
• выявлении наследственной предрасположенности в случае наличия у родственников злокачественных опухолей органов пищеварения;
• контроле за результатами терапии антибиотиками.

• высокую чувствительность и специфичность (соответственно определяются в 94% и 100%), реакция бывает положительной даже при наличии 10 бактерий;
• простоту проведения;
• безопасность для пациента, отсутствие травматичности при заборе материала;
• возможность определения ДНК как в спиралевидных, так и в кокковых формах хеликобактерии;
• выделение и изучение различных генетических модификаций, штаммов.

Результат редко выдает ложноположительную информацию при отсутствии инфицированности человека.

Недостатки исследования:

• не представляется возможность определения оптимального антибиотика по чувствительности;
• нет различий между протекающим острым заболеванием и остаточными явлениями после обострения, ДНК бактерий остаются в кале почти месяц после клинического выздоровления;
• чувствительность все-таки ниже, чем при исследовании биоптата из стенки желудка;
• сравнительно высокая стоимость;
• необходимость подготовки персонала и приобретения оборудования;
• положительная реакция в случаях загрязнения персоналом материала из чужого образца (контаминация извне).

ПЦР-лаборатория имеет усовершенствованную технику, позволяющую получить достоверные результаты диагностики

Как оценить результаты анализов?

Расшифровка результатов исследования - дело врача специалиста. Не стоит прибегать к самостоятельной трактовке или пользоваться услугами знакомых. Оценка проводится по комплексу признаков. При ПЦР выдается результат:

• отрицательный, если не выделился генотип хеликобактерии, обнаруживается в норме;
• положительный, если у пациента разгар заболевания или заражение было в анамнезе.

При бактериологическом исследовании:

• выявлено нулевое количество бактерий или хеликобактер отсутствует;
• если количество микроорганизмов больше нуля - подтверждается хелибактериоз;
• знак S означает чувствительность к заявленному антибиотику;
• R - указывает на устойчивость (резистентность) к препарату;
• I - чувствительность умеренная.

Бакпосев кала позволяет дать не только качественную, но и количественную характеристику хеликобактериального заражения. Для этого учитываются степени роста бактерии:

• 1 степень - наблюдается слабый рост на жидкой среде, на твердых образцах - роста нет;
• 2 степень - вырастает до 10 колоний;
• 3 степень - число выросших колоний достигает 100;
• 4 степень - распространенность и активность возбудителя очень активны, вырастает более 100 колоний.

Последние две степени считаются наиболее достоверными источниками информации об участии хеликобактер в патологических изменениях желудка.

Тестирование проводят методом иммуноферментного анализа со стандартными сыворотками

Иммунологические тесты показывают отрицательный результат, если антиген возбудителя не определяется, положительный - при наличии хеликобактериоза. Достоверность иммунологического и культурального методов значительно уступает ПЦР, для их проведения необходима массивная распространенность возбудителя в фекалиях.

Как подготовиться к сдаче анализа?

Где можно сдать анализ, укажет врач. Он же должен ознакомить пациента с правилами забора материала и подготовки. Некоторые частные клиники выдают посетителям напечатанную инструкцию «Как сдавать анализы». От соблюдения указанных условий зависит результативность исследования.

Общими правилами забора фекалий на выявления хеликобактер являются:

• прекращение приема антибактериальных средств за трое суток до анализа;
• контрольную сдачу анализа кала проводят через месяц после окончания курса лечения;
• некоторые анализы требуют за три дня до исследования перейти на диету без продуктов с пищевой клетчаткой, исключить соленья, алкогольные напитки;
• запрет на использование слабительных препаратов, ректальных свечей, если лечение требует ежедневного приема, нужно предупредить врача;
• собирать кал нужно в чистую лабораторную посуду (выдается в клинике или покупается в аптеке), желательно отбор проб производить из трех точек;
• непригодным считается кал с примесями слизи, гноя, крови, мочи;
• доставка материала в лабораторию должна быть обеспечена в первые 2 часа, при необходимости разрешается хранить в холодильнике не более суток при температуре от 2 до 8 градусов.

Специальный набор для забора кала на анализ можно приобрести в аптеке

Дополнительные исследования

Пациент при диагностике не должен настаивать на изолированном исследовании кала. Используя дополнительные виды, врач повышает достоверность информации о заражении хеликобактерией.

Большой популярностью пользуются уреазные дыхательные тесты.

Проведение иммунологических исследований сыворотки крови может быть порекомендовано в случае необходимости дифференциальной диагностики формы поражения.

Неопровержимым видом обследования является цитологическое исследование образца слизистой желудка, полученного при биопсии во время фиброгастроскопического исследования. При высокой разрешающей возможности микроскопа лаборант видит окрашенную хеликобактерию.

Фиброгастроскопическая картина самой слизистой с характерными эрозиями, атрофией, изъязвлением указывает на косвенные признаки присутствия возбудителя в желудке. Рентгенологическая диагностика также позволяет по нарушениям в направлении складок, контуров желудка судить об органической патологии, вызванной хеликобактерией.

По итогам анализов врач может ввести пациента в группу риска с повышенной вероятностью заболевания язвой желудка, злокачественными опухолями. Предварительное применение специфического лечения позволяет снизить степень риска. При выборе медицинского учреждения для выполнения исследований на платных условиях нужно посоветоваться по поводу репутации и ответственности его сотрудников.

Хеликобактер пилори

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) позволяет увеличить число копий ДНК бактерий или вирусов в миллионы раз с использованием фермента ДНК-полимеразы. Для диагностики достаточно одной молекулы ДНК. Синтезированное количество ДНК идентифицируют методами иммуноферментного анализа или электрофореза. ПЦР-диагностика позволяет обнаружить возбудителя на самых ранних этапах инфекционного процесса, в любой биологической среде организма, с возможностью количественного определения вирусов или бактерий.

Хеликобактер пилори – спиральные грам-отрицательные бактерии, которые были обнаружены на слизистой оболочке желудка более полувека назад, но они не вызывали особого интереса до начала 1980-х гг., когда был разработан метод культивирования организмов из биопсийного материала слизистой оболочки.

В 1983 г. австралийский врач Барри Маршалл обнаружил, что H. pylori почти всегда присутствует в желудке пациентов, страдающих хроническим гастритом или язвой. Бактерии, сами по себе, язвы желудка или двенадцатиперстной кишки не вызывают, однако, провоцируют воспалительные процессы в желудке и ослабляют естественную защиту слизистой от воздействия кислотной среды желудка; при этом H. pylori стимулирует гиперсекрецию соляной кислоты, воздействуя на механизмы ее регуляции. Если проводимая терапия приводит к снижению кислотности желудка, то язва может затянуться, но после прекращения лечения существует вероятность ее повторного возникновения. Длительные наблюдения показали, что у больных, не получавших лечение против H. pylori, язва рецидивирует через 2 года в 100 %, а у пролеченных пациентов возникает повторно (обычно вследствие реинфекции H. pylori) только в 5-10 %. Источником заражения H. pylori является инфицированный человек, кошки, свиньи, крупный рогатый скот и обезьяны (макака-резус). Чаще заражение происходит через загрязнённую фекалиями воду и пищу (овощи, при поливе которых использовалась загрязненная вода). Объектом передачи инфекционного начала могут быть загрязнённые руки, слюна, капли слюны или мокроты при кашле. Исследования, проведенные медиками из США, показали, что H.pylori можно считать семейной инфекцией, и, если в семье выявлен носитель H.pylori, то вероятность остальных членов семьи оказаться инфицированными составляет 95%. Обнаружение хеликобактера методом ПЦР позволяет значительно быстрее установить диагноз, проводить контроль лечения. Материалом для исследования могут служить желудочные аспираты, кал, слюна.

Обращаем Ваше внимание, что взятие урогенитального мазка, мазка из зева, носа, полости рта - платное.

Частые недомогания со стороны пищеварительного тракта, такие как изжога, отрыжка, тяжесть в животе после еды или тошнота, могут свидетельствовать о присутствии в организме Хеликобактер Пилори (Helicobacter pylori). Жизнедеятельность болезнетворного агента в желудке и двенадцатиперстной кишке вызывает серьезные заболевания, которые требуют длительного и дорогостоящего лечения.

Для того, чтобы избежать нежелательных последствий, необходимо своевременно выявлять и обезвреживать опасного врага. В медицинских учреждениях можно сделать анализ кала на Хеликобактер Пилори и таким образом удостовериться в наличии или отсутствии инфекции.

Что представляет собой хеликобактерия

Микробы не могут жить и размножаться в кислой среде желудка, так как их тела не защищены от действия соляной кислоты. Хеликобактер Пилори является исключением из правил. Для жизнедеятельности бактерии нужна именно кислая среда, поэтому она не живет в кишечнике, как большинство видов грамотрицательных патогенов. Более того, в кишечном тракте мало кислорода, много разрушающих ферментов поджелудочной железы и желчи, что неблагоприятно сказывается на жизнеспособности микроорганизма.

Бактерия выделяет особый фермент — уреазу. Наличие этого фермента в желудке, а соответственно и хеликобактерию, можно быстро выявить с помощью уреазного теста. Он выполняется в момент проведения гастроскопии и позволяет получить достоверный результат в течение нескольких минут. Кал на Хеликобактер Пилори изучается более длительное время, но такой анализ имеет свои преимущества.

Коварство патогена заключается в том, что он незаметно разрушает органы изнутри. После заражения организма отсутствует какая-либо симптоматика, указывающая на инфекцию. Все негативные явления возникают лишь тогда, когда в желудке или двенадцатиперстной кишке развиваются болезни — гастрит, дуоденит, язва.

Другой неприятной особенностью микроорганизма является его способность трансформироваться в кокковую (шарообразную) форму, напоминающую споры. Это происходит в том случае, если патоген попадает в неблагоприятную среду, например, в момент терапии антибиотиками. В таком состоянии бактерия становится менее уязвимой и способна надолго затаиться в организме.

Хеликобактер Пилори считается одной из самых распространенных инфекций у людей. Чаще всего ее диагностируют у пациентов старше сорока лет. Люди могут быть носителями бактерии и даже не догадываться об этом из-за отсутствия симптомов. Не всегда носительство представляет серьезную угрозу для здоровья, однако при любом гастроэнтерологическом заболевании делаются анализы кала или крови на выявление Хеликобактер Пилори.

Медицинское обследование стоит пройти при наличии следующей симптоматики:

• частой изжоги, отрыжки;
• регулярных нарушений стула (диареи или запоров);
• тошноты, ощущения тяжести после еды;
• отвращения к белковой пище (мясу, птице);
• повышенного газообразования;
• болей в проекции желудка;
• устойчивого снижения веса;
• дисфагии (затруднений при глотании).

Так как патоген передается через слизь или слюну, то инфекция быстро распространяется внутри семьи через пользование общей посудой и предметами личной гигиены. Если у одного члена семьи выявлена хеликобактерия, то остальным близким родственникам тоже рекомендуется пройти соответствующее обследование.

Как подготовиться к сдаче анализа

Прежде чем сдать кал на Хеликобактер Пилори, необходимо ознакомиться с правилами подготовки к анализу и сбора материала. Это могут быть устные указания от врача, либо напечатанные инструкции, которые обычно выдают частные клиники.

• за месяц до исследования следует исключить прием антибиотиков, а за трое суток — слабительных средств;
• в течение трех дней до анализа нельзя употреблять грубую клетчатку и красящие продукты;
• собирать кал нужно в специальную емкость (можно взять в клинике или купить в аптеке);
• следует брать материал из трех точек, где нет крови, слизи, гноя или мочи;
• необходимо доставить кал в лабораторию в течение двух часов после дефекации;
• повторный анализ на эффективность лечения нужно сдавать через месяц после приема антибактериальных препаратов.

Анализ кала на Хеликобактер Пилори: обзор методик и оценка результатов

Существуют разнообразные способы выявления патогена. Они отличаются по исследуемому материалу, методу лабораторного исследования, точности, информативности. Немаловажное значение так же имеет ценовой фактор, ведь не каждый человек может заплатить за анализ требуемую сумму. Некоторые методики применяются только в дорогостоящих клиниках, но это не значит, что пациенты с низким доходом не смогут получить необходимую медицинскую помощь в данном вопросе.

Наименее затратным, и в то же время достаточно информативным является анализ кала на Хеликобактер Пилори. Больному не нужно лично приходить в лабораторию, необходимо лишь своевременно доставить туда материал для исследования. Этот пункт особенно важен для родителей маленьких детей, так как малыши часто беспокоятся при посещении незнакомых учреждений.

Еще одним достоинством этого анализа является простота и безболезненность процедуры сбора материала. После испражнения нужно просто положить кал в чистую емкость и отнести в клинику. В других исследованиях пациенту могут прокалывать вену или вводить в пищеварительный тракт дуодендальный зонд.

Различают три метода анализа кала на Хеликобактер Пилори:

• бактериологический посев;
• иммунологическое исследование;
• полимеразная цепная реакция (ПЦР).

Способ бактериологического посева

Классический способ выявления патогенных микроорганизмов — посев на питательной среде. Анализ кала на Хеликобактер Пилори этим методом считается наиболее сложным по ряду причин:

• при посеве необходимо исключить доступ кислорода к питательной среде;
• в кале редко присутствуют активные спиралевидные бактерии, а кокковые формы не распознаются;
• реакция на чувствительность к антибиотическому веществу может быть неточной;
• анализ делается не менее недели.

В данном случае бактериологический посев считается наименее точным методом исследования.

Иммунологическое исследование

Этот вид анализа кала на хеликобактер хилари основан на взаимодействии готовых (помеченных специальными метками) антител с антигеном (биоматериалом). При наличии положительной реакции (комплекс антиген-антитело) специалист может диагностировать инфекцию. Метод подходит для обнаружения любой формы бактерии. Результаты исследования сообщаются пациенту уже на следующий день.

Такой анализ назначают на первичном этапе обследования, до проведения инструментальной диагностики. Он не является затратным и прост в выполнении.

Полимеразная цепная реакция

Молекулярно-генетическая диагностика считается самой точной и информативной методикой выявления хеликобактерии. С помощью полимеразной цепной реакции обнаруживается специфическая ДНК патогена, поэтому даже при минимальном содержании в каловых массах бактерий, в том числе кокковых форм, можно легко выявить инфекцию.

Анализ кала на Хеликобактер Пилори методом ПЦР обычно назначают пациентам, которые имеют подтвержденные патологии в желудке или двенадцатиперстной кишке, в частности:

• полипы;
• опухоли;
• рефлюкс;
• атрофию слизистых.

С помощью ПЦР можно узнать роль микроба в развитии этих болезней и правильно составить схему лечения.

Методика отличается высокой точностью — от 94 до 100%. Положительная реакция наблюдается даже при наличии всего десяти микроорганизмов. Специалисты могут выявлять и изучать различные модификации и штаммы патогена. Исследование является простым в исполнении и безопасным для пациента.

К недостаткам можно отнести относительно высокую стоимость анализа и отсутствие возможности установить чувствительность бактерии к антибиотикам.

Расшифровка анализов

При иммунологическом тесте и ПЦР могут быть лишь два результата:

• отрицательный — патоген не обнаружен;
• положительный — хелибактериоз.

В результатах бактериологического анализа, помимо перечисленных двух пунктов, добавляются сведения о чувствительности к антибиотикам, а именно:

• S — высокая;
• I — умеренная;
• R — резистентность.

Бактерия Helicobacter pylori (хеликобактер пилори) обитает в клетках слизистой оболочки желудка и двенадцатипёрстной кишки человека. Некоторые штаммы (генетические типы) микроорганизма выделяют специфические токсины, разрушающие клетки и повышающие риск возникновения таких патологий, как хронические гастриты и дуодениты, язвенная болезнь желудка и двенадцатипёрстной кишки, некоторые виды злокачественных опухолейа. Такие штаммы необходимо своевременно выявлять и лечить. Одним из способов определения инфицирования Helicobacter pylori является анализ кала.

Механизм определения хеликобактера с помощью анализа кала

ПЦР (полимеразная цепная реакция), культуральный и иммунологические анализы кала относятся к прямым методам исследования. В отличие от косвенных методов, когда о наличии патологического агента судят по присутствию продуктов его жизнедеятельности или реакции иммунной системы организма (выработка антител), прямые методы обнаруживают непосредственно сам микроорганизм или его ДНК.
Все виды анализа кала на хеликобактериоз являются неинвазивными (нетравматичными) видами исследования в отличие от забора крови или гастродуоденоскопии.

Молекулярная диагностика

ПЦР-метод является одним из видов молекулярно-генетической диагностики и позволяет определить наличие Helicobacter pylori даже в случае присутствия в материале небольшого фрагмента ДНК бактерии.

Суть метода состоит в многократном умножении анализируемого образца возбудителя заболевания. Для проведения реакции необходим своего рода «каркас», состоящий из двух праймеров – полученных с помощью искусственного синтеза фрагментов ДНК, идентичных нуклеиновой кислоте Helicobacter pylori. Во время реакции между праймерами наращивается цепочка ДНК в случае присутствия в кале фрагмента биоматериала микроорганизма. В случае его отсутствия реакции не происходит.

Реакция проводится при определённых значениях температуры и кислотности среды, состоит из нескольких десятков повторяющихся циклов, для катализа (ускорения реакции) применяется специальный фермент – полимераза. За 30 циклов фрагмент ДНК патологического агента, присутствующий в биоматериале, умножается в миллиард раз, что позволяет с точностью диагностировать инфекцию.

При наличии соответствующих праймеров можно выявить инфицирование цитотоксичными (повреждающими клетки слизистой желудка) видами Helicobacter pylori.

Культуральный анализ

Культуральный анализ (бактериологический посев) является микробиологическим методом исследования.

Биологический материал помещается в специфическую среду, благоприятную для роста бактериальной колонии. По истечении определённого срока (для Helicobacter pylori – более недели) культуру изучают под микроскопом, используя для верной идентификации колонии различные методы – окраску, способность вступать в те или иные биохимические реакции.

Кроме выявления патологического антигена (возбудителя заболевания) метод позволяет провести тест на его чувствительность к антибактериальным препаратам, что сокращает сроки и затраты на лечение, повышает эффективность терапии.

К сожалению, в некоторых случаях результаты теста на чувствительность in vitro («в пробирке») могут не совпадать с результатами лечения in vivo (живого организма): в жизни антибиотики, подобранные лабораторным методом, могут быть не столь эффективны.

Иммунологические методы анализа

Иммунологические методы основаны на свойстве антител слипаться с антигеном. Для исследования антитела со специальными метками соединяются с анализируемым образцом, в результате, при наличии в материале Helicobacter pylori, образуются комплексы антиген-антитело.

Показания к проведению обследования

Все виды диагностики инфицирования Helicobacter pylori имеют свои преимущества и недостатки. Целесообразность применения того или иного метода зависит от разных факторов и этапов лечения. Оптимальный способ исследования выбирает врач-гастроэнтэролог .

Показания к ПЦР-анализу кала:

• язвы, и двенадцатипёрстной кишки;
• атрофия слизистой оболочки желудка;
• полипы, опухоли желудка;
• гастроэзофагеальный рефлюкс (заброс содержимого желудка в пищевод), язва пищевода;
• генетическая предрасположенность: злокачественные опухоли желудка у ближайших родственников (родителей, родных братьев и сестёр);

Исследование ПЦР-методом оптимально назначать для оценки целесообразности проведения специфического лечения антибактериальными препаратами при имеющихся органических повреждениях.

Показание к культуральному анализу – определение чувствительности к лекарственным препаратам при неэффективности эмпирического лечения. Поскольку анализ является сложным (посев требует специальной среды и отсутствия доступа кислорода) и долгосрочным, это исследование не назначается для диагностики инфекции.

Бактериологический посев способен выделять только спиралевидные формы Helicobacter pylori, но не кокковые, получившие в последнее время широкую распространённость. Этот факт дополнительно снижает ценность исследования.

Показания к иммунологическим методам:

• симптомы функциональных и органических патологий желудка и кишечника:
  • , отрыжка;
  • боли, имеющие периодичность в течение суток с обострениями весной и осенью;
  • поносы или запоры;
  • ощущение дискомфорта, переполнения желудка;
• перед назначением длительной терапии нестероидными противовоспалительными препаратами или ингибиторами протонной помпы (средствами для снижения выработки соляной кислоты);
• железодефицитная анемия или тромбоцитопения невыясненной этиологии;
• генетическая предрасположенность;
• инфицирование ближайшего окружения;
• контроль эффективности антибиотикотерапии.

Иммунологические методы и ПЦР без генотипирования назначаются с целью скрининга – ввиду простоты и относительно низкой стоимости исследование проводится широким массам населения для выявления группы риска развития органических и опухолевых поражений желудка и кишечника.

К сожалению, в России скрининг на Helicobacter pylori не получил широкого распространения.

Иммунологический анализ проводится до инструментальных методов исследования при соответствующей симптоматике и позволяет предположить инфицированность Helicobacter pylori. По результатам анализа в случае необходимости назначаются другие методы исследования.

Преимущества и недостатки ПЦР-анализа кала

Специфическая терапия хеликобактериоза антибактериальными препаратами – процесс длительный, сопровождающийся плохой переносимостью у многих больных и высоким риском развития осложнений.

Назначение антибиотиков всем лицам, инфицированным Helicobacter pylori, - порочная практика. Специфическая антибиотикотерапия показана лишь пациентам с тенденцией к прогрессированию органических поражений – эрозий, язв, атрофического процесса, - как правило, заражённым определёнными штаммами хеликобактера. Этим больным требуется антибиотикотерапия с целью достижения ремиссии при язвенной болезни и предупреждения риска развития злокачественных новообразований.

Выявить цитотоксичные типы Helicobacter pylori можно только посредством ПЦР-метода.

Преимущества ПЦР-анализа кала:

• высокая чувствительность метода;
• высокая специфичность теста;
• простота и неинвазивность забора материала;
• безопасность;
• возможность выделения как спиралевидных, так и кокковых форм Helicobacter pylori;
• возможность выделения различных штаммов бактерии.

Чувствительность теста – способность к выдаче истинно положительных результатов. Чем выше чувствительность, тем ниже доля ложноположительных результатов, когда антиген якобы выявляется у неинфицированных лиц.

Специфичность теста – показатель, зависящий от количества ложноотрицательных (когда у инфицированного больного антиген не выделяется) результатов исследования. ПЦР-метод исследования кала на Helicobacter pylori характеризуется чувствительностью 64–94% и стопроцентной специфичностью.

Собрать кал легко и просто. В отличие от забора крови или гастродуоденоскопии взятие материала не требует применения местных анестетиков, на которые может развиться аллергическая реакция, не причиняет боли и дискомфорта, безопасно в плане заражения «грязным» инструментом. Исследование не требует приложения определённых усилий, как, например, дыхательный метод, что делает его доступным даже для маленьких детей.

Недостатки ПЦР-анализа кала:

• отсутствие возможности определения чувствительности к антибактериальным препаратам;
• отсутствие возможности различать текущую инфекцию и успешно излеченную, когда фрагменты ДНК бактерии могут оставаться в фекалиях около месяца;
• более низкий показатель чувствительности по сравнению с исследованием биоптата (образца ткани или клеточной массы) слизистой желудка;
• относительно высокая стоимость анализа с генотипированием;
• строгие требования к персоналу: квалификация, неукоснительное соблюдение правил, аккуратность.

Один из основных недостатков ПЦР-метода является продолжением его основного достоинства: высокая чувствительность теста является причиной ложноположительных результатов в случае контаминации («загрязнения» извне) анализируемого материала.

Подготовка к сдаче анализа

Достоверность результата любого анализа зависит от чёткого выполнения определённых условий на всех этапах, и забор материала – не исключение.

Правила взятия материала:

• за трое суток до анализа отменяются антибиотики, слабительные, замедляющие перистальтику препараты, ректальные свечи и некоторые другие лекарства по наставлению врача, поэтому следует предупредить доктора о применении тех или иных лекарственных препаратов;
• сбор кала осуществляется в выданную лабораторией посуду, рекомендуется отбирать пробы из трёх разных точек;
• биоматериал желательно доставить в лабораторию немедленно; в случае отсутствия такой возможности пробу следует хранить при температуре 2–8 градусов не дольше 24 часов;
• если анализ выполняется для оценки эффективности назначенной ранее антибиотикотерапии против Helicobacter pylori, кал собирается не ранее, чем через четыре недели после окончания лечения.

Замедление пассажа каловых масс, запоры могут приводить к разрушению хеликобактера в фекалиях, что является причиной ложноотрицательных результатов. Для повышения достоверности результата врач может назначить перед анализом лёгкое слабительное – лактулозу.

Как и где сдать анализ

Анализы назначает гастроэнтеролог, поэтому перед исследованием на Helicobacter pylori необходима его консультация.

Примерная стоимость исследования кала:

• ПЦР-метод с генотипированием – 1200 рублей;
• ПЦР без генотипирования – 600 рублей;
• чувствительность к антибиотикам – 600 рублей;
• иммунологические методы – 400–650 рублей (в зависимости от метода).

Для наиболее точной диагностики Helicobacter pylori необходимо выбирать медицинское учреждение, заслужившее хорошую репутацию.

Результаты исследования

Период обработки анализов, их достоверность зависят от метода определения антигена.

Сроки выполнения, достоверность и интерпретация результатов анализов кала на хеликобактериоз.

Низкая достоверность иммунологического и культурального анализа объясняется малымсодержанием антигена в фекалиях: если ПЦР-анализ чувствителен и при наличии 10 клеток, то для достоверного результата других методов клеток должно быть хотя бы в 10 раз больше.

Исследование кала на хелибактериоз безопасно, нетравматично и может осуществляться разными методами, позволяющими обнаружить инфекцию, определить штаммы вируса и чувствительность патогена к антибиотикам.

По результатам анализов можно сформировать группу риска, у представителей которой высока вероятность развития язвы желудка и двенадцатипёрстной кишки, злокачественных опухолей желудка; оценить степень риска и минимизировать его своевременным антибактериальным лечением цитотоксичных штаммов хеликобактериоза.