Разные методы определения овуляции у собак. Определение овуляции у собак по вагинальным мазкам и кристаллизации слюны. Цитологические исследования из личного опыта

Овуляция — процесс разрыва фолликула - пузырька, который под воздействием гормонов гипофиза созревает в яичнике собаки во время каждой течки. Определение овуляции часто имеет принципиальное значение, поскольку по статистике 80% собак, оставшихся бесплодными после спаривания, были повязаны не вовремя.

Дополнительные сложности возникают у владельцев собак, имеющих скрытые (малокровные или бескровные течки), значительное количество шерсти и невысокое либидо. В таком случае иногда требуется определять не только время овуляции, но и наличие течки у собаки вообще.

начинается овуляция

Яйцеклетка, выходящая из фолликула, созревает для оплодотворения 2 дня, поэтому оптимальное время для вязки - через 1-2 дня после разрыва фолликула. В большинстве случаев принято вязать собак на 12-14 день течки, между тем овуляцияу разных собак и даже у одной и той же собаки в разные циклы может происходить от 3го до 23 дня эструса.

Для определения момента овуляции существует довольно много методов разной степени сложности как домашних, так и медицинских. Косвенным признаком овуляции может быть повышение либидо суки, повышение её привлекательности для кобелей, посветление выделений из петли. Многие заводчики пользуются измерением уровня глюкозы в вагинальной слизи, а также специальными приборами для определения электропроводимости оной слизи.

Методы определения начала овуляции у собаки

Если же говорить о более научных методах - их три: вагинальная цитология, УЗИ яичников и анализ на прогестерон крови. Все методы имеют свои плюсы и минусы, свои ограничения.

Вагинальная цитология: мазок, который берется стерильным ватным тампоном с дорсальной стенки влагалища. Суть метода состоит в том, что под воздействием гормонов, выделяемых «крышечкой» фолликула (эти гормоны называются эстрогенами) эпителий влагалища превращается из 4х слойного в 40 слойный, соответственно отшелушивается значительно большее количество поверхностных клеток, которые мы и находим в мазке, предварительно окрасив его.

Плюс метода состоит в его доступности и быстроте - анализ занимает от 5 минут, однако всё, что мы можем сказать по этому анализу - что фолликул зреет\созрел. Мы не можем судить о его разрыве и выходе яйцеклетки.

При разрыве фолликула его донышко начинает превращаться в желтое тело беременности. Этот процесс всегда в норме происходит после овуляции вне зависимости от факта спаривания суки. Желтое тело беременности выделяет гормон, поддерживающий беременность - прогестерон. В крови после овуляции мы наблюдаем стремительный скачок уровня этого гормона - за двое суток уровень прогестерона может подняться с 3 до 45 нмоль. Преимущество анализа - высокая точность. Если уровень прогестерона соответствует постовуляционному - значит фолликул точно созрел и точно разорвался. Сложность состоит в том, что брать анализ крови на прогестерон ежедневно мягко говоря не очень удобно.

На УЗИ яичников мы можем видеть фолликулы, приблизительно подсчитать их, наблюдать их разрыв, то есть наблюдать овуляцию «онлайн». Но и у этого метода есть ограничения: яичники чрезмерно «округлой» или очень крупной собаку (например упитанного алабая) рассмотреть непросто, сложность для визуализации могут представлять также газы, часто находящиеся в кишечнике собаки и особенности анатомического строения (у плоских и длинных собак яичники прикрыты последними ребрами).

На физическое развитие собак крупных пород, уходит больше времени, чем у других пород. Поэтому первая течка часто наступает не ранее 8 месяцев, а иногда в 1-1,5 года.

У сук домашних собак обычно бывает два таких половых цикла в год. Нередко два цикла происходят в интервале 1,5 года. А иногда суки текут один раз в 10-11 месяцев, причем факторы окружающей среды, световой день, температура и тому подобное влияют только на тех собак, которые содержатся на вольном выгуле. У большинства собак, живущих в городских квартирах, цикличность больше зависит от особенностей конкретного организма, на который могут оказывать влияние разнообразные внешние условия (выращивание, кормление, болезни и т.д.)

Существует четыре фазы цикла у собак: предтечка, охота, послетечка и период покоя. То, что мы на практике называем течкой на самом деле захватывает три фазы, которые сопровождаются кровянисто-слизистыми влагалищными выделениями, а также характерным поведением. Оплодотворение происходит лишь во второй фазе.

Предтечка (проэструс) длится 7-10 дней. В это время идет активное созревание яйцеклеток. Благодаря гормону эстрогену происходит активная подготовка организма к вязке. Петля в этом периоде увеличена, кровянистые выделения обильные и яркие. Несмотря на то, что сука вызывает интерес у кобелей, и даже отвечает на заигрывания, кобеля она не подпускает и не позволяет делать садки, демонстративно проявляя агрессию. Суки с повышенной половой возбудимостью могут подпустить кобеля, но из-за того, что влагалище еще не готово к совокуплению, оба партнера как правило быстро теряют интерес к спариванию.

Охота (эструс) - это период, когда сука готова к спариванию, поскольку наступает созревание половых клеток (овуляция). Она обычно длится 3-5 дней. Однако может как сокращаться до одного дня, так и продолжаться до 10 дней. Во время овуляции происходит освобождение яйцеклетки из фолликула. Несколько часов яйцеклетка еще находится в яичнике, потом поступает в половые пути.

Яйцеклетка жизнеспособна 8 дней, однако через 5-6 дней ее способность к оплодотворению резко снижается, созревание яйцеклеток происходит не одновременно, поэтому и овуляция происходит с интервалом приблизительно около 3 часов. Выделения в этот период почти бесцветные или слабоокрашенные, канал шейки раскрыт, половые губы сильно набухают, хотя Хилари Хармар, считает, что в период овуляции половые губы резко опадают и становятся вялыми, что свидетельствует о наступлении овуляции. При прикосновении к крупу сука отводит хвост в сторону и расставляет задние ноги, принимая устойчивое положение. Если в этот момент дотронуться до нижней части петли, где расположен клитор, сука сильно возбуждается и подергивает петлей. В этом периоде сука охотно принимает кобеля.

Послетечка - стадия, предшествующая периоду покоя, если не произошло оплодотворение. Продолжительность ее 30-60 дней. Выделяемый организмом прогестерон подавляет процесс овуляции, половые пути возвращаются в обычное состояние. В начале периода выделения из влагалища резко изменяются, петля «опадает». Половая охота у суки уменьшается и она огрызается на кобелей.

Если оплодотворение осуществлено, то возвращение к исходному состоянию начинается после родов и окончания выкармливания детенышей молоком.

Период покоя - у большинства пород длится 90-130 дней, у бордоских догов он может быть длиннее. К концу периода гормонами стимулируется новое созревание яйцеклеток и начинается новый цикл.

Примечание:

Половой цикл суки несмотря на общие тенденции чисто индивидуален, в пределах нормы. Существует не менее 7 вариантов второй фазы полового цикла - охоты. Исследователь Коваленко Е.Е. (1993 год) представляет ряд из семи вариантов:

1) охота длится 3-5 дней и спустя 1-3 дня после этого заканчиваются выделения; в середине периода сука максимально готова к вязке;

2) охота длится 5-8 дней, готовность к вязке одинакова, она ниже, чем в норме, переход к послетечке медленный, 3-5 и более дней;

3) охота длится 1-2 дня с максимальной готовностью, после чего выделения прекращаются и наступает послетечка;

4) охота длится 6-10 и более дней, готовность вначале возрастает, затем падает и вновь поднимается (2 пика) ближе к концу периода; переход к послетечке может быть и медленным и быстрым; готовность во время пиков одинаковая, но не максимальная;

5) вариант аналогичен предыдущему, но готовность во время одного из пиков намного больше, чем во время другого;

6) вариант аналогичен предыдущему, но интервал между пиками готовности может достигать недели и более, во время интервала активность половых желез значительно снижена;

7) прерывистая течка: у молодых сук, перед нормальной течкой, иногда наблюдается своеобразный период, когда появляются яркие кровянистые выделения, заставляющие предполагать о начале течки. Через 3-7 дней выделения полностью прекращаются. Спустя еще 3-7 и более дней, а у некоторых сук почти через месяц, вновь начинается течка. Стадия предтечки в данном варианте может быть очень короткой или нормальной.

Е. Коваленко наблюдала так же добавочную беременность, когда у суки происходили две течки, разделенные небольшим интервалом, и оплодотворение происходило в каждую из них. В положенный от первой вязки срок рождались нормальные щенки, родовая деятельность заканчивалась и сука донашивала остальных. Исследователь рекомендует в таких случаях не стимулировать искусственно продолжение родов, поскольку может произойти преждевременное отторжение оставшихся плодов.

В случае растянутой течки, когда время между овуляциями увеличено, в каждый момент времени в организме самки находится немного яйцеклеток. И наоборот, активный и быстрый процесс овуляции приводит к многоплодию.

Растянутая овуляция характерна для сук с нарушением обмена веществ (ожирение), для старых сук. Чтобы получить максимальное количество щенков в этих случаях требуется большее число вязок с промежутками в 1,5-2 суток и, кроме того, использование кобелей с очень активной и жизнеспособной спермой.

В некоторых случаях растянутая овуляция связана со снижением активности половых желез. В этом случае необходимо использовать методы повышения деятельности половой системы: повысить физическую нагрузку, проходя с сукой не менее 5-6 км, провести витаминотерапию. Ожиревшей собаке стоит снизить объем пищи и число кормлений. Можно устроить разгрузочные дни (1-2 в неделю).

Значительные отклонения в половом цикле, даже если они не ведут к бесплодию, означают гормональные нарушения и требуют вмешательства специалиста, В частности, продолжительная течка может быть связана с гиперфункцией яичников, что может сопровождаться изменениями в половых путях под воздействием излишнего количества эстрогенов.

Слабо выраженная течка также является патологией. Такая течка происходит в обычные сроки, но сука не проявляет желания к спариванию. Причиной является гормональная недостаточность.

Такие необычные течки, вероятно, связаны с нарушенным гормональным фоном собаки, что, впрочем, не всегда сказывается на плодовитости и деторождении. Тем не менее, на это обстоятельство стоит обратить внимание и при снижении плодовитости или при слишком затянутом периоде между течками рекомендуется провести гормональную коррекцию с помощью препаратов, обязательно посоветовавшись с ветеринарным врачом.

Для устранения вышеописанных отклонений в протекании полового цикла необходимо полное биохимическое обследование собаки. Использование для лечения гормональных средств всегда связано с риском серьезных гормональных расстройств, поэтому дозировку гормональных препаратов должен проводить врач, наблюдающий эту собаку в течение всего курса лечения.

Длительное отсутствие течки может быть связано с недостатком гормонов гипофиза и щитовидной железы, а также с дефицитом эстрогенов (слабой функцией яичников).

После овуляции яйцеклетки на месте разорвавшегося фолликула формируется желтое тело. Гормоны желтого тела играют основную роль в поддержании беременности. При отсутствии оплодотворения желтое тело рассасывается в конце полового цикла и, даже если сука не оплодотворена, иногда, создает гормональный фон, соответствующий беременности. Такое состояние суки называется ложной щенностью.

Ложная щенность, в случае, если она сильно выражена сопровождается психическими и физиологическими расстройствами в организме собаки.

Иногда бесплодие суки связано с неправильно просчитанным сроком вязки.

Истинное бесплодие может быть вызвано как одной, так и рядом различных причин, о чем можно прочитать в специальной литературе по болезням собак.

Искусственное вызывание течки

В больших питомниках, где требуется единовременное получение потомства (например, если желательно получение щенков только в весенне-летний период) возможно синхронное наступление эструса у всех сук благодаря введению гормональных препаратов. Для этой процедуры используются препараты: гонадолиберин, гонадотропин сыворотки жеребой кобылы, хорионический гонадотропин человека.

Синтетические аналоги гормона гонадолиберина помогают увеличить количество овулирующих яйцеклеток, если он вводится сукам во время спаривания. Его вводят малоплодным сукам для увеличения количества рождаемых щенков. Схема обработки, дозы и режим введения гормонов должны разрабатываться специалистом.

Введение гормона окситоцина обеспечивает синхронное наступление родов. Эта процедура не влияет отрицательно на здоровье матери, а кроме того уменьшает количество затяжных, требующих вмешательство акушера, родов. Необходимо однако отметить, что передозировка окситоцина и его аналогов может вызвать чрезмерное сокращение матки и разрыв ее стенок, поэтому при использовании таких препаратов рекомендуется предварительно посоветоваться с ветеринарным врачом.

Одновременное покрытие сук, их щенение обеспечивает выращивание выравненного по возрасту молодняка в наиболее оптимальных условиях.

Процесс оплодотворения

Процессу оплодотворения у собак предшествует осеменение. В процессе совокупления сперма, содержащая сперматозоиды, вводится в половые пути суки. У собак процесс осеменения и овуляции совмещены во времени, таким образом, оплодотворение может быть произведено лишь в случае полной готовности половых путей суки.

В момент совокупления сперма и секреты половых желез кобеля вводятся в половые пути суки: сначала выбрасывается прозрачная слизистая жидкость без сперматозоидов. Она играет роль смазки. Через несколько секунд после первой, еще до образования полного замка, вбрасывается густоватая белесая жидкость со сперматозоидами.

Сначала сперма движется благодаря сокращениям стенок проводящих путей и ресничек на их стенках. Но в результате выбрасывания секретов предстательной железы спермии приобретают способность двигаться самостоятельно. Одновременно стенки и реснички помогают им передвигаться направленно.

Оплодотворение не зависит от времени склещивания, поскольку сперма в избыточном количестве выбрасывается кобелем в самом начале полового акта. Все три стадии эякуляции происходят за 1-3 минуты, хотя сука может удерживать кобеля в среднем 15-30 минут, а в отдельных случаях минимально 5, максимально 40-50 минут и более. Таким образом, замка продолжительностью 5 минут вполне достаточно для оплодотворения.

Отсутствие склещивания в большинстве случаев говорит о неготовности суки. Однако, некоторые суки всегда вяжутся без «замка».

После успешного спаривания активность суки как правило снижается на некоторое время, поэтому контрольную вязку проводить менее, чем через сутки, нецелесообразно.

Определение оптимальной готовности сук

Поскольку величина помета в большей степени зависит от суки, то желательно, по возможности, более точно определить период овуляции самки. Существует несколько методов:

1) анализ на гормональную готовность;

2) метод влагалищных мазков;

3) индикаторный метод проверки на глюкозу;

4) визуальный метод.

Первый метод относительно трудоемок и для наших собаководов пока малодоступен. Он состоит в том, что у суки берется проба крови и, после некоторых манипуляций, цвет пробы сравнивают с цветом контрольных растворов. Если цвет пробы менее интенсивен или равен нижнему пределу, это значит, что овуляция наступила. Если цвет находится между контрольными пробами, она наступит в ближайшие 48 часов. Этот метод достаточно точен и очень жаль, что у нас он не внедрен в практику.

Эффективным является также второй метод - метод вагинальных мазков, предложенный кандидатом наук Е.Е. Коваленко и ее коллегами, сотрудниками кафедры зоологии позвоночных Санкт-Петербургского Государственного Университета.

Этот метод хорошо известен в западных странах. Он основан на том, что слизистая оболочка половых путей изменяется в непосредственной связи с изменениями в яичниках в процессе развития и созревания половых клеток. Благодаря пробам, взятым из влагалища сук, можно пронаблюдать весь процесс протекания полового цикла.

Для получения проб ватным тампоном на палочке собирают слизь во влагалище и этот мазок переносят на предметное стекло. Пробы берут раз в сутки. В зависимости от того, хотим мы получить полную картину цикла или определить дни максимальной овуляции, берутся различные количества проб.

Для полного обследования и составления графика необходимы 20-25 проб, начиная с 3-5 дня пустовки. При наличии графика пробы берутся лишь выборочно - 5-8 или разово - 2-3 для уточнения сроков вязки.

Сотрудники кафедры акушерства, гинекологии и искусственного осеменения животных Санкт-Петербургской академии ветеринарной медицины В.У. Давыдов, Г.С. Степанов и Н.Б. Баженова усовершенствовали методику цитодиагностики в ветеринарной гинекологии. Они утверждают, что на протяжении всей жизни животного слизистая оболочка влагалища способна отражать колебания уровня эндогенных гормонов, равно как и введение в организм экзогенных гормонов. Ими разработано устройство для получения мазков-отпечатков со слизистой оболочки влагалища. Исследуемый материал берется из краниальной трети верхнего свода с помощью влагалищного зеркала. Место взятия определено в связи с тем, что именно эта часть влагалища является особенно чувствительной к гормональной стимуляции у млекопитающих. При взятии материала из нижнего свода влагалища, в мазки, как правило, попадают отторгнувшиеся значительно раньше клетки.

Предовуляционный период характеризуется появлением в мазках большого количества парабазальных и базальных клеток. Клетки поверхностных слоев немногочисленны, располагаются изолированно, их края расправлены с крупными ядрами.

После овуляции в мазке преобладают поверхностные клетки с пикнотическими ядрами. В этот период появляется «измятость» клеток и закрученность их краев, границы клеток нечеткие. В период охоты и после овуляции наблюдается появление в мазках секреторных клеток, количество их значительно увеличивается к середине цикла и вновь уменьшается в фазе проэструма.

В течение всего цикла в мазках выявлены нейтрофилы, количество которых значительно увеличивается после овуляции.

Идеально, если картина вагинальных мазков совпадет с анализом на гормональную активность. Это указывает на точное время овуляции и позволяет определить наилучшее время для спаривания.

Сама процедура получения влагалищного мазка несложна и доступна каждому владельцу собаки. Для того, чтобы получить препарат влагалищного мазка, необходимо иметь:
1. Дистиллированную воду 2-3 литра.
2. Несколько глазных пипеток с закругленными концами.
3. Предметные стекла (30 штук).
4. Чашки Петри или чашки Коха (можно обойтись и небольшими блюдцами).
5. «Салазки» - 2 стеклянные трубочки диаметром 3-4 мм, длиной 6-7 см, соединенные между собой с обоих концов резиновыми трубками, диаметром, позволяющим плотно надеть их на стеклянные трубки, длиной 4-6 см. Салазки кладутся на дно чашек Петри (или Коха) или блюдца. Салазки можно успешно заменить двумя спичками, уложенными на дно чашек или блюдца параллельно друг другу. На салазки или спички кладутся предметные стекла.
6. Фильтровальная бумага.
7. Стаканчик (высотой с длину предметного стекла) для споласкивания, окрашенного препарата.
8. Краситель.
a. Эозиновокислый метиленовый синий по Май-Грюнвальду или по Лейшману (готовый раствор).
b. Раствор Гимза (метиленовый синий и эозин).
Готовые растворы этих красителей бывают в лабораториях: медицинских или биологических, где красят мазки крови или влагалищные мазки.
9. Стеклянные сосуды (маленькие бюксики или стаканчики) для красителя и дистиллированной воды.

Техника получения и окраски мазков.
1. В чашке Петри (или Коха) или на дне блюдца, на «салазки» или на спички положить чисто вымытое и обезжиренное сухое предметное стекло.
2. В чистую пипетку набрать Ѕ ее объема дистиллированной воды.
3. Ввести пипетку во влагалище суки (по возможности не касаясь его наружного края), выпустить воду и сразу набрать жидкость из влагалища в пипетку («промыть» влагалище).
4. Содержимое пипетки сразу же нанести на середину приготовленного предметного стекла.
5. Высушить мазок на воздухе, прикрыв от пыли чашку Петри (или Коха) или блюдце фильтровальной бумагой.
6. Набрав в отдельную пипетку краситель, нанести 5-6 капель на высушенный мазок и оставить на 3-5 минут.
7. Нанести на мазок 5-6 капель дистиллированной воды так, чтобы мазок вода покрывала полностью, оставить еще на 5-10 минут, затем слить раствор и погрузить стекло с окрашенным мазком на очень короткий срок (до 1-1,5 мин.) в стаканчик, доверху наполненный дистиллированной водой.
Аккуратно обсушить между листками фильтровальной бумаги.
8. Маркировать мазок. На краю (любом, т.к. посередине располагается мазок) предметного стекла написать: № препарата, кличку собаки, дату и порядковый день пустовки. Надпись лучше выполнить тушью и залить клеем БФ.
Окраска удается лучше на совсем свежих мазках, но вполне допустима окраска мазков и 2-х - 4-х дневной давности.
Препарат готов, рассматривать его следует под микроскопом при 10-и - 40-а кратном увеличении.
На окрашенном препарате (по Май-Грюнвальду или Лейшману) «чешуйки» окрашены в красноватый цвет, цитоплазма эпителиальных клеток - в голубоватый цвет, а ядра - в синий. Лейкоциты окрашиваются в синий, почти фиолетовый цвет.
При окраске по Гимза: «чешуйки» темно-синего цвета, цитоплазма - голубая, ядра - синие. Лейкоциты - темно-синие.
Интенсивность окраски клеточных элементов может зависеть от свежести красителя.
Позволю себе коротко остановиться на отличиях цитологической картины на разных стадиях полового цикла.
Как уже говорилось выше, весь цикл составляет четыре стадии или фазы, из которых нас интересует лишь три - предтечка, течка и послетечка (проэструс, эструс и метаэструс), четвертая стадия - покой - составляет промежуток между двумя пустовками и характеризуется полной инактивностью половой системы.
1. Фаза предтечки, или подготовительная фаза длится от 9 до 11 дней и характеризуется кровянистыми выделениями, иногда обильными, в яичниках собаки в это время происходит интенсивное развитие фолликулов. Собака игрива, внимательно исследует все мочевые метки собак, постоянно присаживается, оставляя буквально капельки мочи, содержащие специфический запах, привлекающий кобелей. В крови быстро растет и достигает пика за 1-2 дня до конца проэструса концентрация эстрогена. Картина влагалищного мазка в начале фазы характеризуется большим числом округлой формы эпителиальных клеток с довольно крупными ядрами. В конце фазы (9-10 день от начала пустовки при нормальном половом цикле) - в мазке появляются отдельные ороговевшие безъядерные многоугольные клетки, так называемые «чешуйки».
2. Фаза собственно течки длится от 2 до 10 дней и характеризуется почти бесцветными или бледно розовыми выделениями из влагалища. В этой фазе происходит разрыв зрелых фолликулов и выбрасывание яйцеклеток, которые через несколько часов попадают в яйцеводы, где задерживаются до 7 - 8 дней; здесь же происходит встреча со сперматозоидами (в случае вязки) и оплодотворение. Наиболее высокой способностью к оплодотворению яйцеклетки обладают в первые 5-6 дней. В крови резко повышается уровень гормона эстрадиола, что приводит к увеличению количества во влагалище полностью ороговевших эпителиальных клеток - «чешуек». Оптимальным сроком для вязки следует считать тот день, когда на препарате влагалищного мазка подавляющее большинство клеточных элементов представлено чешуйками.
3. Фаза послетечки или торможения занимает в половом цикле около 10-14 дней и постепенно переходит в стадию полного генеративного покоя.
В этой фазе еще могут иметь место выделения из влагалища, они, как правило, бесцветны, но могут быть и бледнорозовыми, сука становится спокойной и агрессивной по отношению к кобелям. На месте лопнувших фолликулов образуются желтые тела, вырабатывающие гормон прогестерон, подавляющий овуляцию. Неоплодотворенные яйцеклетки разрушаются и погибают. Влагалищный мазок демонстрирует незначительное количество «чешуек» обилие молодых эпителиальных клеток, округлых с крупными ядрами. Хорошим показателем этой фазы служит нарастающее число лейкоцитов.
Таким образом, картина влагалищного мазка достаточно четко характеризует и отражает физиологическое состояние суки и ее готовность к спариванию. Она также позволяет оценить по ряду характеристик особенности репродуктивных циклов семейств, и возможность зачатия, выявить причины «ложной беременности», малой плодовитости и т.п.

Заслуженный эксперт России кандидат биологических наук
А.Э. Айрапетян

Третий метод основан на том факте, что во время овуляции слизь влагалища содержит глюкозу, что можно установить благодаря индикаторным лентам, которые используют диабетики. Полосочку этой ленты вводят во влагалище, где она смачивается в выделениях. В течение 1 минуты она становится зеленого цвета. В этом случае можно говорить о максимальной готовности суки в ближайшие 24 часа. У инфантильных сук концентрация секрета ниже, поэтому чувствительность индикаторной ленты может быть недостаточна.

Четвертый - визуальный метод. Наши разведенцы, которые не знакомы с вышеописанными методами, как правило, используют визуальный метод. Он самый доступный, но не самый надежный, поскольку характер выделений может неадекватно отражать состояние суки.

Рекомендуемый средний срок вязки для бордоских догов - 12-13 день течки, у некоторых сук и позже. С каждым последующим щенением дни овуляции могут сдвигаться в сторону возрастания. Например, если вы впервые повязали свою суку на 11 и 13 дни, в следующую вязку лучше это сделать на 12 и 14 дни, или даже на 13 и 15. Однако каждый владелец должен ориентироваться на поведение своей суки, поскольку собака сама хорошо чувствует свое физиологическое состояние. Обычно для определения готовности суки к вязке владелец кладет одну руку на круп стоящей суки, а пальцем другой руки дотрагивается до петли или чуть выше. Готовая сука начинает подергивать петлей кверху, задирать и отводить хвост, широко расставляя при этом задние ноги. Этот метод позволяет определить готовность суки к спариванию в ближайшие 48 часов.

Состояние петли суки закономерно изменяется на разных этапах течки. Она постепенно набухает до своих максимальных размеров, но при этом остается твердой на ощупь. Как только петля становится мягкой, вялой, а иногда повисает мешком - это означает, что наступила овуляция и сука готова к вязке.

Половой цикл кобеля

Для созревания сперматозоидов требуется несколько суток. Развитие новой партии начинается в случае расхода предыдущей. Отсюда следует, что половой цикл кобеля зависит от регулярности спаривания.

Важно знать, что за одно спаривание кобель не расходует весь запас сперматозоидов даже из одного семенника и может успешно, с интервалом в несколько часов, оплодотворить несколько самок. Время в этом случае нужно лишь для восстановления полового возбуждения. Какое количество спариваний может произвести кобель, зависит от его индивидуальных особенностей, а именно возраста, количества клеток в половых железах, количество извергаемых клеток при каждом оплодотворении. Теоретически половые железы кобеля могут работать непрерывно по мере расхода семени при условии, что в интервалах между спариванием запас сперматозоидов успевает восстанавливаться.

На практике процессы созревания сперматозоидов, формирование и выведение семени и само спаривание являются большой нагрузкой для кобеля, требуют энергетических и нервных затрат.

Поэтому длительное интенсивное использование кобеля истощает его нервную систему, отрицательно сказывается на здоровье, приводит к потере интереса к спариванию, преждевременному старению и одряхлению кобеля.
. Факторы, влияющие на эффективное воспроизводство собак.

Сезон осеменения.
По данным некоторых авторов, (С. Гьерра, С. Пети, Р. Бадино) снижение плодовитости возникает, когда вязки или искусственное осеменение проводятся к концу летнего периода, что совпадает со снижением качества спермы у производителей. Но данные исследования не могут нести большую долю вероятности, так как сезонное снижение продуктивности наблюдается не всегда именно в это время года и зависит от множества факторов. Во всяком случае, было бы предпочтительно избегать данного периода и осуществлять репродукцию животных со слабой вероятностью оплодотворения зимой, чтобы увеличить шанс на успех.

Сегодня выходит на первый план грамотный, научно-обоснованный подход к племенному разведению собак. Высокая племенная ценность, уникальность некоторых особей является предпосылкой к тщательному обследованию репродуктивного аппарата собак не только с целью исключения инфекционных заболеваний, но и для выявления сроков овуляции. Особенно актуально такое обследование для животных, выезжающих на вязку в другие регионы страны и мира.

Многие заводчики понимают необходимость диагностики эструса, однако, дефицит информации, разрозненность данных по этому вопросу, а также недостаток специалистов в ряде случаев приводит к получению недостоверных данных или их неправильной интерпретации. Таким образом, наличие большого спроса на диагностику полового цикла у сук явилось причиной разработки алгоритма его исследования с выведением нормативных показателей и определением параметров овуляции.

Прежде всего, необходимо дать краткую характеристику полового цикла сук. Собака является моноцикличным животным, периодичность цикла составляет от 4 до 12 месяцев. Выделяют следующие стадии: проэструс, эструс, метэструс и анэструс. Начало течки, или проэтрус, проявляется соответствующими изменениями в половом аппарате: отмечается рост фолликулов и увеличение в них количества рецепторов к ФСГ. Клинически эта стадия характеризуется гиперемией слизистой влагалища, отёчностью вульвы, появлением кровянистых выделений. Под влиянием фоллитропина совместно с различными факторами роста происходит стимуляция развития примордиальных фолликулов, а также дифференцировка и пролиферация клеток гранулёзы. Из множества начинающих рост фолликулов созревают лишь единицы. Стадия эструса соответствует половой охоте и овуляции, и именно в этот период следует проводить вязку. Чёткую границу между стадиями уловить трудно, однако во время эструса наблюдается размягчение вульвы, изменение характера вагинальных выделений, готовность животного к спариванию. Затем на месте лопнувшего фолликула образуется полость, которая быстро заполняется гранулёзными клетками, наполненными жёлтым пигментом лютеином. Развитие жёлтого тела происходит в стадию метэструса, не зависимо от того произошло оплодотворение или нет. Как известно, беременность у собак имеет продолжительность 58-65 суток, и после её разрешения начинается стадия анэструса, или полового покоя.

Становится понятным, что подготовка к овуляции протекает под воздействием комплекса факторов, важнейшую роль из которых играют гормоны. Известно, что эстрогены и гестагены регулируют пролиферативные процессы в слизистой оболочке влагалища, которая состоит из многослойного плоского эпителия. В зависимости от степени зрелости, вагинальный эпителий может быть представлен парабазальными, промежуточными, поверхностно-промежуточными и поверхностными клетками. Морфологически они различаются следующим образом: парабазальные клетки самые мелкие, округлой формы, большую часть клетки занимает ядро. Промежуточные приблизительно вдвое крупнее за счёт цитоплазмы, поверхностно-промежуточные клетки истончаются, приобретают несколько угловатую форму. Поверхностные клетки самые крупные, часто безъядерные, содержащие гранулы кератогиалина В фазе анэструса вагинальный эпителий тонкий и бледный, в основном представлен парабазальными клетками. Овуляторный пик характеризуется наибольшей степенью зрелости вагинального эпителия, т.е. выявлением в вагинальном мазке более 90 % поверхностных клеток с наивысшим процентом кариопикноза (более 80%) и большой восприимчивостью к красителю. Развитие жёлтого тела приводит к появлению в мазке большого количества роговых чешуек, лейкоцитов и промежуточных клеток.

В нашем исследовании мы поставили следующие задачи:

Выявить динамику изменения эстрадиола и прогестерона в период проэструса и эструса и сопоставить её с результатами цитологического исследования вагинальных мазков
подвергнуть анализу данные о сроках вязки и оплодотворяемости в связи с эндокринным статусом и степенью зрелости вагинального эпителия с целью определения оптимальных параметров для спаривания

Исследованию подверглись 22 собаки в возрасте от 1,5 до 7 лет в различные периоды проэструса и эструса. Концентрация прогестерона и эстрадиола в сыворотке крови определялась иммуноферментным методом с использованием анализатора вертикального сканирования и специальных диагностических наборов на базе клинико-биохимической лаборатории СПбГАВМ. Взятие мазков осуществлялось стерильными ватными палочками с бокового свода влагалища, препараты фиксировались специальным красителем Май-Грюнвальда и докрашивались красителем Романовского-Гимза. В мазках высчитывалось процентное соотношение парабазальных, промежуточных, поверхностно-промежуточных и поверхностных клеток из 100 штук.

Анализируя полученные результаты, мы выявили общую закономерность изменения динамики гормонов для всех исследованных животных и выделили следующие фазы проэструса:

1. Фаза относительного покоя. Продолжается от начала пустовки в течение 5-15 суток. Не смотря на выраженные изменения состояния наружных половых органов, уровень прогестерона и эстрадиола находится на относительно низком уровне, не превышая нормативные значения соответствующие стадии анэструса Считается, что в этот период происходит стимуляция развития примордиальных фолликулов, пролиферация клеток гранулёзы под воздействием ФСГ.
2. Фаза начала роста эстрадиола. В течение 2 - 3 суток после первой фазы обнаруживается некоторое повышение концентрации эстрадиола. В этот период фолликулы продолжают созревать и синтезируют достаточное количество эстрогенов, которые, в свою очередь стимулируют выброс лютенизирующего гормона.
3. Фаза начала роста прогестерона.. Под воздействием лютеотропина стероидогенез в фолликулах переключается на выработку прогестерона. В дальнейшем рост прогестерона будет продолжаться, минуя овуляцию, вплоть до стадии метэструса. Однако, выделяется ещё одна фаза:
4. Фаза пика эстрадиола. Продолжительность этой фазы 1 - 3 суток. Резкий выброс эстрогенов обусловлен гибелью большого числа фолликулов, не достигших окончательной зрелости с высвобождением большого количества фолликулярной жидкости. Пиковые концентрации эстрадиола, определяемые в крови, приводят к мощному выбросу гонадолиберина гипоталамусом, а следовательно - и к секреции гонадотропных гормонов, в наибольшей степени ЛГ. Предовуляторный выброс лютеотропина способствует дальнейшему росту уровня прогестерона. Последний вместе с ФСГ и ЛГ индуцирует синтез протеолитических ферментов в яичниках, а комплекс факторов (натрийуретический пептид, ангиотензин II, пролактин, нейропептид У, вазопрессин, брадикинин) увеличивают гидростатическое давление в фолликулярной полости.

Таким образом, под воздействием вышеперечисленных причин фолликулярная стенка разрывается и происходит овуляция. По данным различных исследователей, овуляции соответствует концентрация прогестерона в пределах 35 - 55 нмоль/л. В наших исследованиях мы выявили при повышении прогестерона до 32 - 43 нмоль/л довольно резкое падение уровня эстрадиола.

Результаты исследований представлены в таблице.

ДИНАМИКА ИЗМЕНЕНИЯ КОНЦЕНТРАЦИИ ПРОГЕСТЕРОНА И ЭСТРАДИОЛА В СТАДИЯХ ПРОЭСТРУСА И ЭСТРУСА У СУК

Необходимо отметить наличие чёткой взаимосвязи между гормональным статусом в конкретный период пустовки и цитологической картиной вагинальных мазков. Так, мазки, взятые в 1 фазу проэструса, характеризовались большим количеством эритроцитов, эпителий был представлен приемущественно парабазальными клетками (67,4+4,3%) и промежуточными (30,5+2,8%). Поверхностно-промежуточные клетки встречались редко (3,1+0,4 %). Во второй фазе соотношение клеток несколько менялось: увеличивалось содержание промежуточных до 47,3+3,7 % и поверхностно-промежуточных до 15,6±2,1 % на фоне снижения процента парабазальных - до 37,1+1,2 %. Дальнейшая эстрогенизация приводит к пролиферации влагалищного эпителия, о чём свидетельствует изменение цитологического профиля на 3 стадии проэструса в сторону повышения процента поверхностно-промежуточных клеток (32,4±2,0 %) и появления единичных поверхностных (4,1+0,32%). Доля промежуточных клеток уменьшалась до 42,0+2,6 % , а парабазальных - до 21,5+1,8 %. Довольно резкие цитологические изменения происходили в 4 фазе - пиковые концентрации эстрадиола приводили к значительному увеличению самых зрелых клеток. Процентное содержание поверхностных эпителиальных клеток составляло в этот период порядка 76,3+4,9 %, многие из которых были безъядерные, Доля поверхностно-промежуточных и промежуточных была 20,4±1,6 % и 3,3+0,3 % соответственно. Следует указать, что многие клетки изменяли восприимчивость к красителю, становясь зозинофильными. И, наконец, во время эструса почти все клетки вагинального эпителия в мазке были поверхностные (91,3+ 3,2%), в большей части из них ядро отсутствовало. И лишь 8,7+0,34 % составляли поверхностно-промежуточные клетки.

Мы провели обследование 17 сук для выявления оптимального дня вязки. Предварительно исключали наличие скрытых инфекций методом ПЦР-диагностики. У каждой особи во время пустовки проводилось определение уровня прогестерона и эстрадиола, а также цитологическое исследование вагинальных мазков. Мы рекомендовали планировать вязку при уровне прогестерона 30-35 нмоль/л и повторно через 48 часов. Процент оплодотворяемости составил 100%.

Концентрация прогестерона является ключевым критерием для определения сроков овуляции, но определение уровня эстрадиола и цитологическое исследование влагалищных мазков вносят ценные уточняющие данные. При первичном обращении во время пустовки рекомендуем делать первый анализ на 3-5 сутки проэструса. При низких концентрациях половых гормонов и отсутствии пролиферативных изменений вагинального эпителия повторное взятие анализов следует проводить через 3-4 суток. Необходимо отметить, что при начале роста прогестерона можно прогнозировать динамику его изменения, сделав как минимум, два исследования с интервалом 48 часов. По данным наших исследований в среднем уровень этого гормона в крови за сутки увеличивается на 6,52 нмоль/л, однако следует придерживаться индивидуальных графиков. Рекомендуем использовать полученные нами данные для практической работы ветеринарных специалистов и кинологов.

Васильева С.В., Васильев Р.М.
Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины

Овуляция — процесс разрыва фолликула - пузырька, который под воздействием гормонов гипофиза созревает в яичнике собаки во время каждой течки. Определение овуляции часто имеет принципиальное значение, поскольку по статистике 80% собак, оставшихся бесплодными после спаривания, были повязаны не вовремя.

Дополнительные сложности возникают у владельцев собак, имеющих скрытые (малокровные или бескровные течки), значительное количество шерсти и невысокое либидо. В таком случае иногда требуется определять не только время овуляции, но и наличие течки у собаки вообще.

начинается овуляция

Яйцеклетка, выходящая из фолликула, созревает для оплодотворения 2 дня, поэтому оптимальное время для вязки - через 1-2 дня после разрыва фолликула. В большинстве случаев принято вязать собак на 12-14 день течки, между тем овуляцияу разных собак и даже у одной и той же собаки в разные циклы может происходить от 3го до 23 дня эструса.

Для определения момента овуляции существует довольно много методов разной степени сложности как домашних, так и медицинских. Косвенным признаком овуляции может быть повышение либидо суки, повышение её привлекательности для кобелей, посветление выделений из петли. Многие заводчики пользуются измерением уровня глюкозы в вагинальной слизи, а также специальными приборами для определения электропроводимости оной слизи.

Методы определения начала овуляции у собаки

Если же говорить о более научных методах - их три: вагинальная цитология, УЗИ яичников и анализ на прогестерон крови. Все методы имеют свои плюсы и минусы, свои ограничения.

Вагинальная цитология: мазок, который берется стерильным ватным тампоном с дорсальной стенки влагалища. Суть метода состоит в том, что под воздействием гормонов, выделяемых «крышечкой» фолликула (эти гормоны называются эстрогенами) эпителий влагалища превращается из 4х слойного в 40 слойный, соответственно отшелушивается значительно большее количество поверхностных клеток, которые мы и находим в мазке, предварительно окрасив его.

Плюс метода состоит в его доступности и быстроте - анализ занимает от 5 минут, однако всё, что мы можем сказать по этому анализу - что фолликул зреет\созрел. Мы не можем судить о его разрыве и выходе яйцеклетки.

При разрыве фолликула его донышко начинает превращаться в желтое тело беременности. Этот процесс всегда в норме происходит после овуляции вне зависимости от факта спаривания суки. Желтое тело беременности выделяет гормон, поддерживающий беременность - прогестерон. В крови после овуляции мы наблюдаем стремительный скачок уровня этого гормона - за двое суток уровень прогестерона может подняться с 3 до 45 нмоль. Преимущество анализа - высокая точность. Если уровень прогестерона соответствует постовуляционному - значит фолликул точно созрел и точно разорвался. Сложность состоит в том, что брать анализ крови на прогестерон ежедневно мягко говоря не очень удобно.

На УЗИ яичников мы можем видеть фолликулы, приблизительно подсчитать их, наблюдать их разрыв, то есть наблюдать овуляцию «онлайн». Но и у этого метода есть ограничения: яичники чрезмерно «округлой» или очень крупной собаку (например упитанного алабая) рассмотреть непросто, сложность для визуализации могут представлять также газы, часто находящиеся в кишечнике собаки и особенности анатомического строения (у плоских и длинных собак яичники прикрыты последними ребрами).

Принцип действия: тест — полоска меняет цвет с розового на бордовый в период наступления овуляции. Тестирование можно начинать с первого дня начала течки.

Шаг 1

Протрите вульву начисто и удалите капли крови.

Шаг 2

Приоткройте вульву и вставьте тест — полоску стороной с розовым индикатором на 2-3 см внутрь.

Шаг 3

Оставьте тест — полоску в таком положении на 10 сек.

Шаг 4

Вытащите тест — полоску и убедитесь, что она была в контакте с вагинальной жидкостью.

Шаг 5

Прочитайте результаты и сравните их с результатами снимков ниже, если вы не уверены.

Отрицательный показатель (овуляция не наступила) — цвет тест — полоски остается без изменений.

Положительный показатель (овуляция наступила) – изменение цвета тест — полоски от бордового и фиолетового до черного свидетельствует о наступлении овуляции. Результаты могут варьировать от небольшого цветового пятна до окрашивания всей индикаторной поверхности тест — полоски.

Внимание! Не дотрагивайтесь до розовой индикаторной поверхности тест — полоски. Это может привести к некорректным результатам.

Помните, что овуляция у собак может наступать как на 5, так и 21 день от начала течки.

Вязка собак

Заводчики собак всегда нуждаются в определении сроков вязки. Когда же вязать суку?

Лучшее время для покрытия суки это период — день до овуляции и первые дни овуляции.

Овуляция собак — это оптимальные дни для покрытия суки. Они могут отличаться, в зависимости от породы. А также могут «сдвигаться» на протяжении жизни даже у одной и той же собаки. Принято считать что с увеличением возраста суки, вязку необходимо проводить в более поздние сроки. В большинстве случаев это так. Однако есть случаи, когда охота может наступить раньше чем в предыдущие течки. Хотя, как правило охота совпадает с периодом овуляции. Также у некоторых собак охота может не совпадать с периодом овуляции и наступить позже тех дней, в которые больше всего шансов забеременеть.

Во время овуляции собак выделения становятся более слизистыми и светлеют.

Цвет выделений, подсчет дней с начала течки, поведение суки и состояние вульвы — это вторичные признаки, которые вызываются процессами, происходящими в организме суки. По этим признакам определить готовность к вязке довольно тяжело.

Поэтому для того чтобы быть уверенными в сроках вязки можно использовать тест — полоску. Применение теста для определения сроков овуляции собак возможно даже в домашних условиях.

Для более точного результата тест для определения вязки собак необходимо применять в динамике (с начала течки). Результат можно сравнить на фото выше.