Гуморальный иммунитет и история его изучения. Пастер не знал, почему прививки предохраняют от заразных болезней. Он думал, что микробы «выедают» из организма что–то нужное именно им

6.3. ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

Основной функцией иммунной системы является контроль за постоянством внутренней среды организма и удаление болезнетворных микробов или чужеродных молекул. В выпол­нении этой функции важная роль принадлежит механизмам врожденного иммунитета. Их называют еще факторами неспецифической защиты, т.к. они защищают организм от различных экзогенных и эндогенных агрессий, а их защитные функции лишены избирательности. К системе врожденного иммунитета относятся фаго­цитарные клетки крови и тканей, натуральные киллеры, а также молекулы, продуцируемые этими клетками (систе­ма комплемента, интерлейкины, интерфероны и др.).

Механизмы специфического иммунного ответа вклю­чаются только после контакта с антигеном, а защита выполня­ется высокоспециализированными клетками иммунной системы. Распоз­навание и элиминацию чужеродных агентов осуществляют лимфоциты (клеточный иммунитет), а также продуцируемые и секретируемые ими антитела - иммуноглобулины (гуморальный иммунитет). Все эти компо­ненты находятся в тесной взаимосвязи; местом их функциональной коо­перации являются органы и ткани иммунной системы организма. В гематологической клинике обычно используются методы изучения гуморального и клеточного иммунитета, а также системы фа­гоцитов.

6.3.1. Изучение гуморального звена иммунитета.

Концентрации иммуноглобулинов классов M, G, A в сыворотке крови, а также секреторного иммуноглобулина А (SIgA) и S-компонентов в слюне и других секретах являются важнейшими параметрами гуморально­го звена иммунной системы. Методы количественной оценки иммуногло­булинов в биологических средах можно разделить на несколько групп в соответствии с принципами, лежащими в их основе: иммунопреципитация в геле, нефелометрия или турбодиметрия, твердофазный иммунофермент­ный анализ и радиоиммуноанализ. Они основаны на сравне­нии концентрации иммуноглобулинов в исследуемом объекте со стан­дартным раствором установленной концентрации.

В иммунологических исследованиях наибольшее распространение получил метод радиальной иммунодиффузии по Манчини. Он основан на том, что при встрече антигена (АГ) и антитела (АТ), относящегося к определенному классу иммуноглобулинов, в агаровом геле происходит их взаимодействие, и образующийся преципитат выпадает в осадок в виде визуально определяемых зон или полос. Диаметр кольца преципи­тации пропорционален концентрации иммуноглобулина. В норме содержа­ние иммуноглобулинов в сыворотке крови составляет: IgG - 13,9±0,64 г/л, IgA - 2,82±0,19 г/л, IgM - 1,18±0,06 г/л.

Лазерная нефелометрия основана на регистрации светового пото­ка, который рассеивается комплексом АГ-АТ, взвешенным в оптически прозрачной среде. Принцип турбодиметрии основан на регистрации света, поглощаемого образовавшимся комплексом АГ-АТ. Большим преимуществом кинетической нефелометрии является быстрота получения результатов (несколько минут; для сравнения: метод Манчи­ни для IgG и IgA - 24 часа, для IgM - 48 часов).

Твердофазный иммуноферментный анализ (ИФА) в силу своей боль­шой чувствительности применяется для определения в сыворотке минор­ных иммуноглобулинов IgD и IgE, а также для определения всех клас­сов и субклассов иммуноглобулинов в супернатантах культур лимфоци­тов периферической крови, стимулированных В-митогенами: бактериаль­ным липополисахаридом (ЛПС), митогеном растительного происхождения PWM, антителами против иммуноглобулиновых m-цепей.

Недостаточность иммуноглобулинов может быть врожденной или приобретенной. Причинами недостаточности иммуноглобулинов могут быть: дефекты пролиферации, дифференцировки и функций В-лимфоцитов, нарушения регуляции синтеза иммуноглобулинов или переключения на другой изотип, связанные с дефектами Т-хелперов или соответствующих цитокинов, общая недостаточность белкового синтеза, ускорение ката­болизма молекул иммуноглобулинов или их разрушение протеолитически­ми ферментами.

Примером генетического дефекта является агаммаг­лобулинемия Брутона, которая развивается вследствие мутации в гене, кодирующем тирозинкиназу, которая необходима для дифференцировки В-клеток. В ре­зультате предшественники В-лимфоцитов не могут дифференцироваться в зрелые В-лимфоциты. У таких больных отсутствуют зрелые В-лимфоциты, плазматические клетки и нет никаких иммуноглобулинов.

Злокачественная трансформация В-лимфоцитов приводит к селективной пролиферации какого-то одного клона клеток и к продукции антител одного класса и одной специфичности. Такие случаи относятся к моноклональным гаммапатиям и проявляются вариабельными иммунодефицитами. Примером вторичного иммунодефицита, развивающегося вследствие злокачественной трансфор­мации В-лимфоцитов, является множественная миелома, при которой в сыворотке больного появляется большое количество гомогенного бел­ка - моноклонального иммуноглобулина, секретируемого злокачественным клоном В-клеток. Избыток легких цепей иммуноглобулинов, продуцируемых теми же клетками, выводится через почки и выявляется в моче в виде белка Бенс-Джонса.

Нарушение синтеза иммуноглобулинов наблюдается при лимфогранулематозе, неходжкинских лимфомах, хроническом лимфолейкозе. Лечение онкогематологических заболеваний с помощью цитоста­тических препаратов, стероидов, рентгеновского облучения может выз­вать существенное снижение уровня иммуноглобулинов.

6.3.2. Изучение клеточного звена иммунитета.

Для оценки клеточного иммунитета применяется набор иммунологических тестов, среди которых наибольшее расп­ространение получили: 1)определение гиперчувствительности замедленного типа с по­мощью кожных проб; 2)изучение пролиферативной активности лимфоцитов;3) количественная оценка популяций и субпопуляций лимфоцитов;4)определение уровня секретируемых цитокинов; 5)реакция торможения миграции лейкоцитов.

6.3.2.1. Кожные тесты.

Кожные тесты являются аналогом туберкулиновых проб. Так как эти реакции опосредуются Т-лимфоцитами, то в качестве антигенов вы­бираются только Т-зависимые антигены, например, вирус свинки, очи­щенный туберкулин, кандидозный антиген, дифтерийный или столбнячный анатоксин, антиген трихофитона, гемоцианин.

Указанные антигены вводятся внутрикожно, и учет реакции осу­ществляется по величине воспалительного очага через 24-48 часов. Кожный тест является интегральной реакцией, оцени­вающей несколько этапов иммунного ответа (распознавание антигена, хемотаксис, синтез цитокинов). Главным недостатком при проведении этого теста является трудность стандартизации воспалительной реак­ции.

Результаты оценки клеточного иммунитета с помощью кожных проб являются достаточно постоянными как у мужчин, так и у женщин в воз­расте от 16 до 65 лет. С возрастом клеточный иммунитет понижается, что проявляется снижением способности давать положительные реакции. Наблюдается корреляция между кожными пробами и повышенной заболеваемостью (инфекции, злокачест­венные опухоли) или смертностью в определенных группах больных. Поэтому кожные тесты можно рассматривать и как прогностические.

6.3.2.2. Определение пролиферативной активности лимфоцитов.

Определение пролиферативного ответа лимфоцитов периферической крови является важнейшим показателем функциональной активности этих клеток. В качестве Т-клеточных митогенов используются фитогемагг­лютинин (ФГА), конканавалин А (Кон А), В-клеточных - митоген лако­носа (МЛ), а также аллогенные клетки. В качестве специфических ан­тигенов применяются чаще всего РРD, кандидозные антигены, стрепто­киназа-стрептодорназа, дифтерийный и столбнячный анатоксины.

Некоторые Т-митогены реагируют с различными субпопуляциями Т-клеток: Кон А преимущественно активирует Т-супрес­соры, ФГА - Т-хелперы синтеза иммуноглобулинов. При оценке резуль­татов пролиферативного ответа на митогены следует учитывать, что эти агенты являются поликлональными стимуляторами, и положительный результат говорит о том, что регулирующие клетки в организме су­ществуют и могут давать ответ на соответствующий стимул.

В настоящее время для оценки пролиферативного ответа на Т-ми­тогены или аллоантигены используется только радиометрический метод с применением 3 H- и 14 С-меченного тимидина. Стимулированные лимфоциты инкубируются с изотопом в течение 6-24 часов с последующим осаж­дением клеток на специальных фильтрах и учетом реакции бластной трансформации с помощью жидкостных сцинтилляционных b-cчетчиков.

Эта реакция может быть ослаблена Т-клеточных дефицитах (атаксия-телеангиэктазия, генети­чески детерминированная аплазия тимуса - синдром Ди-Джорджи), онкогематологических заболеваниях, особенно в терминальной стадии, вторичных иммунодефицитах.

6.3.2.3. Количественная оценка популяций и субпопуляций лимфоцитов.

Изучение субпопуляций Т-клеток ранее проводилось с по­мощью реакции Е-розеткообразования, основанной на том, что одним из маркеров Т-лимфоцитов является поверхностный гликопротеин - Е-рецептор (в настоящее время обозначается как CD2), способный взаимодействовать с мембранной структурой эритроцитов барана (Е-розеткообразование) и с адгезионной молекулой LFA-3 на эритроцитах человека - ауто-ро­зеткообразование (ауто-РОК). Этот маркер появляется на мембране пред­шественников Т-лимфоцитов в тимусе и сохраняется на зрелых Т-лимфо­цитах в периферической циркуляции. Кластер CD2 обнаруживается на поверхности естественных киллеров (ЕК), лимфокинактивированных киллеров (LAK), имеющих морфологию больших гранулярных лимфоцитов, а также клеток нелимфоидного ряда. Таким образом, реакция Е-розеткообра­зования является показателем суммы перечисленных клеток, несущих антиген CD2. В связи с этим не рекомендуется использовать Е-розеткообразо­вание для идентификации Т-клеток.

Для оценки субпопуляций Т-лимфоцитов ранее использовался так­же теофиллиновый тест, который в настоящее время в связи с низкой специфичностью не применяется.

Развитие современной техники оценки различных субпопуляций лимфоцитов связано с: 1)разработкой и стандартизацией панели моноклональных антител (МАТ) к различным поверхностным дифференцировочным антигенам кле­ток; 2)появлением нового поколения проточно-цитометрического обору­дования; 3)совершенствованием компьютеризированных методов обработки данных.

В настоящее время с помощью МАТ идентифицировано более 165 по­верхностных антигенов лейкоцитов, опреде­лена их молекулярная масса, химическая структура, функция. Дифференцировочные лейкоцитарные антигены обозначаются как "CD" (кластер дифференцировки) и имеют номера, соответствующие хронологии их открытия. Выявляя поверхностные дифференцировочные маркеры, можно оп­ределить популяцию и субпопуляцию клеток, стадию их дифференцировки и активации, функциональную активность и взаимодействие с другими клетками.

Наиболее значимыми поверхностными маркерами являются: для оп­ределения зрелых Т-лимфоцитов - CD3, Т-хелперов/индукторов - CD4, Т-цитотоксических/супрессоров - CD8, естественных киллеров (NK) - СD16, CD56 и СD57, маркеров ранней активации - CD25, CD71, HLA-DR. Определение поверхностных иммуноглобулинов продолжает оставаться одним из главных методов идентификации В-лим­фоцитов. Надежным методом их определения является также выявление CD19, CD20 и CD22 с помощью МАТ.

Лучшим методом выявления поверхностных маркеров является проточная цитометрия, сущность которой заключается в определении гетерогенности популяций клеток по экспрессируемым маркерам клеточ­ной поверхности. В гематологической клинике основными задачами проточной цитометрии являются: 1)иммунофенотипирование лейкозов и лимфом; 2)анализ распределения клеточной популяции по фазам цикла (ДНК-цитометрия); 3)иммунофенотипирование лимфоцитов, оценка внутриклеточной продукции цитокинов различными клеточными популяциями; 4)анализ процессов активации и пролиферации клеток иммун­ной системы; 5)выявление и мониторинг минимальной остаточной болезни.

Иммунофенотипирование острых лейкозов.

Иммунофенотипирование острых лейкозов с помощью проточной цитометрии проводится в два этапа: сначала определяется разновидность лейкоза (В- или Т-острый лимфобластный лейкоз, острый миелоидный лейкоз), затем подварианты заболевания (В 1 -В 5 -варианты В-клеточного, Т 1 -Т 4 -варианты Т-клеточного острого лимфобластного лейкоза, М0-М7 варианты острого миелоидного лейкоза) - таблицы 6.3.1-6.3.4.

Таблица 6.3.1.

Панель маркеров для проведения первого этапа иммунофенотипирования.

Таблица 6.3.2.

Иммунологическая классификация В-линейных острых лимфобластных лейкозов.

Обозначения: cy - цитоплазматическая экспрессия антигена; s - поверхностная экспрессия антигена; +/- большинство позитивных случаев; + позитивный; - не­гативный.

Таблица 6.3.3.

Иммунологическая классификация T-линейных острых лимфобластных лейкозов.

Обозначения: cy - цитоплазматическая экспрессия; s - поверхност­ный;

+/- - большинство позитивных случаев; -/+ - большинство нега­тивных случаев; + - позитивный; - негативный.

Таблица 6.3.4.

Цитохимические, цитогенетические и иммунофенотипические свойства острых миелоидных лейкозов

Сокращения: Glyc.A - гликофорин; MП - миепероксидаза; СЭ - специфическая эстераза; НСЭ - неспецифическая эстераза.

Определение уровня секретируемых цитокинов

Главным методическим подходом для определения способности Т-лимфоцитов и других клеток продуцировать цитокины является их ак­тивация различными стимуляторами: например, Т-клеток - Т-митогенами (ФГА, Кон А), макрофагов - липополисахаридом энтеробактерий с иден­тификацией в супернатантах соответствующих цитокинов. Для этих целей могут использоваться биологические (применение чувс­твительной к данному цитокину линии клеток), иммуноферментные и ра­диоиммунные методы. Наиболее перспективными являются иммунофермент­ные методы, основанные на применении моноклональных антител к двум различным эпитопам цитокина.

Реакция торможения миграции лейкоцитов

Реация торможения миграции лейкоцитов (РТМЛ) основана на спо­собности Т-лимфоцитов, специфичных к данному антигену, при взаимо­действии с ним синтезировать совокупность цитокинов, ак­тивирующих фагоцитарные клетки. Одним из проявлений этого процесса является ингибиция миграционных свойств лейкоцитов. Данное свойство играет важную роль в защите организма от чужеродных аген­тов, так как способствует накоплению фагоцитарных клеток в воспали­тельном очаге. Определение фактора, ингибицирующего миграцию (MIF), оказалось ценным тестом для оценки функциональной активности Т-лим­фоцитови и специфической сенсибилизации. В связи с развитием учения о цитокинах стало ясно, что именно они осуществляют актива­цию и ингибицию движения фагоцитарных клеток, причем главным дейс­твующим фактором в этой активации является g-интерферон. РТМЛ можно использовать для оценки как интенсивности хемотаксиса (миграционной способности) лейкоцитов при различных заболеваниях иммунной системы, так и для выявления клеточного иммунитета к различным антигенам и аутоантигенам.

Исследование функции фагоцитирующих клеток.

Процесс фагоцитоза состоит из ряда последовательных и взаимос­вязанных стадий. К ним относятся подвижность, хемотаксис, адгезия, поглощение, дегрануляция, образование активных форм кислорода и азота, киллинг и расщепление объекта фагоцитоза.

Определение хемотаксиса лейкоцитов проводят методом миграции в микрофильтрационных камерах или в агарозном геле под влиянием различных хемотаксических факторов (хемоатт­рактантов), к которым относятся некоторые N-формилпептиды бактери­ального просхождения, компоненты комплемента (С3a и С5a), лейкотри­ены, тромбоцитактивирующий фактор, ИЛ-8 и т.д. Все эти ве­щества могут накапливаться в воспалительном очаге и оказывать влия­ние на движение фагоцитов.

Изучение синтеза и экспрессии адгезионных молекул.

За адгезивные свойства нейтрофилов и моноцитов отвечают их по­верхностные рецепторы, называемые селектинами и интегринами. С по­мощью селектинов фагоциты “катаются” по поверхности эндотелиальных клеток перед их твердым прикреплением с помощью интегринов к этой поверхности.

А. Исследование гуморального иммунитета

1. Определение числа B-лимфоцитов. На клеточной мембране лимфоцитов находится множество гликопротеидов, которые можно обнаружить при проточной цитофлюориметрии с помощью моноклональных антител. Некоторые из этих гликопротеидов специфичны для определенного типа клеток, например T-, B- и NK-лимфоцитов, разных субпопуляций T-лимфоцитов, моноцитов, и даже для определенных стадий их созревания и дифференцировки. Эти молекулы принято обозначать CD. В настоящее время определены функции многих CD (см. табл. 18.8). При оценке результатов исследования необходимо учитывать возраст больного. Кроме того, необходимо постоянно контролировать качество реактивов и соблюдение методики, поскольку даже незначительное ее нарушение искажает результаты исследования. Определение B-лимфоцитов с помощью проточной цитофлюориметрии основано на выявлении иммуноглобулинов, фиксированных на поверхности клеток, CD19 и CD20 (см. табл. 18.8). У детей старшего возраста и взрослых B-лимфоциты составляют 10-20% всех лимфоцитов крови, у детей младшего возраста их больше.

2. Определение титра антител. При подозрении на недостаточность гуморального иммунитета оценивают титр антител к белковым и полисахаридным антигенам. Обычно их определяют после вакцинации или инфекции.

а. Антитела к белковым антигенам. В большинстве случаев исследуют IgG к дифтерийному и столбнячному анатоксинам до и спустя 2-4 нед после вакцинации АКДС или АДС. Поскольку почти все взрослые вакцинированы АКДС, уровень антител после ревакцинации служит показателем вторичного иммунного ответа. Можно определить также антитела к антигену PRP после введения вакцины против Haemophilus influenzae типа B. Хотя этот антиген представляет собой полисахарид, в конъюгированной вакцине он действует как белковый антиген. Иногда исследуют антитела после иммунизации инактивированной вакциной против полиомиелита и рекомбинантной вакциной против гепатита B. При подозрении на иммунодефицит живые вирусные вакцины противопоказаны.

б. Антитела к полисахаридным антигенам. Для оценки гуморального иммунного ответа на полисахаридные антигены применяются пневмококковая и менингококковая вакцины, не содержащие белковых носителей. Титр антител определяют до и спустя 3-4 нед после вакцинации. В некоторых исследовательских лабораториях для этих целей используют неконъюгированную вакцину против Haemophilus influenzae типа B. Результаты оценивают с учетом возраста больного. Так, у детей младше 2 лет иммунный ответ на полисахаридные антигены слабый, у некоторых детей он остается таковым вплоть до 5 лет. В связи с этим применение полисахаридных вакцин у детей младшего возраста нецелесообразно и даже противопоказано, поскольку может привести к иммунологической толерантности и неэффективности ревакцинации в более старшем возрасте.

в. Оценка первичного и вторичного гуморального иммунного ответа. Для определения клиренса антигена, уровня IgM (при первичном иммунном ответе) и IgG (при вторичном иммунном ответе) в качестве белкового антигена используют бактериофаг фихи 174 - бактериальный вирус, безопасный для человека. Для оценки первичного гуморального иммунного ответа применяют также гемоцианин брюхоногих моллюсков, рекомбинантную вакцину против гепатита B, мономерный флагеллин, вакцину против клещевого энцефалита.

г. Естественные антитела (изогемагглютинины, антитела к стрептолизину O, гетерофильные антитела, например антитела к эритроцитам барана) в норме присутствуют в сыворотке почти всех людей. Это объясняется тем, что антигены, против которых направлены эти антитела, широко распространены и содержатся в пищевых продуктах, вдыхаемых частицах, микрофлоре дыхательных путей.

3. Определение подклассов IgG. Если при рецидивирующих бактериальных инфекциях дыхательных путей общий уровень IgG в норме или незначительно снижен или выявляется изолированный дефицит IgA, показано определение подклассов IgG. При этом можно обнаружить дефицит IgG 2 (IgG 2 составляет около 20% IgG), который может быть изолированным или сочетаться с дефицитом IgA или IgG 4 . Следует помнить, что функциональная оценка гуморального иммунного ответа - более информативный метод исследования, чем количественное определение подклассов IgG. Так, при нормальном уровне IgG 2 часто бывает снижен уровень антител к полисахаридным антигенам Streptococcus pneumoniae. Наряду с этим возможен врожденный дефицит IgG 2 , обусловленный нарушением синтеза тяжелых цепей, в отсутствие каких-либо клинических проявлений иммунодефицита.

4. Определение IgA. Изолированный дефицит секреторного IgA при нормальном уровне IgA в сыворотке встречается редко. Как правило, наблюдается одновременный дефицит секреторного и сывороточного IgA. Изолированный дефицит IgA клинически не проявляется или сопровождается легкими инфекциями верхних дыхательных путей. Это обусловлено тем, что при дефиците IgA компенсаторно повышается уровень IgG в сыворотке и IgM в секрете слизистых. Уровень IgA измеряют в слезе, слюне и других биологических жидкостях. Существует два подкласса IgA - IgA 1 и IgA 2 . В крови и секрете дыхательных путей преобладает IgA 1 , в секретах ЖКТ - IgA 2 . Нормальные показатели уровней IgA 1 и IgA 2 .

5. Синтез иммуноглобулинов in vitro. Это исследование позволяет оценить выработку IgM, IgG и IgA стимулированными B-лимфоцитами. Смешивая обработанные разными стимуляторами T- и B-лимфоциты здоровых и больных, можно оценить функцию T-хелперов и B-лимфоцитов. В большинстве случаев дефицит антител обусловлен нарушением дифференцировки B-лимфоцитов в плазматические клетки.

6. Биопсию лимфоузлов при подозрении на первичный иммунодефицит, как правило, не производят. Она показана лишь в тех случаях, когда диагноз неясен и у больного увеличены лимфоузлы, что требует исключения гемобластоза. Биопсию обычно производят через 5-7 сут после антигенной стимуляции. Антиген вводят в область, лимфа от которой оттекает в группу лимфоузлов, один из которых подлежит биопсии. При недостаточности гуморального иммунитета в лимфоузле снижено число плазматических клеток, количество первичных фолликулов увеличено, вторичные фолликулы отсутствуют, толщина коркового вещества уменьшена, наблюдается перестройка ткани лимфоузла, иногда увеличивается число макрофагов и дендритных клеток.

Количественное содержание иммуноглобулинов (IgА, IgМ, IgG) является основным показателем гуморального иммунного ответа и необходимо для оценки функциональной полноценности иммунной системы и диагностики патологических нарушений ее работы.

Определение уровня иммуноглобулинов является важным при диагностическом и клиническом мониторинге первичных иммунодефицитов, моноклональных гаммапатий, аутоиммунных заболеваний и других патологических состояний (Х-сцепленной агаммаглобулинемии, гипер-IgM, селективном IgА-дефиците, дефиците субклассов IgG, транзиторной гипогаммаглобулинемии новорожденных и др.). При первичных иммунодефицитах определение иммуноглобулинов имеет решающее диагностическое значение.

Снижение концентрации может свидетельствовать о различных патологиях – от генетических дефектов синтеза иммуноглобулинов до транзиторных состояний, связанных с потерей белка организмом . Причинами снижение синтеза иммуноглобулинов могут быть:

• моноклональные гаммапатии,
• термические ожоги,
• злокачественные лимфомы,
• плазмоцитомы,
• болезни Ходжкина,
• заболевания почек,
• первичные и вторичные иммунодефициты.

При первичном контакте с антигеном сначала синтезируются IgM, затем IgG. При повторном – IgG синтезируются быстрее и в большем количестве. IgА нейтрализует вирусы и бактериальные токсины. Повышение концентраций говорит о наличии аллергических, аутоиммунных процессов, характерно для инфекционных заболеваний . Увеличение Ig разных классов отмечают при различных патологических ситуациях. Концентрация IgM возрастает в острый период и при обострении хронической инфекции, IgG – в стадии разрешения или формирования хронической инфекции, IgА – при некоторых вирусных инфекциях.

Метод исследования : ИФА, иммунотурбидиметрия, иммунонефелометрия.

Условия взятия и хранения образца : Сыворотка крови. Хранение не более 24 ч при 4–8 °С. Допускается однократное замораживание образца.

Система комплемента – комплекс белков, постоянно присутствующих в крови. Это каскадная система протеолитических ферментов, способных лизировать клетки, предназначенная для гуморальной защиты организма от действия чужеродных агентов, участвует в реализации иммунного ответа организма. Является важным компонентом как врожденного, так и приобретенного иммунитета. Она активизируется реакцией антиген-антитело и необходима для опосредованного антителами иммунного гемолиза и бактериолиза, играет важную роль при фагоцитозе, опсонизации, хемотаксисе и иммунном гемолизе и необходима для усиления эффекта взаимодействия между специфическими антителами и антигеном.

Одной из причин снижения факторов комплемента в сыворотке крови могут являться аутоантитела, направленные против факторов комплемента. Снижение С3 и С4 компонентов комплемента сопровождается клинической картиной рецидивирующего кожного геморрагического васкулита и артралгией.

Уровень компонентов комплемента в крови варьирует в широких пределах. Наследственный дефицит компонентов комплемента или их ингибиторов может приводить к аутоиммунным нарушениям, повторным бактериальным инфекциям, хроническим воспалительным состояниям.

С3-компонент комплемента – центральный компонент системы, белок острой фазы воспаления. Это важнейшая часть защитной системы против инфекций. Он образуется в печени, макрофагах, фибробластах, лимфоидной ткани и коже. Вследствие активации С3 выделяется гистамин из тучных клеток и тромбоцитов, хемотаксис лейкоцитов и соединение антител с антигеном, поддерживается фагоцитоз, усиливается проницаемость стенок сосудов и сокращение гладкой мускулатуры. Активация С3 играет важную роль в развитии аутоиммунных заболеваний.

С4-компонент комплемента – гликопротеин, синтезируется в легких и в костной ткани. С4 поддерживает фагоцитоз, увеличивает проницаемость стенки сосудов, участвует в нейтрализации вирусов. Он участвует только в классическом пути активации системы комплемента. Увеличение или уменьшение содержания комплемента в организме наблюдается при многих заболеваниях.

Показания к исследованию:

• подозрение на врожденный дефицит комплемента, аутоиммунные заболевания, острые и хронические бактериальные и вирусные инфекции, (особенно рецидивирующие), онкологические заболевания;
• динамическое наблюдение больных с системными аутоиммунными заболеваниями.

Снижение концентрации С3 -наблюдается при врожденных дефектах комплемента, различных воспалительных и инфекционных, аутоиммунных заболеваниях, длительном голодании, при лечении цитостатиками, ионизирующем излучении.

Повышение концентрации С4 характерно для реакции острой фазы, отмечается при аутоиммунных заболеваниях, назначении некоторых лекарственных препаратов.

Снижение концентрации С4 – отмечается при врожденных дефектах системы комплемента (С4 дефицит новорожденных), некоторых аутоиммунных заболеваниях, системных васкулитах, синдроме Шегрена, трансплантации почек.

Циркулирующие иммунные комплексы в крови (ЦИК) – показатель развития различных воспалительных процессов в организме и активности их течения. Повышение ЦИК наблюдается при острых и хронических инфекциях, аутоиммунных заболеваниях, вирусных гепатитах. ЦИК присутствуют у многих людей, страдающих СКВ и РА, особенно в тех случаях, когда есть осложнения в виде васкулитов. Существует положительная корреляция между активностью заболевания и уровнем ЦИК в крови. Формирование ЦИК представляет собой физиологический механизм защиты, приводящий к быстрому устранению либо эндогенных, либо экзогенных антигенов через ретикуло-эндотелиальную систему. Однако ЦИК обладают способностью связывать и активировать комплемент, что ведет к повреждению ткани. Выходя из кровотока в мелких сосудах, они могут откладываться в тканях, в гломерулах почек, в легких, коже, суставах, стенках сосудов. Клинически это часто проявляется гломерулонефритами, артритами, нейтропениями. Высокий уровень ЦИК в сыворотке крови и/или в других биологических жидкостях наблюдается при многих воспалительных и злокачественных заболеваниях, что может стать причиной развития патологии .

Определение ЦИК в сыворотке крови – важный маркер для оценки активности заболевания, особенно при аутоиммунных заболеваниях. Снижение концентрации ЦИК в течение заболевания или при лечении свидетельствует об угасании воспалительного процесса и эффективности терапии.

У человека два типа иммунитета — клеточный и гуморальный иммунитет. Оба вида иммунитета исполняют разные функции, однако плотно связаны между собою. Поэтому разделение обоих видов относительное. Гуморальный иммунитет – способность исключить инфицирования благодаря антителам. Они присутствуют в плазме крови, слизистой органов зрения, слюне.

Этот вид иммунитета вырабатывается в утробе матери, переходит плоду через плаценту. Антитела поступают ребенку уже в течение первых месяцев жизни через молоко матери. Молоко оберегает ребенка от интенсивного влияния множественных типов микробов и микроорганизмов. Вскармливание грудью – ключевое обстоятельство развития иммунной системы малыша.

Производится защитная функция организма от инфекционных заболеваний таким образом: Когда запоминается антиген при конкретном заболевании. Если инфекция вновь попадет в организм, то антитела узнают ее и истребляют патогенные организмы. Во время прививок вводится препарат, чтобы в дальнейшем узнать антиген и поглотить его.

Гуморальный и клеточный иммунитет: особенности функций

Иммунитет клеточный оберегает от вирусных болезней, вызванных патогенными грибами, опухолей. Непосредственно этот вид берет участие в отторжении различных чужеродных тканей, аллергических откликов и производится фагоцитами. Эти клетки оберегают организм методом поглощения (фагоцитоза) чужеродных веществ, частиц, микроорганизмов. В крови присутствуют в большей мере гранулоциты и моноциты.

Первые считаются разновидностью лейкоцитов, обеспечивают защитные силы организма. Они первыми замечают воспалительный процесс.

Вторая разновидность лейкоцитов относится к крупным кровяным клеткам. Моноциты защищают от вирусов и инфекций, поглощают сгустки крови, оберегают от формирования тромбоза, борется с опухолями. Для иммунной защиты нужен процесс фагоцитоза (поглощения), когда чужеродное вещество поглощается фагоцитами.

Оба иммунитета не могут существовать и функционировать один без другого. Разница их заключается в функциональности. Когда гуморальный иммунитет борется непосредственно с микроорганизмами, то клеточный с грибком, раком и различными микробами. Для нормальной работы иммунной системы важны 2 типа иммунитета.

Для увеличения защиты, следует постоянно пить витамины, вести здоровый образ жизни. Также снижение иммунитета характеризуется постоянными недосыпаниями и нагрузками на организм. В последних вариантах понадобиться принятие препаратов регулирующих иммунную систему. Иммунитет – один с факторов самочувствия. Когда не поддерживать деятельность иммунной системы в норме, то все микробы, инфекции будут атаковать организм постоянно.

Восстановление иммунитета

Для регенерации слабой иммунной защиты изначально необходимо выяснить первопричину сбоев. Нарушение конкретных звеньев иммунной системы считается источником определенных болезней. Слабое сопротивление организма инфекциям может также указывать на проблемы с иммунитетом. Лечение заболеваний снизивших иммунитет содействуют его быстрому восстановлению. К таким болезням относится диабет, а также хронические заболевания.

Изменение образа жизни считается одним из лучших способов в решении вопроса о том как повысить гуморальный иммунитет.

Метод охватывает:

• отказ от курения и алкоголя;
• соблюдение режима сна и бодрствования;
• занятие спортом и прогулки на свежем воздухе;
• закаливание организма;
• сбалансированное питание с витаминами.

Гуморальный иммунитет результативно возобновлять с помощью приема витаминов, средств народной медицины и специальных лекарств. Любые средства по восстановлению иммунной системы назначаются иммунологом в точной дозировке, по инструкции. Прием витаминов и минералов особенно полезно весной. Ягодные морсы, мед, шиповник, алоэ могут восстановить иммунитет.

Принятие лекарственных веществ и витаминов для повышения любого вида иммунитета не даст результатов, когда не обнаружен, не ликвидирован главный фактор его снижения. Фармацевтические средства выписывает доктор. Самолечение запрещено.

Механизм гуморального иммунитета

В базе реализации гуморального иммунитета находится механизм влияния веществ, истребляющих патогенные бактерии через кровь. Подобные элементы делят на группы – специфические (помогает Энджерикс) и неспецифические. К условиям неспецифической природы причисляют клетки врожденного иммунитета, что подавляют микроорганизмы.

К группе относят:

• Сыворотка крови;
• Секреты желез, подавляющих формирование бактерий;
• Фермент лизоцим. Антибактериальный агент уничтожает хим. взаимосвязи в структуре стены патогенных организмов;
• Муцин входит в железы выделяющие слюну. Это углеводы и белки, которые называют гликопротеинами. Необычный состав дает возможность главным гликопротеинам слизи охранять клеточные слоя от воздействия токсических веществ;
• Пропердин – белок сыворотки крови из группы глобулинов, отвечает за свертывание крови;
• Цитокины – небольшие пептидные сигнальные (управляющие) молекулы. Они передают сигналы между данными клетками. Выделяют пару групп, основной из которых считается интерфероны;
• Интерфероны (аутогенные гликопротеины)– вещества белковой природы, обладающие общими защитными свойствами. Если начинается воспалительный процесс они подают сигнал. Кроме этой способности они подавляют возбудителей болезней. Выделяют ряд видов аутогенных гликопротеинов. Альфа и Бета возникают при вирусном инфицировании, а Гамма образовывается благодаря клеткам иммунитета.

Стоить рассмотреть понятие система комплемента — белковые комплексы, которые исполняет функцию обезвреживания бактерий. Система комплемента включает до двадцати белков со своим порядковым номером (C1, C2, C3 и другие).

Иммунология

Специфический отклик – одиночный фактор. Например, в детстве ребенок переболел оспой. Будучи взрослым, он не будет больше болеть данным заболеванием, поскольку уже выработался иммунитет. Также это касается всех тех прививок, которые человеку сделали в раннем возрасте.

Неспецифическая форма предполагает многоцелевую защиту, врожденную, включая отклик организма на попадание в тело инфекции.

Гуморальный иммунный ответ — синтез антител В-клетками в ответ на появление в теле человека патогенных организмов. По мере развития гуморального иммунного ответа с этапа определения антигена до более интенсивной продукции антител совершаются 2 основных действия:

• переход синтеза антител с одной разновидности в другую;
• увеличение прочности связывания активных зон антител с реакционноспособными группами антигена.

Местом формирования считаются фолликулы с дополнительной оболочкой либо места концентрации В-лимфоцитов в лимфоидной ткани. На периферии фолликул происходит определение антигена. В процесс вступает субпопуляция Т-лимфоцитов, оказывающая помощь в продукции антител. В-лимфоциты приступают усиленно делиться.

Совершается переключение иммуноглобулиновых генов, увеличивается число вероятных мутаций. На плоскости лимфоцитов возникают разные типы иммуноглобулинов класса G. В-клетки клонов в местах размножения, отбираются по признаку высокой степени сродства их рецепторов. Клетки, имеющие повышенную степень аффинности дифференцируются в:

• плазматические клетки;
• клетки, хранящие информацию о ранее действовавших антигенах.

Участие образовавшихся антител выражается в 3 формах:

1. реакция нейтрализации микроорганизмов;
2. усиленная фагоцитарная активность;
3. активации комплекса сложных белков.

Возбудители болезней в ходе существования в организме хозяина попадают во внеклеточную среду. Присутствие в жидкостях организма бывает долгим (если говорить о внеклеточных патогенных бактериях) либо меньшим, когда организм поражен внутриклеточными микроорганизмами.

При обычной иммунной деятельности возбудители инфекций, токсические вещества, присутствующие за пределами клеток хозяина, подвергаются воздействию таких иммуноглобулинов:

• Эффекторная молекула — молекула небольшая, концентрация которой регулирует активность молекулы белка;
• В-лимфоциты способны продуцировать антитела в двух формах — мембраносвязанной и секретируемой (растворимой).

Почему снижается иммунитет

Снижение работы иммунной системы имеет конкретные предпосылки, которые указывают на проблемы со здоровьем. Их относительно делят на ряд групп:

Неправильный образ жизни:

• скудное питание;
• болезненное состояние, возникающее при недостаточном поступлении в организм витаминов по сравнению с их расходованием;
• состояние, характеризующееся низким содержанием гемоглобина или красных кровяных клеток в крови;
• переизбыток либо недостаток физических нагрузок;
• нарушений режим сна;
• употребление спиртного, курение;
• плохая экология;
• отравление организма выбросами.

Иммунитет может понижаться по причине заболеваний:

• патологии кровеносной системы;
• диарея из-за нарушенного всасывания (нарушение пищеварительно-транспортной функции тонкой кишки);
• быстрое и резкое снижение функции почек и печени;
• самоотравление организма азотистыми соединениями, такими как мочевина, мочевая кислота, креатинин и индикан;
• ВИЧ-инфекция;
• иммунодефициты врожденного и полученного характера;
• онкологические заболевания;
• длительное антибактериальное лечение;
• химиотерапия;
• гельминты.

Не нужно заниматься самолечением, так как повышение иммунитета - дело не из простых. В связи с этим нужен медицинский контроль.

Комплексное исследование гуморального иммунитета

Иммунограмма – список характеристик, которые расшифровывают по результатам анализа крови. Таким образом, можно узнать о работе иммунной системы. Однако с процедурой невозможно узнать фактор заболевания. Выяснить, есть ли иммунитет к какому-то конкретному заболеванию, тоже не выйдет.

У иммунной системы непростой механизм. Поэтому характеристики оцениваются не лишь по числу, однако, по их соответствию и динамике. Как правило, в иммунограмме указываются последующие характеристики:

• Численность лимфоцитов;
• Т-лимфоциты (распознают антиген и сообщают В- лимфоцитам);
• Т-хелперы (главной функцией которых является усиление адаптивного иммунного ответа);
• Естественные киллеры (большие гранулярные лимфоциты, являющиеся частью врожденного иммунитета);
• В-лимфоциты (получив информацию, выделяют антитела);
• Уровень иммуноглобулинов истребляющих патогенные микроорганизмы;
• Маркер гибели клеток.

Захваченные антителами чужеродные элементы, что в скором времени должны раствориться. Когда их накапливается очень большое количество, то это критерий аутоиммунных болезней. То есть организм не распознает свои клетки, формирует антитела для атаки (повышенный уровень сахара в крови, поражение миелиновой оболочки нервных волокон головного и спинного мозга., воспалительное заболевание соединительной ткани суставов).

Содержание:

Что такое гуморальный иммунитет

Гуморальный иммунитет является системой защиты организма, обеспечиваемой за счет веществ межклеточной среды (антител, секретов желез, ферментов). В традиционной классификации иммунитета ему противопоставляется клеточный, однако подобное деление условно, поскольку работа этих механизмов тесно связана.

Принципы функционирования гуморального иммунитета

Гуморальный иммунитет требует присутствия веществ из двух категорий:

1. Неспецифические факторы иммунитета являются химическими соединениями, подавляющими развитие бактерий и вирусов. К ним относятся белки плазмы крови (интерфероны, маркеры), секреты эндокринных желез, некоторые ферменты (лизоцим).
2. Специфические факторы иммунитета представлены антителами. Они вырабатываются белыми клетками крови В-лимфоцитами и реагируют на определенные антигены – потенциально опасные инородные вещества и агенты.

Все биологически активные вещества работают в тесной связке с клетками крови, отвечающими за защиту тела человека от патогенных организмов.

Видео: Передача «Жить здорово!» о гуморальном типе иммунного ответа

Пути формирования антител в организме человека

Часть антител попадает в организм ребенка от матери во время внутриутробного развития. Они относятся к тем, что были созданы в процессе эволюции человека. Другая группа факторов поступает к малышу после его рождения с грудным молоком.

Самостоятельная выработка антител организмом человека происходит при знакомстве с новыми антигенами (например, при заболеваниях) и осуществляется неравномерно. На первые сутки их количество незначительно, затем оно волнообразно нарастает с пиком на 4 день, после чего так же постепенно спадает.

Инъекционное введение готовых антител возможно при острой необходимости во время болезни. Решение о проведении подобной процедуры принимается лечащим врачом на основании данных анализов и оценки тяжести состояния пациента.

Организм способен запоминать антигены. В этом случае при повторном их попадании он быстро справляется с болезнью. Именно эта особенность делает возможным применение вакцин.

Нарушения в работе механизма гуморального иммунного ответа

Работоспособность гуморального иммунитета затрагивает две группы патологий:

1. Нарушения функции непосредственно этой разновидности иммунитета вызываются врожденными патологиями механизмов выработки белков иммуноглобулинов, приводят к развитию синдромов, характеризующихся повышением чувствительности к определенным микроорганизмам или недостаточной активностью желез.
2. Сбои в функционировании иммунитета общего характера включают синдром неполноценных лимфоцитов, пороки развития и формирования тканей иммунной системы.

Неправильная или недостаточная работа иммунитета способна приводить к развитию серьезных заболеваний: различных типов аллергии, болезни Крона, атопического дерматита, колита, системной красной волчанки, ревматоидного артрита. Изучение работы звеньев иммунитета оценивается с помощью иммунограммы. Она представляет собой расширенный анализ крови с определением ряда показателей состава и активности лимфоцитов.

Показатели гуморального иммунитета

Для оценки работоспособности гуморальной составляющей иммунного ответа применяются данные, демонстрирующие содержание антител в сыворотке крови.

Показатели крови

Характеристика антител включает описание их роли в работе защитных сил организма, время выработки и другие свойства, позволяющие использовать данные иммунограммы для постановки диагноза и разработки схемы лечения:

Каждый тип иммуноглобулинов играет свою роль в обеспечении комплексной реакции организма на заражение.

Симптомы ослабления гуморального иммунитета

К внешним проявлениям недостаточности иммунитета относятся:

Снижение эффективности защитных сил организма выражается в симптоматике общего характера. Тесная связь в работе клеточного и гуморального механизмов мешает описывать эти признаки отдельно для каждого из них.

Принципы восстановления работоспособности иммунной системы

Для активации ослабленных защитных сил организма важно определить причину сбоев в их работе. Повреждение определенных звеньев иммунитета может приводить к конкретным заболеваниям со специфической симптоматикой или выражаться в общем снижении качества здоровья и уровня сопротивляемости инфекционным заболеваниям.

Компенсация или лечение болезней, негативно сказывающихся на работе гуморального иммунитета, автоматически способствует его скорейшему восстановлению без принятия дополнительных мер. К таким патологиям относится сахарный диабет , некоторые хронические заболевания.

Коррекция образа жизни также необходима для решения вопроса о поднятии показателей работоспособности иммунной системы. Она включает:

• избавление от вредных привычек;
• соблюдение режима сна и бодрствования, отдыха и работы;
• высокую двигательную активность и ежедневное пребывание на свежем воздухе;
• здоровый рацион.

Гуморальный иммунитет можно также эффективно восстанавливать посредством применения витаминно-минеральных комплексов, рецептов народной медицины и специализированных препаратов. Комплексные витамины и микроэлементы необходимо употреблять согласно инструкции, избегая передозировки. Курс приема особенно полезен в весенний период года.

Морсы из кислых северных ягод, мед, имбирь , шиповник, боярышник, алоэ и другие продукты служат адаптогенами и антисептиками мягкого действия. Настойки прополиса, эхинацеи , родиолы розовой, женьшеня являются эффективными средствами природного происхождения для восстановления защитных сил организма.

Предупреждение: Прием препаратов и витаминно-минеральных комплексов для поднятия любого типа иммунитета не будет эффективным в случае, когда не найдена и не устранена причина нарушения его работы.

Лекарственные препараты-иммуномодуляторы должны приниматься по назначению врача.