HIV-i immuunblotanalüüs. HIV-immunoblotanalüüs on positiivne. Miks võib ELISA test anda valepositiivseid tulemusi?

Immunoblotanalüüs (immunoblot) on ülispetsiifiline ja ülitundlik referentsmeetod, mis kinnitab diagnoosi patsientidele, kellel on saadud positiivsed või ebamäärased testitulemused, sh. kasutades RIGA või ELISA. Immunoblotanalüüs on heterogeense immuunanalüüsi tüüp.

See patogeeni üksikute antigeenide antikehade tuvastamise meetod põhineb ELISA läbiviimisel nitrotselluloosmembraanidel, millele kantakse spetsiifilised valgud eraldi ribadena, mis eraldatakse geelelektroforeesiga. Kui teatud antigeenide vastased antikehad on olemas, ilmub riba vastavasse lookusesse tume joon. Immunobloti unikaalsus seisneb selle kõrges teabesisalduses ja saadud tulemuste usaldusväärsuses.

Uuringu materjaliks on inimese seerum või plasma. Ühe riba uurimiseks on vaja 1,5-2 ml verd või 15-25 µl seerumit.

Laboratory Diagnostics LLC kasutab EUROIMMUNi (Saksamaa), MIKROGENi (Saksamaa) erinevate haiguste patogeenide antikehade tuvastamiseks immunoblotanalüüsi komplekte:

HSV 1 ja HSV 2 IgM/IgG(herpesviiruse infektsioon)

CMV IgM/IgG(tsütomegaloviiruse infektsioon)

Punetiste IgG

TORCH IgM profiil(toksoplasmoos, punetised, tsütomegaloviirus, HSV 1 ja HSV 2)

EBV IgMTIgG(Epsteini-Barri viirusinfektsioon)

HCV IgG(viiruslik C-hepatiit)

Kasutatakse kahte tüüpi komplekte - Western blot ja line blot.

Western blot: Komplektid sisaldavad testmembraani ribasid, millel on elektroforeetiliselt eraldatud vastavate nakkusetekitajate natiivsed antigeenid, st. antigeenid on järjestatud molekulmassi järgi. Membraanidele võib kanda ka 1-2 täiendavat joont kliiniliselt oluliste antigeenidega (Western line blot). See on usaldusväärne kinnitusmeetod, mis välistab valepositiivsed vastused ja ristreaktsioonid.

Line blot: Sel juhul kantakse testriba membraanidele kindlas järjekorras ainult kliiniliselt olulisi antigeene (natiivseid, sünteetilisi või rekombinantseid). Seda lähenemisviisi kasutatakse mitme infektsiooni diferentsiaaldiagnostikas ühel ribal.



Selle olemus seisneb uuritava aine molekulide ülekandmises ühelt biopolümeeride fraktsioneerimiseks kasutatavalt tahkelt kandjalt teisele, kus need identifitseeritakse spetsiifiliselt immunokeemilise reaktsiooni abil. Kaasaegne ülitundlik meetod seisneb valkude, sealhulgas viirusantigeenide tuvastamises. Meetod põhineb geelelektroforeesi ja antigeen-antikeha reaktsiooni kombinatsioonil. Kõrge eraldusvõime saavutatakse valkude, glüko- ja lipoproteiinide elektroforeetilise eraldamise ning immuunseerumite või monoklonaalsete antikehade tuvastamise maksimaalse spetsiifilisusega. Optimaalsetes tingimustes võib immunoblotanalüüs tuvastada antigeeni koguses, mis on väiksem kui 1 ng testitavas mahus. Tehniliselt viiakse immunoblotanalüüs läbi kolmes etapis:

1) analüüsitavad valgud eraldatakse polüakrüülamiidgeelis denatureerivate ainete juuresolekul: naatriumdodetsüülsulfaat või uurea, seda protsessi nimetatakse sageli SDS-PAGE-ks; eraldatud valke saab pärast värvimist visualiseerida ja võrrelda võrdlusproovidega;

2) eraldatud valgud kantakse geelist ülekattega (blotimisega) peale
nitrotselluloosfilter ja sellele kinnitatud; paljudel juhtudel, kuid
Valkude kvantitatiivsed suhted ei säili ülekande ajal alati;

3) filtritele paigaldatakse polü- või monoklonaalsed detektorid
radioisotoopi või ensüümi märgist sisaldavad antikehad; Sest
seotud antikehade tuvastamiseks kasutatakse ka liigivastast analüüsi
märgistatud seerum, teisisõnu blotimise viimases etapis
sarnane tahke faasi immuunanalüüsidele.

Tuleb meeles pidada, et selle immunoblotanalüüsi korral on valgud denatureeritud ja seetõttu ei pruugi natiivse valgu suhtes spetsiifilised antikehad neid ära tunda, kuid kõigi peptiidide koostises olevate seerumite juuresolekul võib kogu peptiidi antigeenne spekter. testitav valk tuvastatakse samaaegselt. Immunoblotimist kasutatakse üsna laialdaselt hepatiidiviiruste struktuuri uuringutes, eelkõige üksikute tüvede vahelise antigeense seose kindlakstegemiseks. Immunoblotanalüüsi kõrge eraldusvõime võimaldab saada häid tulemusi diagnostilises praktikas, kui on vaja tuvastada viirust patsiendi kudedes või väljaheidetes.

Sõltuvalt uuritavast ainest eristatakse DNA-d, RNA-d ja valku – blotanalüüs.

Antigeenide immunokeemilist tuvastamist saab läbi viia, kasutades märgisega konjugeeritud antikehi. Viimasel ajal on märgistusena laialdaselt kasutatud kas radioaktiivseid isotoope või ensüüme (peroksidaas, aluseline fosfataas, laktamaas jne).

Blotimise aeg difusiooni teel on 36-48 tundi.Kuid kiireim ja efektiivseim viis valkude ülekandmiseks geelidest on elektroblotanalüüs, mis võtab tavaliselt aega 1-3 tundi, mõne kõrgmolekulaarse valgu puhul kulub üle 12 tunni.

Sorbentide spetsiifiline valik blotide erinevate modifikatsioonide jaoks (nitrotselluloos või vastavalt töödeldud paber), blokeerimistingimuste valik ja antigeenide immunokeemiline tuvastamine sõltub täielikult antigeenist, selle kogusest, immuunanalüüsi meetodist ja uuringu eesmärkidest.

Võime tuvastada patogeeni spetsiifiliste antigeenide vastaseid antikehi võimaldab hinnata nende antikehade olulisust (spetsiifilisus antud etioloogilise aine suhtes) ja välistada reaktsiooni ristantigeenidele. See eristab immunoblotimist ELISA-st, kus antigeenina saab kasutada erinevaid antigeensete determinantide kombinatsioone – nii spetsiifilisi kui ka mitte, andes ristreaktsioonid teiste patogeenidega. Teisel juhul, kui ELISA-s saadakse positiivne tulemus, võib ainult eeldada, et see on ristreaktsiooni tagajärg, kuid immunoblotanalüüsi puhul on see otsustav.

Mitmel põhjusel on infoturbe meetod enim levinud kinnitustestina kasutamiseks sobiva meetodina.

Meetodi vaieldamatu eelis on võimalus testida nõrgalt või täielikult lahustumatute antigeenide antikehi ja kõrvaldada radioaktiivse märgise antigeenidesse viimise etapp.

Tundlikkust IB puhul hinnatakse geelile kantud maksimaalse antigeeni koguse järgi, mida saab valgu fraktsioneerimisel pärast geelist tahkesse faasi (nitrotselluloosi) viimist immunokeemiliselt tuvastada. Analüüsi üldine tundlikkus sõltub mitmest tegurist: antigeeni fraktsioneerimise ja immobiliseerimise tingimustest tahkel kandjal, taustatasemest, antikehade spetsiifilisusest ja afiinsusest. Oluline on kasutatava sildi tüüp ja selle tuvastamise meetod.

Seega võimaldab immunoblotanalüüs määrata antigeeni tsoone tahkel faasil, sidumata kogu valku spetsiifiliste seerumi antikehadega. Immunoblotimist ja selle modifikatsioone kasutatakse peamiselt bakterite ja viiruste antigeenide ja antikehade tüpiseerimiseks, eriti tavasüsteemide ebapiisava lahutusvõime korral, samuti immunoglobuliinide, nukleiinhapete analüüsimisel või kinnitustestina kombinatsioonis teiste meetoditega.

Ristlõike tulemuste tõlgendamine reaktsioonides ja serokonversiooni algfaasis on suuri raskusi. Esimeses olukorras ei tuvastata teatud aja möödudes korduva uuringu käigus antikehi, kuid teises immunoblotis tekivad uued ribad, mis näitavad HIV valkude või glükoproteiinide vastaste antikehade ilmnemist, iseloomustavad immuunreaktsiooni vastuse dünaamikat. viiruse antigeenid.

See on tegelikult seroloogiliste uuringute ahela lõplik kontrollimeetod, mis võimaldab teha lõpliku järelduse patsiendi HIV-positiivsuse kohta või selle tagasi lükata. IB teostamiseks kasutatakse nitrotselluloosi ribasid, millele kantakse eelnevalt molekulmasside suurendamise järjekorras horisontaalse ja seejärel vertikaalse immunoforeesi teel HIV valgud. Testitud seerumites olevad antikehad interakteeruvad valkudega riba teatud piirkondades. Reaktsiooni edasine kulg ei erine ELISA omast, st see hõlmab riba töötlemist konjugaadi ja kromogeen-substraadiga, sidumata komponentide mahapesemist ja reaktsiooni peatamist destilleeritud veega. Valkude esialgne elektroforeetiline eraldamine ja nende fikseerimine nitrotselluloosile võimaldab tuvastada spetsiifiliste valkude vastaseid antikehi vastavalt riba vastavate tsoonide värvumise (hallikassinise) olemasolule (või puudumisele). Immunoblotimist ei saa kasutada masssõeluuringuks selle kõrge hinna tõttu ja see on individuaalse arbitraaži meetod seroloogilise uuringu viimases etapis.

Seerumi testimise IB ja ELISA tulemuste vahel on üsna selge seos. ELISA-s (erinevates testisüsteemides) kaks korda positiivsed seerumid tõlgendatakse seejärel IB-s HIV-positiivsena 97–98% juhtudest. Seerumid, mis on ELISA-s positiivsed ainult ühes kahest kasutatud testisüsteemist, osutuvad IB-s HIV-positiivseteks mitte sagedamini kui 4% juhtudest. Kinnitusuuringute läbiviimisel võib umbes 5% IB-st anda nn "määramata" tulemusi, mis reeglina vastavad positiivsele ELISA-le, kuid mitte RIP-le. Ligikaudu 20% juhtudest on "määratlemata" IB-d põhjustatud HIV-1 gag-valkude vastastest antikehadest (p55, p25, p18). Kui saadakse küsitavad immunoblotanalüüsi tulemused, tuleb uuringut korrata 3 kuu pärast ja kui tulemus jääb ebaselgeks, siis 6 kuu pärast.

Radioimmunoanalüüs (RIM) (Radioimmunoassay, RIA) Radioimmunoanalüüs on meetod bioloogiliselt aktiivsete ainete (hormoonid, ensüümid, ravimid jne) kvantitatiivseks määramiseks bioloogilistes vedelikes, mis põhineb soovitud stabiilsete ja sarnaste radionukliididega märgistatud ainete konkureerival sidumisel spetsiifiliste sidumissüsteemidega. Viimased on enamasti spetsiifilised antikehad. Tänu sellele, et märgistatud antigeeni lisatakse kindlas koguses, on võimalik määrata, milline osa ainest on antikehadega seotud ja see osa, mis jääb tuvastatud märgistamata antigeeniga konkureerimise tulemusena sidumata. Uuring viiakse läbi in vitro. R. a. toota standardseid reaktiivide komplekte, millest igaüks on ette nähtud ühe aine kontsentratsiooni määramiseks. Uuring viiakse läbi mitmes etapis: bioloogiline materjal segatakse reagentidega, segu inkubeeritakse mitu tundi, eraldatakse vabad ja seotud radioaktiivsed ained, tehakse proovi radiomeetria ja arvutatakse tulemused. Meetod on ülitundlik, seda saab kasutada südame-veresoonkonna, endokriinsete ja muude süsteemide haiguste diagnoosimisel, viljatuse põhjuste, loote arenguhäirete väljaselgitamisel, onkoloogias kasvajamarkerite määramisel ja ravi efektiivsuse jälgimisel, immunoglobuliinide, ensüümide ja raviainete kontsentratsioon. Mõningatel juhtudel tehakse uuringuid stressifunktsionaalsete testide taustal (näiteks insuliinitaseme määramine vereseerumis glükoositaluvuse testi taustal) või dünaamikas (näiteks suguhormoonide määramine veres menstruaaltsükkel).

Kasutades ABBOTT - Austria II-I 125 kaubanduslikku komplekti, on võimalik tuvastada HBsAg kontsentratsioonides kuni 0,1 ng/ml. Meetodi eelisteks on võimalus standardiseerida ja automatiseerida meetodit digitaalsete vastuste saamisega. Meetodi puuduseks on radioaktiivse materjaliga töörežiimist tulenevad piirangud ja diagnostikakomplekti suhteliselt lühike säilivusaeg, mis on seotud radioaktiivse märgise lagunemisega.

Izotop (Taškent) ja mõned välismaised ettevõtted (näiteks ABBOTT) toodavad diagnostikakomplekte A-, B- ja D-hepatiidi viiruste erinevate antigeenide ja nende vastaste antikehade tuvastamiseks. Tahke faasina kasutatakse polüstüreenkuule (EBBOTT) või katseklaase (isotoop). Antikehade või antigeenide märgistamiseks kasutatakse kõige sagedamini isotoopi I 125, mille poolestusaeg on 60 päeva ja kõrge spetsiifiline radioaktiivsus. Radioaktiivse märgistusaine ehk kiirguse mõõtmine toimub spetsiaalsetel loenduritel - raadiospektromeetritel. Radioaktiivsete impulsside loendamine nii kontroll- kui ka uuritavates proovides viiakse läbi ühel kindlal ajal, tavaliselt 1 minuti jooksul. Reaktsioonitulemuste analüüsimisel tuleb arvestada taustradioaktiivsuse olemasoluga, mis võib mõjutada reaktsiooni lõpptulemust. Suurenenud fooni põhjused võivad olla: proovinõu või pesa saastumine; seadme valed sätted; tugeva kiirgusallika olemasolu seadme läheduses.

Proovide esmasel sõelumisel saadud positiivse tulemuse kinnitamiseks on soovitatav korrata testimist RIA-ga või alternatiivse testiga. Kui HBsAg tuvastatakse, tuleb teha kinnitustest.

Tabel 1. Vaktsiinide klassifikatsioon

Bibliograafia:

Kohustuslik:

1. Khaitov R.M., Ignatieva G.A., Sidorovitš I.G. Immunoloogia: Õpik.-M.: Meditsiin, 2000.- 432 lk.: ill (Õpik meditsiiniülikoolide üliõpilastele).

2. Kovaltšuk L.V. jt Immunoloogia: töötuba: õpik. käsiraamat – M.: GEOTAR-Media, 2012. – 176 lk.

3. Pozdejev O.K. Meditsiiniline mikrobioloogia / toim. akad. RAMS V.I. Pokrovski - M.: GEOTAR-Media, 2001. – 768 lk.

4. Borisov L.B. Mikrobioloogia praktiliste tundide juhend. M. 1997

Lisaks:

1. Genkel P.A., Mikrobioloogia viroloogia alustega. M., 1974

2. Korotyaev A.I., Babichev S.A. Meditsiiniline mikrobioloogia, immunoloogia ja viroloogia: mee õpik. ülikoolid – 3. väljaanne, muudetud. ja täiendav – Peterburi, SpetsLit. 2002. – 591 lk.

3. Borisov L.B., Smirnova A.M., Meditsiiniline mikrobioloogia, viroloogia, immunoloogia, M., Meditsiin. 1994. aasta

4. Timakov V.D., Levashov V.S., Borisov L.B. Mikrobioloogia. M. 1983

Kui mind testiti suguhaiguste suhtes, otsustasin end HIV-i suhtes testida. Järgmisel päeval sain valmis testid ifa peale HIV ja lõpuks avastati klamüüdia. Herpes ja mikroplasmoos. Kuid HIV ei tulnud kunagi. Helistatakse mulle 3 päeva pärast ja öeldakse, et peate tulema AIDSi keskusesse vere ülekandmiseks.Tegin immunobloti ja immunoblot näitas positiivset. Kas imunablot võib olla valepositiivne klamüüdia mikroplasmoosi HPV herpese suhtes

Woman.ru eksperdid

Uurige oma teema eksperdi arvamust

Anastasia Šesterikova
Rusina Irina Vladimirovna

Psühholoog, stressi leevendamine. Spetsialist saidilt b17.ru

Olga Jurievna Diganaeva

Psühholoog. Spetsialist saidilt b17.ru

Olga Borisenko

Psühholoog, gestaltterapeut. Spetsialist saidilt b17.ru

Dmitri Valerievich Tišakov

Psühholoog, juhendaja, süsteemne pereterapeut. Spetsialist saidilt b17.ru

Shiyan Olga Vasilievna

Psühholoog, psühholoog-konsultant. Spetsialist saidilt b17.ru

Oksana Lushankina

Psühholoog, peresuhted. Spetsialist saidilt b17.ru

Anna Daševskaja

Psühholoogi, Skype konsultatsioonid. Spetsialist saidilt b17.ru

Irina Bukina

Psühholoog. Spetsialist saidilt b17.ru

Aksenova Anna Mihhailovna

Psühholoog, grupianalüüsi kandidaat. Spetsialist saidilt b17.ru

Ma ei taha sind hirmutada, aga kui sind AIDSi keskusesse kutsutakse, on see peaaegu alati positiivne, ära võta seda uuesti, edu sulle, peaasi, et võtad teraapiat ja elad kaua

Üks sõber elab HIV-iga juba kümme aastat ja hoolitseb enda eest.
Nad ütlevad, et kolme aasta pärast võivad nad leida ravi.
Igal juhul ärge heitke meelt ja ärge levitage seda, hankige ravi

Ei, IB ei saa olla valepositiivne ja suguhaigused ei mõjuta seda testi; kui see on positiivne, siis paraku on teil HIV, peate jälgima oma immuunrakke ja alustama ravi õigeaegselt.

paraku ei ((kui teid kutsuti keskusesse, siis on see kindlasti HIV

Minu teada võivad esimesed ja isegi järgnevad immunobloti tulemused olla küsitavad. mitte valepositiivne, vaid pigem kahtlane. ja siis määratakse kordusanalüüs. Tsiteerin saidi teksti:
«Kõige sagedamini kasutatakse HIV-nakkuse diagnoosi kinnitamiseks immuunblotanalüüsi. WHO loeb positiivseteks seerumiteks, milles tuvastatakse immunoblotanalüüsiga antikehad mis tahes kahe HIV ümbrise valgu vastu. Nende soovituste kohaselt, kui reaktsioon toimub ainult ühe ümbrisvalguga (gp160, gp120, gp41) kombinatsioonis või ilma reaktsioonita teiste valkudega, peetakse tulemust kahtlaseks ja soovitatakse uuesti testida, kasutades komplekti teisest sarjast või mõnest teisest firmast. Kui ka pärast seda jääb tulemus kahtlane, jätkatakse uuringuid iga 3 kuu tagant.
võid googeldada. Kui jah, siis loodan, et teie HIV-positiivsust ei kinnitata. aga kui see kinnitust leiab, siis tea, et tänapäeval elavad inimesed selle diagnoosiga ja elavad sama kaua kui terved ning sünnitavad lapsi. Peamine tingimus on distsipliin ravis. tervist sulle!

Retroviirusevastane ravi Internetis

Kalkulaatorid

Sait on mõeldud meditsiini- ja farmaatsiatöötajatele vanuses 18+

Analüüsi selgitus - immunoblot

Palun aidake mul analüüsi dešifreerida
ENV(GP160)+
ENV(GP110/120)+
ENV(GP41)+
GAG(P55)+
GAG(P40)+
GAG(P25)+
POL(P68)+
POL(P52)+
POL(P34)+

Tere! 2,5 aastat tagasi tegin HIV-testi ja seal oli selline immunoblot:
Gp-160+, Gp-110/120+, Gp-41+, p17+, p25+, p31+, p34+, p52+, p55+, p68+. Ja siin on immunoblot 30.05.18: Gp-160+, Gp-41+, GAG 1 -, poll+, env2-. Kas pole selge, mida roll+ tähendab? Kas ta on seal ainuke või pole ta ennast avaldanud? Ja kuhu jäid ülejäänud oravad?

Pol ja Env on geenid, mis kodeerivad valkude rühmi. Pidage seda lihtsalt erinevaks salvestuseks. Küsimus on erinev. Mida me ootame? Miks me bloti kaalume? Kõik on üsna selge. Midagi on vaja ette võtta.

Olen juba harjunud sellega, et mul on HIV. Ja teraapiaks valmis.
Lihtsalt huvi kuulda teie arvamust. Kas see on hiljutine infektsioon või on mul midagi puudu? Või juhtub vahel, et immunoblot avaneb väga aeglaselt?

Täna vaatasin oma isiklikus toimikus olevaid teste (tehtud SC-s):
ELISA esimeses testimissüsteemis - positiivne
ELISA teises testimissüsteemis - negatiivne (kuidas see on?)

Järgmine on IB (tehtud in vitro ja SC kuu aega tagasi):
immunoblot esimesel katsesüsteemil: gp 160+, gp 41+
immunoblot teises testimissüsteemis: gp41+, p24+, p17+
immunoblot kolmandal testsüsteemil: gp160+, gp120+, gp41+, p24+

Minu prognooside järgi oleksin võinud nakatuda aasta tagasi (äge staadium oli kuskil aprillis), või 9 kuud tagasi, aga üldiselt ei tea millal) kasutasin alati kaitset ja seksisin ilma kondoomita vaid korra 2017. aasta sügisel.

Täna läbisin taas VN ja IS testid. Alustan teraga kuu aja pärast, kui tellimus tuleb.

Lisa mainitud testidele kuupäevad.

Esimene blot enne ELISA-d? Ei löö. Siin pole mingit mõtet, mis lubaks meil väita, et värske nakkus või vastupidi on väga tõenäoline.
See jääb saladuseks, kui te kogemata allikat ei leia ja seda ei võrdle.

Täpsustuseks siis

Viisin selle Invitrosse.
Esimene ELISA on 11. mail.
Seejärel blotiti sama seerum ja tuli positiivne test, kus tuvastati kaks valku.
gp 160+, gp 41+

Siis viisin selle uuesti SC-sse.
Andsin verd 29. mail.
Ja seal lasti ta läbi mitme testsüsteemi, kus esimene näitas negatiivset, teine ​​positiivset. Negatiivne ELISA on ikka naljakas.
Järgmisena läheb sama seerum bloti, kust andmed pärinevad:

Esimene katsesüsteem: gp41+, p24+, p17+
Teine testimissüsteem: gp160+, gp120+, gp41+, p24+

Aga see pole asja mõte.
Saabus uus IP analüüs - 754. See on julgustav. VN pole veel valmis. Niipea, kui see kohale jõuab, hakkan seda ilmselt juba hõõruma.

Olen 80% kindel, et nakkus juhtus aasta tagasi. Kuid asjaolu, et blot avaneb aeglaselt ja ELISA on negatiivne, on kummaline. Või jääb see normi piiridesse?

Negatiivne ELISA on ikka naljakas. Soovin, et teaksin süsteemi nime, et saaksin selle musta vihikusse kirjutada. Kuigi see hetk, kui te ei võta teooriat abieluga, soosib tugevalt varajast nakatumist.
Olen 80% kindel, et nakkus juhtus aasta tagasi. Blot on selle perioodi kohta üsna kehv. Mitte võimatu, aga ebatõenäoline.

Mingil hetkel hakkasin isegi kahtlema HIV-testide tulemustes - nii et ootan VN-i.
Siin on küsimuse viimane punkt.

Kas see, et IP kasvas kuu ajaga 200 koopiat ilma terata, on samuti normi piires? Võtan praegu Ursosanit sapipõie polüübi pärast – pakendi infolehel on kirjas, et ravim parandab immuunsust.

On vaja hinnata nii suhtelise sisuga kui ka võtta arvesse ühe labori andmeid ühe arvutusmeetodi abil. Sest jumal teab, mis CD4-ga toimub.

Üldiselt on CD4 780 rakku/μl. VN - 250 koopiat/ml.
Seda ilma teraapiata. See tähendab, et CD4 tõusis 486-lt kuu ajaga 780-ni.
VN langes 550-lt 250-le.

Siiski, kas see pole imelik või jäävad sellised hüpped normi piiridesse? Kas Terul on aeg alustada?)

Tere! Võtsin IFA-d kolm korda, iga kord +, SC-st tuli immunoblot p24+ p18+. Võimalik risk oli rohkem kui kuus kuud tagasi. p24 näitab, et see on ikka HIV?

Blot on kahtlane, korrake 6-8 nädala pärast. Tõenäoliselt valehäire.

Head päeva!
Saabusid testi tulemused, sealhulgas blot:

Ohtlik kontakt: 24.04.2018
HIV ELISA testi 23.05.2018 (4 nädalat ohtlikust kokkupuutest või 29 päeva) tulemus "+"
HIV ELISA testi 28.05.2018 (5 nädalat ohtlikust kokkupuutest või 34 päeva) "retake" tulemus
HIV ELISA test 01.06.2018 (5 nädalat ohtlikust kokkupuutest või 38 päeva) tulemus "+"

Blot saabus esimesest analüüsist (05.23.18):
GP160 sl.
P24 järg.

Uued testid tehti 06.06.2018 ELISA ja HIV RNA PCR kohalikus AIDSi keskuses. Ootame ikka tulemusi.

Küsimused bloti kohta:
1. Kui P24 on olemas, kas see on tingimata HIV antigeen või saab sellist valku tuvastada ka muude haiguste korral?
2. Mida tähendab lühend “sl” valgu kõrval? Tavaliselt sisaldavad kirjeldatud blotid + või –
3. Mis määrab bloti kasutuselevõtu? Kas see oleneb perioodist või organismi individuaalsetest omadustest?
4. Kas sellise plekiga 4. nädalal ohtlikust kontaktist on võimalus, et tegemist pole HIV-ga?

Ilusat päeva ja aitäh.

1. ei, see võib olla lihtsalt teistsuguse iseloomuga sarnane valk. 2. nõrk. need. kahtlane. 3. termineid ja rakendada individuaalseid omadusi, kuid keskmiselt on kõik väga lähedal. 4. Küsimus on vale, alati on võimalus kuni diagnoosi panemiseni.

Tere!
Palun aidake mul testitulemustes navigeerida ja mõista, kuidas õigesti käituda, et korduvad testid oleksid õiged.

Testid on tehtud 25. mail 2018. aastal
IB HIV
UUS LAV BLOT 1 - määratlemata. alates 29.05.2018
IB HIV-markerid
gp 160+
gp 120 —
gp 41 -
lk 55+
lk 40 —
p24+
lk 18 —
lk 68 —
lk 52 —
lk 34 —
HIV ELISA
ADVIA Centaur HIV Ag-Ab ELISA reaktiivsus 12,00 positiivne. (28.05.2018)
Analüüsi soovitatakse korrata 2 nädala pärast.

Novembris 2017 oli juriidiline registreerimine, mille järel tegin testid HIV Ag\Ab Combo Abbott Architect testisüsteemiga, siis oli tulemus negatiivne.

Samal ajal tegin üldise vereanalüüsi. Lümfotsüüdid on veidi tõusnud, eosinofiilid on täpselt 0 (aga mul oli varem sarnane eosinofiilide tase.

Põhiküsimus on:
Milliseid ravimeid võib selle kahe nädala jooksul võtta ja milliseid mitte? (Ma ei taha, et midagi "rikkuda")
Mul on perioodiliselt allergiahood, tavaliselt võtan Tavegili. Kas sellest tuleks loobuda?
Kas ma võin enne analüüsi võtta antibiootikume? (kui arst on määranud teiste infektsioonide ja haiguste raviks)

Immuunblotanalüüs HIV diagnoosimisel

Immunoblotanalüüs (immunoblot, Western blot, Western blot)— ühendab ensüümiga seotud immunosorbentanalüüsi (ELISA) viiruse antigeenide eelneva elektroforeetilise ülekandega nitrotselluloosribale (ribale).

Selles ilusas teaduslikus nimes tõlgitakse "blot" tõenäoliselt kui "blot" ja "western" kui "western" peegeldab selle "bloti" leviku suunda paberil vasakult paremale, st geograafilisel. kaart vastab suunale läänest itta. Immuunblot-meetodi olemus seisneb selles, et immunoensüümi reaktsioon viiakse läbi mitte antigeenide seguga, vaid HIV-antigeenidega, mis on eelnevalt immunoforeesi teel jaotatud fraktsioonideks, mis paiknevad molekulmassi järgi nitrotselluloosmembraani pinnal. Selle tulemusena jaotuvad peamised HIV-valgud, antigeensete determinantide kandjad, pinnale eraldi triipudena, mis ilmuvad ensüümiga seotud immunosorbendi reaktsiooni käigus.

Immunoblot sisaldab mitut etappi:

Riba ettevalmistamine. Immuunpuudulikkuse viirus (HIV), mis on eelnevalt puhastatud ja hävitatud selle koostisosadeks, allutatakse elektroforeesile ning HIV-i moodustavad antigeenid eraldatakse molekulmassi järgi. Seejärel kantakse blot-meetodil (analoogselt üleliigse tindi bloteerimispadjale väljapressimisega) antigeenid nitrotselluloosi ribale, mis sisaldab nüüd HIV-le iseloomulikku antigeeniribade spektrit, mis on endiselt silmale nähtamatu.

Näidisuuring. Uuritav materjal (patsiendi seerum, vereplasma jne) kantakse nitrotselluloosi ribale ja kui proovis on spetsiifilisi antikehi, seonduvad need rangelt vastavate (komplementaarsete) antigeensete ribadega. Järgnevate manipulatsioonide tulemusena selle interaktsiooni tulemus visualiseeritakse – tehakse nähtavaks.

Tulemuse tõlgendamine. Ribade olemasolu nitrotselluloosplaadi teatud piirkondades kinnitab rangelt määratletud HIV antigeenide vastaste antikehade olemasolu testitud seerumis.

Praegu on immunoblotanalüüs (immunoblot) peamine meetod viirusspetsiifiliste antikehade olemasolu kinnitamiseks uuritavas seerumis. Mõnel HIV-nakkuse korral tuvastatakse spetsiifilised antikehad enne serokonversiooni toimumist tõhusamalt immunoblotanalüüsiga kui ELISA-ga. Immunoblotanalüüsi meetodil uurides selgus, et kõige sagedamini avastatakse gp 41 vastaseid antikehi AIDS-i haigete seerumis ning ennetuslikel eesmärkidel uuritud inimestel p24 tuvastamine nõuab täiendavaid uuringuid, et teha kindlaks, kas neil on HIV-nakkus. Immunoblotanalüüsi testimissüsteemid, mis põhinevad geneetiliselt muundatud rekombinantsetel valkudel, on osutunud spetsiifilisemaks kui tavalised puhastatud viiruslüsaadil põhinevad süsteemid. Rekombinantse antigeeni kasutamisel ei moodustu mitte difuusne, vaid selgelt piiritletud kitsas antigeeniriba, mis on salvestamiseks ja hindamiseks kergesti ligipääsetav.

HIV-1-ga nakatunud isikute seerumitest ilmnevad antikehad järgmiste peamiste valkude ja glükoproteiinide vastu - struktuursed ümbrise valgud (env) - gp160, gp120, gp41; tuum (gag) - p17, p24, p55, samuti viiruse ensüümid (pol) - p31, p51, p66. Env-vastased antikehad on tüüpilised HIV-2 jaoks - gp140, gp105, gp36; gag - p16, p25, p56; pol - lk 68.

Reaktsiooni spetsiifilisuse kindlakstegemiseks vajalike laboratoorsete meetodite hulgas on enim tunnustatud HIV-1 ümbrisvalkude - gp41, gp120, gp160 ja HIV-2 - gp36, gp105, gp140 vastaste antikehade tuvastamine.

WHO loeb positiivseteks seerumiteks, milles tuvastatakse immunoblotimise teel antikehad mis tahes kahe HIV glükoproteiini vastu. Nende soovituste kohaselt, kui reaktsioon tekib ainult ühe ümbrisvalguga (gp 160, gp 120, gp 41) kombinatsioonis või ilma reaktsioonita teiste valkudega, peetakse tulemust kahtlaseks ja soovitatakse uuesti testida, kasutades komplekt mõnest teisest seeriast või mõnest teisest ettevõttest. Kui ka pärast seda jääb tulemus kahtlane, on soovitatav jälgida 6 kuud (uuring 3 kuu pärast).

Positiivse reaktsiooni olemasolu p24 antigeeniga võib viidata serokonversiooni perioodile, kuna selle valgu vastased antikehad ilmuvad mõnikord esimesena. Sel juhul soovitatakse olenevalt kliinilistest ja epidemioloogilistest andmetest uuringut korrata seerumiprooviga, mis on võetud vähemalt 2 nädalat hiljem ja just seda juhul, kui HIV-nakkuse korral on vajalik paariseerumite testimine.

Positiivsed reaktsioonid gag- ja pol-valkudega, ilma reaktsioonita env-valkudega, võivad peegeldada varajast serokonversiooni ja samuti viidata HIV-2 infektsioonile või mittespetsiifilisele reaktsioonile. Isikuid, kellel on need tulemused pärast HIV-2 testimist, testitakse uuesti 3 kuu pärast (6 kuu jooksul).

Küsimus: korduv HIV-test?

Mind uuriti sugulisel teel levivate infektsioonide suhtes (sümptomid puuduvad – tahtsin usaldust oma suhetes naisega). HIV-test oli positiivne. Järgmisena näitas ultraheli neerus kasvaja, mis eemaldati (selgus, et see on pahaloomuline).
Lugesin I. M. Sazonova raamatut, seal on kirjas, et pahaloomuline kasvaja võib anda HIV-testi positiivse tulemuse.
Kas see võib täpselt nii olla või pole midagi loota?

Peate läbi viima HIV-i kontrolltesti. Kui esimene HIV-test määrati ELISA abil, võib tulemus olla valepositiivne. Selle usaldusväärsust saab kontrollida tundlikuma diagnostilise meetodiga - PCR (polümeraasi ahelreaktsioon), mis tuvastab viiruse DNA veres.

Abi. 16.12.2010 ELISA (+) IB(+), seejärel 23.03.11 kuni 19.05.11 üheksa negatiivset ELISA (-) ja kvantitatiivne PCR. ei määrata. 2002. aastal on raseduse ajal ELISA kas (+) või (-), aga IB on alati (-). 2004-2008 tegin ELISA (-) 2 korda aastas, kuid 30.04.08 oli IFA (+) ja IB määramatu. siis jälle iga 2 kuu tagant tegin ELISA testi alati (-). ja alates detsembrist 2010 on üleval kirjas.Samas pole kunagi süstinud, abikaasal on alati ELISA (-). CD4 980 rakud. ja süüfilise vereproov 29.aprill andis 3+++.Ja siis kolm korda. negatiivne iga 10 päeva järel. hepatiit kõik (-). kas kellelgi on midagi sarnast olnud? Aitäh.

Palun täpsustage, kas teile on tehtud RIBT (treponema pallidum immobilisatsioonireaktsioon) ja kui jah, siis millised on selle uuringu tulemused.

ei, keegi ei soovitanud mul sellist analüüsi teha.Mida see näitab? Loodan, et saate aru, et ma rääkisin HIV-testidest. Aitäh. Kas teie praktikas on sarnaseid juhtumeid olnud? Muide, infoturve jäi 2008. aastal ebaselgeks, sest... seal oli p24/25 valku. aastal 2010 IB(+) valgud gp160.41.120 p24.17.31. siis kui IFA oli jälle 3 korda (-) saatsid mind 4. aprillil IB-sse. tulemus oli positiivne, kuid valgud gp 120 ja 41. ülejäänud on punase pastaga läbi kriipsutatud ja allpool punasega IB REPEAT. kuid PCR eitab sama arvu. Peale 4. aprilli tegin ELISA testi ja see lükati juba 4 korda tagasi. kõik kiiruskeskuses, sealhulgas antigeenide ja antikehade testid. Nüüd ootan korduvat IB-d ja kvaliteetset PCR-i. see on kõik. MÕTLEMISEST JA OOTAMISEST VÄGA VÄSINUD. Lootes parimat. AITÄH. Ootan TÕESTI teie vastust.

Kui esitate mõne küsimuse, proovige järgmine kord see konkreetsemalt sõnastada, täpsustades diagnoosi. RIBT-i kasutatakse süüfilise diagnoosi kinnitamiseks. HIV-nakkuse täpseks diagnoosimiseks määratakse HIV-i antikehad veres ELISA ja immunobloti abil. Diagnoos kinnitatakse ainult siis, kui mõlemad tulemused on positiivsed.

Vabandan küsimuse ebatäpse sõnastuse pärast. Kirjutasin, et detsembris tulid HIV-i ELISA ja Immunoblot testid positiivseks. kuid alates märtsist on IFA olnud HIV suhtes negatiivne 9 korda. Kui olin kiiruskeskuses registreeritud, siis kas see ka tegelikult juhtub? HIV on alati positiivne või negatiivne. ja kuidas saab immunoblotti kasutada, kui HIV ELISA tulemus on negatiivne? siis kõik eitavad ifa-d, peate kontrollima immunobloti, mis siis saab? Meie kiiruskeskus ei oska mulle midagi vastata. Nii et ma pöördusin teie poole. Aitäh.

Kahjuks võivad nii ELISA kui ka immunoblot anda valepositiivseid tulemusi. Seetõttu loetakse HIV-i diagnoosimine lõplikuks ainult HIV samaaegse tuvastamisega ELISA ja immunoblotmeetodi abil.

Tere Sain täna kvaliteetse PCR testi tulemused HIV suhtes - viirust ei tuvastatud ja HIV korduv immunoblot andis valgu 41 tõttu määramatuks.AIDSKESKUSES öeldi, et suure tõenäosusega HIV-d ei ole, kuid aastal minu kehas on kehad, mis on ehituselt sarnased HIV-ga. Aga mida te arvate, võttes arvesse minu 15. ja 16. juuni küsimusi (vt eespool), kas HIV on olemas või mitte? AITÄH.

Sel juhul on HIV-nakkuse diagnoos kaheldav.

Kirjutate, et ainult HIV samaaegsel tuvastamisel IFA ja immunobloti abil loetakse HIV-i diagnoos lõplikuks. Aga mis siis minu puhul? kõik eitavad ju PCR-i. ja blot ja ifa hüppavad kogu aeg ringi. 9 aastaks. Ütle mulle, kui viirus oli mu veres, siis selle RNA ja DNA saab nii paljude aastate pärast täpselt määrata. ja kas inkubatsiooniperiood või “aken” võib kesta nii palju aastaid? Kas sellisel ajavahemikul on HIV-i suhtes valenegatiivseid PCR-tulemusi? Jah, ma unustasin öelda, et HIV kiirtestid, mida ma SVH-s võtan, on alati negatiivsed või ei saa ka neile loota? Aitäh.

Sellisel juhul ei ole PCR-diagnostika peamine meetod protsessi dünaamika tuvastamiseks - seroloogilised meetodid on informatiivsemad. Sel juhul on valenegatiivsete tulemuste tõenäosus suur. HIV ekspresstestidel on kõrge tundlikkuslävi, mistõttu võivad need anda ka valenegatiivse tulemuse.

Vabandust. Kirjutasin selle kindlasti valesse kohta. palun vastake teemas HIV või mitte HIV. Aitäh.

Juhul, kui teie e-kirjale ei ole saadetud teadet vastuse saamise kohta, saate vastust oma küsimusele vaadata sellelt aadressilt http://tiensmed.ru/news/answers/vich-ili-ne-vich-. html

Tere! Palun öelge, kuidas LCD-s registreerida (olen hetkel 10 nädalat rase), tegin HIV testid, paar päeva tagasi helistas arst ja ütles, et HIV esialgsed testid on positiivsed (esimene tehti Kirovogradis, kuid ametlikku tulemust Kiievist veel pole ), tegime samal päeval meie linna laboris kaks kiirtesti Pharmaco firmalt CITO TEST HIV 1/2, mõlemad tulemused olid negatiivsed, laborant ütles, et need testid on usaldusväärsed ja ma ei pea muretsema, kuna see juhtub raseduse ajal ja need testid võivad lihtsalt segi minna. Arst käskis mul uuesti verd anda ja lasin veel kaks korda erinevates haiglates verd analüüsida (mul pole siiani ühtegi kolmest tulemusest). Olen väga mures, ma ei ole narkomaan, mul pole olnud küsitavaid seksuaalsuhteid ja isegi kui jään haigeks, haigestun väga harva, muud testid on kõik normaalsed. Kas kiirteste saab usaldada? Kas see juhtub tõesti raseduse ajal? Arst hirmutas mind liiga palju. Aitäh

Kõigepealt tuleb maha rahuneda ja mitte mõelda halvale. Mõnikord on raseduse ajal valepositiivseid tulemusi. Vajalik on uuesti HIV-i vereanalüüs teha ja oodata uuringu tulemusi.

Tere! Fakt on see, et 2 kuud tagasi oli mul seksuaalne kontakt ühe tüdrukuga (käime siiani). 1,5 nädala pärast tõusis temperatuur 37,4-ni. Varsti ta magas. Kindluse mõttes tegime IFA testi 2 nädala pärast ja 1,5 kuu pärast uuesti. Mõlemad vastused on eitavad. Kuid mul on endiselt palavik ja köha, muutuva paranemisega. Ütle mulle, palun, kas on oht? Lisaks töötasin pikka aega ilma puhkepäevadeta ja nädal tagasi olin haiguslehel (SARSiga). Vere- ja kopsuanalüüsid on normaalsed. Aitäh.

See temperatuur võib olla seotud viirushaigusega, keha ei ole veel taastunud või krooniline väsimus. Juhul, kui orgaaniline patoloogia on välistatud, üldine vere- ja uriinianalüüs on normi piires, samuti on normi piires fluorograafilise uuringu andmed, siis on vaja välistada sugulisel teel levivad haigused: klamüüdia, mükoplasmoos, ureaplasmoos, mis võivad põhjustada vaagna ja kusiti väikeste organite põletikku ning selle tagajärjel kehatemperatuuri tõusu. Kõrgenenud kehatemperatuuri põhjuste kohta loe lähemalt klikkides lingil: Kõrge temperatuur.

Tere. Siin on asi: rohkem kui aasta tagasi oli mul kaitsmata seksuaalkontakt tüdrukuga, kes kõndis ringi. Ta väitis, et ta pole haige, kuid ma ei saanud teda 100 protsenti usaldada. Ta kinnitas ka, et oli enne tööle kandideerimist läbinud tervisekontrolli (töötas müüjana) ja kõik on korras. 7 kuud peale kokkupuudet tegin ikkagi citylabi laboris HIV testi, tulemus oli negatiivne. Kuid viimasel ajal olen sageli haigestunud; mul on juba 3 nädalat punane, valulik kurk ja ma ei saa seda ravida. Hakkasin jälle kartma, mis siis, kui ma selle siis kinni püüan? Ütle mulle, kas see on võimalik ja kas me peaksime CityLabi analüüsi usaldama? Kardan uuesti testi teha, närvid ei pea vastu...

Kui tulemus on negatiivne, siis tõenäoliselt ei ole te haige ega HIV/AIDS-i nakatunud. Diagnoosi selgitamiseks on aga soovitatav teha teine ​​test riigiasutuste spetsialiseeritud laborites, see uuring viiakse läbi anonüümselt. Kui eneseravi ei anna soovitud tulemust, on soovitatav konsulteerida otolaringoloogiga, et viia läbi piisav uuring ja määrata sobiv ravi. Lisateavet HIV-testimise kohta saate artiklisarjast, klõpsates lingil: HIV.

Öelge mulle, kas saate anda mingeid citylabi labori omadusi? Siiski ei ole alati võimalik riigiasutuses testida lasta. Ja kui suur on protsentuaalne võimalus, et mees nakatub kaitsmata kontakti kaudu?

Kahjuks ei anna me laborite ja erameditsiiniasutuste võrdlevaid hinnanguid. Kui kahtlete tulemuste usaldusväärsuses, viige läbi uuring teises keskuses ja küsige esmalt nende meditsiiniteenuste osutamiseks luba, kas sellel keskusel on õigus seda uuringut läbi viia ja kas kõik vastab aktsepteeritud standarditele. Kaitsmata seksuaalvahekorra kaudu nakatumise oht on mõlema soo puhul ühesugune. Lisateavet HIV-testimise kohta saate artiklisarjast, klõpsates lingil: HIV.

Tere päevast Laps on 8-kuune, tehti HIV-test ELISA abil, verest leiti gp160+ ja p25+, ülejäänu on kõik negatiivne, järeldus kahtlane. Nende testide järgi otsustades selgub, et laps on +? gp160 + gp110/120 - p68 - p55 - p52 - gp41 - p34 - p25 + p18 -

Kahjuks ei saa saadud andmete põhjal 100-protsendilise tõenäosusega diagnoosi panna, kuna välistada ei saa valepositiivset tulemust. Täpse diagnoosi tegemiseks peate läbima mitmeid uuringuid, sealhulgas kordama seda analüüsi ELISA-meetodi abil, samuti tegema testi PCR-meetodi abil. Pärast seda peaksite pöörduma spetsialiseeritud meditsiiniasutuse poole, kus nakkushaiguste spetsialist saab saadud tulemusi igakülgselt hinnata. Lisateavet HIV-nakkuse ilmingute kohta saate meie veebisaidi temaatilisest jaotisest, klõpsates lingil: HIV

Kas see võib näidata valepositiivset tulemust ägedate hingamisteede infektsioonide või ägedamate nakkushaiguste korral? Kuskilt lugesin, et 58 või isegi kõrgema haiguse puhul võib “+” näidata, sh B-hepatiidi vastu vaktsineerimine, kui neerud on haiged vms?

Valepositiivse tulemuse võimalus on, seega soovitan teha järgmist: teha test uuesti - ELISA meetodil ja PCR meetodil ning seejärel uuesti infektsionisti külastada. Lisateavet HIV-nakkuse diagnoosimise kohta saate temaatilisest rubriigist: HIV

Tere päevast Immunoblot on p25 valgu tõttu määramatu. Kui suur on HIV-i nakatumise tõenäosus?

Sellises olukorras on vaja hoolikalt uurida uuringuprotokolle koos teiste näitajatega, kuna nende andmete põhjal pole võimalik eeldusi teha. Eeldatavasti võib tulemust pidada küsitavaks ja kordusuuring on vajalik 3 kuu pärast. Loe lähemalt meie kodulehe rubriigist: HIV

Tere päevast.
Kas saate HIV ELISA kohta kommenteerida?
1 seerum +3,559 k=13,3
+2,121 k=4,9
lk 24 neg
2 seerumit +3,696 k=13,9
+2,477 k=5,7

Antud juhul ei saa välistada valepositiivset tulemust, arvestades, et ELISA meetod on kaudne, seega soovitan end testida mõne muu tundlikuma meetodiga – immunoblotimisega. Täpsemat teavet selle probleemi kohta leiate meie veebisaidi vastavast jaotisest, klõpsates järgmisel lingil: HIV

Tere pärastlõunast, öelge mulle, millele häälestada? Aasta tagasi last planeerides tegime abikaasaga kõik testid, sh HIV (võeti väga tõsiselt ja õigesti), mind uuriti Kr.Rogis, abikaasa Kiievis, tema vastus oli eitav, mina olin. ütles, et mõni reagent ei töötanud, pean selle uuesti võtma Kiievi AIDSi keskuses. Keskuses testi teinud, tuli ka minu jaoks vastus negatiivne. Nüüd olen 14. nädala positsioonil st. Registreerin ja läbin kõik testid ja jälle tuli vastus tagasi HIV test oli määramatu, tegin kliinikus uuesti ja Doviris kiirtesti, et rahustada, aga nad ei rahustanud, kiirtest näitas positiivset tulemust (teine ​​rida oli vähem väljendunud), kohe pärast kogu seda protseduuri ei raisanud ma aega AIDSi keskusesse pöördumisele ja tegin ka testi ning ootan tulemust. (Ma ei suuda maha rahuneda) Öelge palun, kui palju saate kiirteste usaldada ja miks esimesel korral HIV-testile vastust ei tule? (mu abikaasa ja mina elame tervislikke eluviise ja armastame üksteist). Aitäh.

Paanikaks pole põhjust enne tähtaega – ekspressdiagnostika ei ole HIV-i diagnoosimise aluseks, see võimaldab tuvastada patsiendirühmad, kes vajavad põhjalikumat uurimistööd. Sellistes olukordades on soovitatav läbi viia immuunblotanalüüs ja konsulteerida isiklikult nakkushaiguste spetsialistiga. Täpsemat teavet selle probleemi kohta leiate meie veebisaidi temaatilisest jaotisest, klõpsates järgmisel lingil: HIV. Lisateavet saate ka meie veebisaidi järgmisest jaotisest: Laboratoorsed diagnostikad

Tere, olin nakkusosakonnas, just täna kirjutati välja minnes, arst helistas mulle ja selgitas, et mul on positiivne IFA, kõigepealt haiglasse sattudes oli negatiivne, siis uuesti testides sai positiivseks, saatsid Sokolniki mäele immunobloti testid, öeldi, et järgmisel nädalal saab valmis, olin kurguvalu ja paragripiviirustega haiglas, saabun šokiseisundis, siiani ei saa aru kuidas selle hindamiseks koostati ka minu kliiniku väljavõte, mis näitas, et ifa tuvastati ja alla selle töötab immunoblot, kui ma kirjutatakse homme teie kliinikusse, siis selles väljavõttes on kõik näidatud, kui tõenäoline on HIV kohal olla?Kas võib juhtuda, et kuna mind raviti paragripiviiruse kurguvalu vastu, näitas ifa positiivseid tulemusi?

Valepositiivse tulemuse tõenäosus on väga suur. Ühe positiivse tulemuse olemasolu ei anna veel alust HIV-diagnoosi seadmiseks, mistõttu soovitame oodata ära immunoblotanalüüsi tulemus ning seejärel isiklikult konsulteerida nakkusarstiga edasise uurimise ja vaatluse osas. Kurguvalu, paragripp ja muud külmetushaigused ei mõjuta oluliselt analüüsi tulemusi.

Ma tahan seda uskuda, aga augusti lõpus tundsin end halvasti, temperatuur tõusis, 37,5-38 oli umbes 4 päeva väljaheide lahti, see oli puhkusel, kus oli palju diskosid, jõin kraanivett nagu paljud teised, sest mis oli väga kallis, veeklaas maksis 300 rubla, sellise temperatuuriga lahtist väljaheidet seostasin mingi veest kinni jäänud soolepõletikuga, täpselt ei mäleta, aga väike lööve oli ka keha ülaosa, kui ma koju jõudsin temperatuuriga helistasin arstile, kirjutas ta rotaviirusnakkuse, pärast 5 päeva haigust lahkusin vabatahtlikult ja läksin tööle, kus paar päeva hiljem haigestusin põskkoopapõletikku (sel ajal oli mul töökohustuste tõttu vaja õues olla) Panin selle põhjuseks, et puhkusest ja mürgistusest tingitud suur temperatuurilangus langetas immuunsust ja seetõttu külmetusin uuesti põskkoopapõletikuga, nii et see on jälle haigusleht, kõrva-nina-kurguarsti juhiste järgi võtsin 10 päeva Klacid SR 500, see möödus, 3 nädala pärast läksin tagasi tööle, 3 päeva olin komandeeringus kuumal maal. Konditsioneerid transpordis ja hotellis olid halastamatud ja koju naastes oli lennukis temperatuur juba 39,5.Siin olen kodus soojaga 40, helistasin koju arstile, kirjutasin ägeda hingamisteede infektsiooni ja ütlesin oma kurk oli väga punane, mul on krooniline tonsilliit ja ütlesin kõrva-nina-kurguarstile, ise kirjutasin, et võtan antibiootikumi Levolet r. Kutsusin kiirabi, kuna mul oli palavik ja määr oli 40 ja ei langenud, haiglaravi nad ei pakkunud. järgmisel päeval sama lugu - kiirabi tegi palavikku alandava süsti ja lahkus.Kolmandal korral nõudsin haiglaravi, viidi vaevu ära nakkushaiglasse, kus tuvastati paragripi ja adenoviirusnakkuse seganakkus, aga väljakirjutamisel , arst-osakonnajuhataja ütles, et mul avastati HIV ifa positiivne ja nad tegid seda kaks korda, ma olen šokis, ma ei tea mida teha, ma ei saa süüa ega juua .ta ütles et Mul on selgelt äge HIV-nakkus ja kontrollimiseks saadeti mu vere immunoblotanalüüs AIDSi keskusesse.
Nüüd, tuues analoogia sündmustest, mis minuga eelmisel korral juhtusid, ja ka 3 haiguslehte järjest, proovisin kõiki sümptomeid ja olin kohkunud, mis võib olla, pärast samal päeval väljakirjutamist käisin invitro anonüümselt testimas ja järgmisel päeval oli IFA tulemus sama +
Vabandan sellise üksikasjaliku teabe pärast, aga ma olen segaduses ja tapetud, joon tugevaid rahusteid ja mul pole isu ja ma praktiliselt ei söö, olen palju kaalust alla võtnud
Mul on ka küsimus: haiglast väljakirjutatud arst näitas IFA poolt tuvastatud HIV tulemuse ja alla selle immunoblot on töös, aga kuidas ma panen oma kliinikus bl kinni kohas, kus kõik kirjas seal. Mida ma peaksin tegema? See ei ole enam konfidentsiaalne. Palusin raviarstil seda analüüsi väljavõttesse mitte kirjutada, mille kohta ta keeldus, kuivõrd austatakse minu õigusi teabe mitteavaldamisel?

Kahjuks sisalduvad väljavõttes haiglas läbiviidud uuringute tulemused, kuna kohalikul raviarstil peab olema täielik teave teie tervisliku seisundi kohta. Sellises olukorras me ei räägi teabe avaldamisest, kuna see edastatakse ainult teisele raviarstile, kes teid täiendavalt jälgib.

Tere! Tegin HIV testid, kuna vajasin FMS-i sertifikaati, paar nädalat ei andnud teste, siis kutsuti juhataja juurde ja andis positiivse tulemuse, võtsid hunniku kviitungeid ja saatsid. piirkondlikku AIDSi keskusesse edasiseks uurimiseks, nagu tunnistusel kirjas. Tahan võtta mõnes teises kliinikus ja siis piirkondlikku või pole mõtet uuesti võtta? Ma lihtsalt ei saa aru, miks nad nii kaua ei andnud, noh, arst ütles, et väidetavalt nad tegid mingi analüüsi ja väidetavalt olen neile veel 4 tuhat rubla võlgu, sest kui nad seda tegid, siis ilmselt lisaks tõendile annaksid nad üksikasjalikku teavet haiguse kohta?

Sellises olukorras ei tohiks te enne tähtaega paanikasse sattuda - ühe positiivse tulemuse saamine ei võimalda teil võimalikku nakatumist usaldusväärselt hinnata, kuna välistada ei saa valepositiivseid tulemusi. Soovitame testi uuesti teha ja positiivse tulemuse korral tuleb läbida uus uuring – immunoblotimine. Reeglina ei anna labor üksikasjalikku teavet tulemuste kohta, mis on tavaline ja tavaline praktika. Kõikidele teie küsimustele saab vastuse raviarst pärast läbivaatust isikliku konsultatsiooni käigus.

Unustasin lisada, et võtsin juuni algusest kuni septembri keskpaigani anaboolsete steroidide kuuri, nimelt Sustanon 250, testosteroonide ja stanozolooli segu primabolaaniga, tahtsin end suveks ja puhkuseks ette valmistada, kas need võivad maha lüüa minu immuunsus ja kõik, mis minuga juhtus.

Immuunsuse nõrgenemine ja autoimmuunhaiguste esinemine võivad anda HIV-testi valepositiivseid tulemusi. Seetõttu on ELISA-meetodil 2 positiivse tulemuse saamise korral soovitatav immunoblotanalüüs, mis võimaldab meil täpselt vastata küsimusele, kas nakkus on olemas või mitte.

Mida tähendab autoimmuunhaigused Mis need on?
Üldiselt võin öelda, et olin varasest lapsepõlvest peale üsna sageli haige ja isegi paar aastat tagasi palusin raviarstil oma immuunsuse eest hoolt kanda, kuna olin pidevalt väsinud ja haigestusin sageli, peamiselt kõrva, kurgu, nina. , kuid kogu aeg olid HIV-i suhtes negatiivsed tulemused, ma sain neist üsna kergelt läbi, kõhklemata.

HIV-testi valepositiivne tulemus võib ilmneda pärast hiljutist viirusnakkust, vaktsineerimist B-hepatiidi, tuberkuloosi, hepatiidi, herpese vastu, aga ka autoimmuunhaiguste, nagu reumatoidartriit, süsteemne erütematoosluupus, dermatomüosiit, skleroderma, sidekoe taustal. haigused jne.

Täiendan oma küsimusele, et mu immunoblot tuli tagasi negatiivseks, aga arst ütles, et kuna mul oli kaks IFA-d + kui olin nakkushaiglas, siis pean ikkagi testi uuesti tegema, aga natuke hiljem

Sel juhul on meditsiiniline taktika õigustatud - soovitame immunobloti uuesti teha 1,5-2 kuu pärast.

Kui suur on tõenäosus: 2 IFA + verevõtu vahe ca 2 päeva, immunoblot - ; Olin adenoviirusnakkuse ja paragripiga nakkushaiglas, kus võeti verd, saadeti immunoblot AIDSi keskusesse

Tere päevast Registreerisin end elamukompleksi, tegin kõik testid läbi, arst ütleb, et mul on veres herpes, siis helistatakse AIDS-i keskusest ja öeldakse, et pean uuesti testima, küsisin ja öeldi, et olen HIV-positiivne. , paanikas läksime abikaasaga uuesti testima Tegin testi ja sain IFA ja immunobloti + abikaasa sai ja kuu aja pärast uuesti. Mul on + mu abikaasa – ma olen nüüd 23 nädalat rase!

Sellises olukorras on kahjuks HIV-nakkuse võimalus, kuid lõplikku diagnoosi ei saa teha isegi positiivse immunoblotiga, arvestades rasedusseisundit. Sellises olukorras on vaja välistada valepositiivsed tulemused, mistõttu soovitame testi uuesti teha ja konsulteerida isiklikult infektsionistiga.

Kui immunoblot näitab HIV-i suhtes positiivset tulemust, kuid sõeluuring on negatiivne, siis millist tulemust peaksime uskuma?

Immunoblot on täpsem test, seetõttu peate selle uuringuga positiivse tulemuse korral jätkama uuringut ja külastama isiklikult nakkushaiguste spetsialisti.

Tema nimi on AIDS Vjatšeslav Zalmanovitš Tarantul

Immunoblotanalüüs - täiendav kaudne meetod

Lisaks ELISA-le kasutatakse HIV-nakkuse testimiseks teatud juhtudel protseduuri, mida nimetatakse "immunoblotimiseks" või "immuunblotimiseks" (mõnikord nimetatakse ka "Western blot"). Vastavalt WHO soovitustele kasutatakse immunoblotimist HIV-nakkuse diagnoosimisel täiendava ekspertmeetodina, mis peaks kinnitama ELISA tulemusi. Tavaliselt kontrollib see meetod ELISA positiivset tulemust veel kord, kuna seda peetakse tundlikumaks ja spetsiifilisemaks, kuigi keerulisemaks ja kallimaks. Kuid enne patsiendi kohta lõpliku otsuse allkirjastamist peab arst olema diagnoosi õigsuses täiesti kindel. Seetõttu ei saa keerukuse ja kõrge hinna küsimus siin olla määrav.

Nii oma eesmärgi kui ka teostusviisi poolest sobib hästi tuntud väljend “panna blotterile” immunoblotimiseks. Immunoblotanalüüs ühendab ensüümiga seotud immunosorbentanalüüsi (ELISA) viirusvalkude eelneva elektroforeetilise eraldamisega geelis ja nende ülekandmisega nitrotselluloosmembraanile (blotter). Immunoblot-protseduur koosneb mitmest etapist (joonis 27). Esiteks, HIV, mis on eelnevalt puhastatud ja hävitatud selle koostisosadeks, allutatakse elektroforeesile ning kõik viiruses sisalduvad antigeenid eraldatakse molekulmassi järgi. Seejärel kantakse blot-meetodil (analoogselt üleliigse tindi bloteerimispadjale väljapressimisega) antigeenid geelilt nitrotselluloos- või nailonfiltriribale, mis sisaldab nüüd HIV-le iseloomulikku ja silmale nähtamatut valkude spektrit. . Järgmisena kantakse ribale uuritav materjal (seerum, patsiendi vereplasma jne) ja kui proov sisaldab spetsiifilisi antikehi, seostuvad need neile täpselt vastavate antigeeni valgu ribadega. Järgnevate manipulatsioonide tulemusena (sarnaselt ELISA-ga) selle interaktsiooni tulemus visualiseeritakse – tehakse nähtavaks. Lõppkokkuvõttes kinnitab ribade olemasolu riba teatud piirkondades rangelt määratletud HIV-antigeenide vastaste antikehade olemasolu testitud seerumis.

Immunoblotimist kasutatakse kõige sagedamini HIV-nakkuse diagnoosi kinnitamiseks. WHO loeb positiivseteks seerumiteks, milles tuvastatakse immunoblotanalüüsiga antikehad mis tahes kahe HIV ümbrise valgu vastu. Nende soovituste kohaselt, kui reaktsioon tekib ainult ühe ümbrisvalguga (gp160, gp120, gp41) kombinatsioonis või ilma reaktsioonita teiste valkudega, peetakse tulemust kaheldavaks ja soovitatakse uuesti testida, kasutades komplekti erinevatest seeriatest või mõnest teisest ettevõttest. Et olla kindel, kui

Riis. 27. Immunoblotanalüüsi läbiviimiseks eraldatakse esimeses etapis vereseerumis sisalduvad valgud geelis vastavalt nende molekulmassile ja laengule elektrivälja abil (geelelektroforeesiga). Seejärel asetatakse geelile nitrotselluloos- või nailonmembraan ja “blotitakse” (see on bloteerimine). See viiakse läbi spetsiaalses kambris, mis võimaldab materjali täielikku ülekandmist geelist membraanile. Selle tulemusena reprodutseeritakse geelil olnud valgu paigutusmuster membraanil (blot), mida saab seejärel hõlpsasti manipuleerida. Esialgu töödeldakse membraani soovitud antigeeni vastaste antikehadega ja pärast seondumata materjali mahapesemist lisatakse radioaktiivselt märgistatud konjugaat, mis seondub spetsiifiliselt antikehadega (nagu ELISA puhul). Saadud antigeen-antikehaga märgistatud konjugaadi kompleksi asukoht määratakse autoradiograafia abil, kasutades röntgenfilmi. Pärast avaldumist selgub, kas veres on antigeene või mitte ning pärast jääb tulemus kahtlane, soovitav on jälgida kuuekuulist (uuringud jätkuvad iga kolme kuu tagant).

Praegu on Vene Föderatsioonis HIV-nakkuse diagnoosimiseks soovitatav kasutada viit testisüsteemi, mille hulgas on nii Venemaa kui ka välismaiseid.

Raamatust Anestesioloogia ja reanimatoloogia autor Marina Aleksandrovna Kolesnikova

Raamatust Meie keha veidrused. Meelelahutuslik anatoomia autor Stephen Juan

Raamatust Esmaabi käsiraamat autor Nikolay Berg

Raamatust Kuidas 100% suitsetamisest loobuda ehk Armasta ennast ja muuda oma elu autor David Kipnis

Raamatust The Complete Guide to Nursing autor Jelena Jurievna Khramova

Raamatust Emergency Care Directory autor Jelena Jurievna Khramova

Raamatust KEISARILÕIK: turvaline väljapääs või oht tulevikule? autor Michelle Oden

autor Gary Griffin

Raamatust Kuidas suurendada mehe peenise suurust autor Gary Griffin

Raamatust Flatfoot. Kõige tõhusamad ravimeetodid autor Aleksandra Vassiljeva

Raamatust Ilu ja naiste tervis autor Vladislav Gennadievitš Lifljandski

Raamatust Jooga ja seksuaalsed praktikad autor Nick Douglas

Nakkushaiguste laboratoorse diagnostika praktikas tekib mõnikord vajadus määrata antikehi mitte patogeeni üldiselt, vaid teatud selle valkude (antigeenide) suhtes, see tähendab spetsiifiliste antikehade spektrit. Kui selleks kasutatakse ensüümseotud immunosorbentanalüüsi meetodit, siis sellisel juhul tuleb esmalt eraldada ja puhastada patogeeni kultuurist vajalikud antigeenid. Saadud valgud kantakse tahkele faasile eraldi. 96 süvendiga plaadi kasutamisel asetatakse igasse süvendisse ühte tüüpi antigeen. Seejärel määratakse spetsiifilised antikehad kaudse meetodiga.

Positiivse reaktsiooni olemasolul süvendis konkreetse antigeeniga saab hinnata vastavate spetsiifiliste antikehade olemasolu. Seda tüüpi immunoensüümide testimissüsteeme pakuvad tootmisettevõtted, kuid immunoblotanalüüsi meetod (Western blot) on muutunud laialt levinud tänu oma suuremale teabesisaldusele ja uuringu enda teostamise lihtsusele.

Immuunblotanalüüs võimaldab määrata vereseerumis üheaegselt ja diferentseeritult antikehi patogeeni kõigi diagnostiliselt oluliste valkude suhtes. Tõlge inglise keelest Western blot tähendab Westerni ülekannet (sõna-sõnalt - blotting). Selle ebatavalise termini ajalugu on järgmine.

1975. aastal pakkus teadlane nimega E. Southern esimest korda välja meetodi elektroforeetiliselt eraldatud DNA fragmentide ülekandmiseks geelist membraanile. Autori sõnul nimetati meetodit Southern blot, mis tõlkes tähendab "lõunasiiret". RNA molekulide ülekandmise meetodile andsid eksperdid omakorda hüüdnime Northern blot - "northern transfer". Algul naljana ja siis kinnistus see nimi ametlikus teaduskirjanduses.

1979. aastal avaldas G. Towbin valgublotanalüüsi esimeste katsete tulemused. Jätkates bioloogiliste makromolekulide ülekandemeetodite "geograafiliste" nimetuste traditsioone, hakati seda meetodit nimetama "Western" ülekandeks - Western blot.

Selle meetodi esimene samm hõlmab patogeensete valkude segu elektroforeetilist eraldamist polüakrüülamiidgeelis naatriumdodetsüülsulfaadi (SDS) juuresolekul. Pindaktiivse ainena ümbritseb SDS ühtlaselt valgumolekule ja annab neile kõigile ligikaudu võrdse suurusega negatiivse laengu. Seetõttu liiguvad molekulid elektriväljas ühes suunas ning liikumise kiirus sõltub ainult valgu molekuli suurusest (molekulmassist).

Elektroforeetilise protseduuri tulemusena saadakse geelplaat, mille paksuses paiknevad valgud eraldi õhukeste lineaarsete tsoonide kujul. Liikumissuuna järgi jagunevad need järgmises järjekorras: suure molekulmassiga, umbes 120-150 kDa valgud paiknevad stardile lähemal ja 5-10 kDa massiga valgud on liikunud kõige kaugemale. finišijoonel. Teises etapis asetatakse geelplaat nitrotselluloosi lehele ja see struktuur asetatakse alalisvooluallika elektroodide vahele. Elektrivälja mõjul voolavad valgud poorsest geelist tihedamale membraanile, kus need on kindlalt fikseeritud.


Saadud bloti töödeldakse blokeeriva lahusega, mis sisaldab antigeenselt ükskõikseid valke ja/või mitteioonseid detergente (Tween 20), mis blokeerivad membraani antigeenivabu kohti. Seejärel lõigatakse membraanileht kitsasteks ribadeks, nii et iga riba sisaldab kõiki antigeenseid fraktsioone. Kirjeldatud sammud viib läbi tootja.

Kaubanduslikud testisüsteemid antikehade tuvastamiseks immunoblotanalüüsi abil sisaldavad blotte (ribasid või ribasid), mis on testimiseks valmis. Kasutaja määrab kaudse meetodi abil kogu patogeeni valkude spetsiifiliste antikehade spektri. Värvuse (ensümaatilise) reaktsiooni läbiviimiseks kasutatakse kromogeenina lahustuvat värvitut ainet, mille saadus omandab värvuse, muutub lahustumatuks ja settib (sadeneb) nitrotselluloosile.

Järjestikuste immuun- ja ensümaatiliste reaktsioonide tulemusena tekivad uuritavas proovis patogeeni valkude vastaste antikehade olemasolul blotile tumedad põikitriibud, mille asukoht on teatud patogeensete valkude tsoonis. Iga selline riba näitab vastava antigeeni spetsiifiliste antikehade olemasolu. Immunoblotanalüüsiga läbi viidud uuringu tulemus esitatakse patogeeni spetsiifiliste valkude vastaste antikehade loeteluna. Näiteks: "valkude p17 ja p24 vastased antikehad on tuvastatud."

Nitrotselluloosi blotte võib pärast väljatöötamist säilitada kuivatatult pikka aega. Värvi intensiivsus aga nõrgeneb oluliselt. Märgblotte saab pildistada või nende graafilisi pilte skannerite abil personaalarvutite mällu sisestada. Spetsiaalsed arvutiprogrammid võimaldavad dünaamilise vaatluse käigus tulemusi töödelda ja kiiresti jälgida antikehade spektri dünaamikat