ИФА: как проводится анализ? Стоимость. Расшифровка результатов. Как проводится и что показывает иммуноферментный анализ Расшифровка анализа методом ифа

Как проводится исследование методом ИФА

Механизм реакции

В основе иммуноферментного анализа лежит иммунная реакция антигена с антителом,а присоединение к антителам ферментной метки позволяет учитывать результат реакции антиген-антитело по появлению ферментативной активности или по изменению ее уровня.В упращенном виде механизм реакции можно представитьследующим образом:

Подсчет результатов

Проведение иммуноферментного анализа

Для серодиагностике используются 96 луночные полистирольные планшеты, на стенках ячеек которых заранее адсорбируется антиген. Исследуемая сыворотка вносится в ячейку планшета. При этом гомологичные антигену антитела прикрепляются к нему. Не прикрепившиеся антитела удаляются промыванием. Далее в ячейки вносят антитела против иммуноглобулинов (антител) человека, меченные ферментом. Если в исследуемой сыворотке присутствовали определяемые антитела, то они на этом этапе выступят в роли антигенов, с которыми прореагируют меченные антитела. Добавление после промывки хромогенного вещества (красителя) позволит учесть реакцию по развивающемуся окрашиванию в ячейках. Интенсивность окраски при этом пропорциональна количеству фермента, а следовательно количеству антител.При измерении оптическую плотности (ОП) жидкости в ячейке и сравнивании ее с контрольным образцом подсчитывается концентрация антител в единицах объема.Наиболее часто применяется подсчет результатов в единицах оптической плотности.Надо учитывать,что для каждой тест-системы есть свои показатели учета результатов и показатели нормы и патологии на которые надо ориентироваться при интерпретации результатов.

Какие инфекции можно выявить методом ИФА

В основном в современной венерологии применяется для диагностики сифилиса (в комплексе с другими реакциями),ВИЧ-инфекции ,вирусных гепатитов .Имеет ограниченное значение для диагностики хламидийной инфекции ,цитомегаловирусной инфекции и других герпетических инфекций .Метод ИФА используется также для определения антител при различных инфекционных заболеваниях,уровня гормонов,аутоантител и различных маркеров онкологических заболеваний.

Как интерпретировать результаты ИФА

Исследование наличия и уровня антител различных классов в некторых случаях помогает определить стадии инфекционного процесса

К сожалению,такое важное преимущество ИФА, как количественное определение антител не имеет большого значения в практической работе - т.е. не позволяет точно установить диагноз и не влияет на дозировку и сроки назначения лекарственных средств.

Какая роль метод ИФА в диагностике сифилиса

Метод ИФА в диагностике сифилиса был впервые применен в 1975 год.В настоящее время он широко применяется для серологической диагностики сифилиса в России и используется как потверждающий тест на сифилис.Обычно проводят исследование,выявляющее так называемые суммарные антитела к антигенам бледной трепонемы (IgM и IgG),хотя в отдельных случаях возможно и определение только "ранних" антител класса М.ИФА при сифилисе становится положительным после 3 недели с момента инфицирования и остается положительным довольно длительное время даже после лечения (иногда всю жизнь).Поэтому как тест,подтверждающий излечение сифилиса,ИФА не используется.В большинстве случаев проводится только качественное определение ИФА - т.е. только положительный или отрицательный результат,хотя возможно и количественное определение.

В лаборатории гемостаза МЖЦ используют новый, высокочувствительный метод ИФА - ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent Assay), гетерогенный твердофазный иммунный анализ. В ходе исследования определяют наличие антител в крови пациента к возбудителям различных болезней.

Стоимость ИФА анализа*

Для чего сдают иммуноферментный анализ

ИФА используют во многих сферах медицины. У людей с ишемической болезнью сердца, атеросклерозом и гипертонией выявляют антитела к белкам системы гемостаза - тромбину, а2 макроглобулину и антитромбину 3, а также пептидным биорегуляторам свертывающей системы - ангеотензину 2 и брадикинину.

ИФА доказал свою эффективность в пренатальной диагностике и при определении фертильности - это АФП-тест (диагностика расщелины позвоночника, трисомии у плода), тесты на стероидные гормоны эстадиол, эстриол, прогестерон.

Множественные осложнения беременности, бесплодие и тромбофлебит провоцирует тяжелое аутоиммунное заболевание - антифосфолипидный синдром. Диагностику АФС в Медицинском Женском Центре также проводят методом иммуноферментного анализа: определяют антитела к кардиолипину, b2-гликопротеину, протромбину и аннексину 5.

Иммуноферментный анализ (или сокращенно ИФА) – это лабораторное исследование, которое помогает поставить точный диагноз, выявить скрытые болезни, определить предрасположенность к тем или иным заболеваниям, а также контролировать эффективность назначенной терапии. Во время исследования в сыворотке крови пациента выявляются антигены, характерные для конкретных возбудителей, и антитела к ним.

В чем суть

Для того чтобы понять принцип проведения ИФА, необходимо вспомнить, как работает иммунная система организма, что такое «антиген» и «антитела», и какие функции они выполняют.

Антиген – это молекула, которая несет определенную информацию о клетке. Если в организм попадает чужеродный антиген, антитела (или иммуноглобулины (Ig) в ответ на появление в организме чужеродного микроорганизма связываются с ним и опознают, свой это или чужой. При сигнале «чужой», антитела начинают уничтожать потенциально опасный объект. Такое взаимодействие «антиген-антитело» называется иммунным комплексом . На нем и основан метод ИФА.

Показания

Анализ широко применяется для диагностики различного рода заболеваний. И что особенно ценно, это исследование достаточно точно диагностирует заболевания, которые протекают в организме скрыто, без симптомов.

С его помощью можно выявить:

• инфекционные заболевания, передающиеся половым путем (хламидиоз, уреаплазмоз, микоплазмоз, сифилис, герпес, ВИЧ и т.д.);
• токсоплазмоз, туберкулез, гепатиты, корь и т.д.;
• аутоиммунные проблемы;
• онкологию;
• половые гормоны;
• гормоны щитовидной железы;
• аллергию.

ИФА позволяет выявить даже маркеры заболеваний сердца. Кроме того, его назначают и для оценки эффективности проводимого курса лечения, а также перед некоторыми видами хирургических вмешательств.

Подготовка

Кровь для исследования берется из вены натощак, желательно, в утренние часы.

Накануне следует воздержаться от алкоголя, сладких напитков, кофе и обильного ужина. Кроме того, на результаты показателей может повлиять прием определенных лекарственных средств, поэтому необходима консультация с лечащим врачом.

За 4 часа до проведения необходимо исключить курение.

Иммуноферментный анализ крови в ОН КЛИНИК

Международный медицинский центр ОН КЛИНИК оснащен собственной лабораторией, имеющей международный сертификат контроля качества. Здесь опытные и квалифицированные специалисты проводят различного рода анализы (более 1000 наименований).

Среди преимуществ данного метода можно выделить то, что он уже на самых ранних этапах развития болезни выявляет ее. Чувствительность теста составляет 90%. Исследование точно показывает динамику инфекционного процесса, что позволяет специалисту отслеживать эффективность терапии. Весь процесс проведения полностью автоматизирован, что исключает влияние так называемого «человеческого фактора».

Дополнительно к тому, высокоточное оборудование позволяет получить достоверные результаты исследования в минимально короткий промежуток времени.

Расшифровать результаты Вы сможете в тот же день с врачом. На основе их врач выберет тактику лечения, которая подходит именно Вам.

ОН КЛИНИК: За более чем 25 лет работы нас выбрали миллионы людей. Присоединяйтесь!

Врачи

Администратор свяжется с Вами для подтверждения записи. ММЦ «ОН КЛИНИК» гарантирует полную конфиденциальность Вашего обращения.

Время от времени врачи назначают анализы ИФА что это такое знают далеко не все. ИФА расшифровку имеет следующую – иммуноферментный анализ крови. Такое исследование крови помогает понять, как организм борется с болезнями инфекционного спектра и продемонстрировать фазу заболевания. Иммуноферментное исследование помогает в оценке защитной деятельности крови, выявлении иммунодефицита при патологиях, связанных с инфекциями, гормональных проблемах и прочем.

Анализ крови ИФА работает с материалом, который забирается из вены. Кроме этого, доступно для исследования содержимое стекловидного тела, жидкость из спинного мозга, мазки из уретры или цервикального канала. Для иммуноферментного анализа ИФА у беременных женщин могут забирать жидкость, которой окружен плод.

При этом непосредственно кровь на ИФА может проверяться с использованием разных техник. Есть прямой, непрямой способ, конкуренция и блокировка. При заражении организма каким-то болезнетворным агентом, который именуется антигеном, иммунитет начинает вырабатывать специфические антитела, например, на гепатит. Эти антитела направлены на то, чтобы «разобраться» с чужеродными агентами. Что такое антитела? Это особые белки, которые могут вступать в связь с антигенами и образовывать комплексы иммунологической направленности, которые именуются антиген-антитело. Именно за обнаружение этих комплексов и отвечает ИФА диагностика. Чтобы выявить антиген, к полученному кровяному образцу добавляются антитела или выполняется обратная процедура.

ИФА положительный результат строится на реакции иммунитета и ферментов. Под действием первой агенты инфекций и клеточные элементы связываются, вторая помогает визуализировать результат первой. Иммунная реакция предполагает антительную и антигенную связку. В результате этого процесса и формируется комплекс иммунной направленности. Все клетки на своей поверхности имеют антиген. Иммунной клеткой осуществляется захват подозрительной, а антиген, который закреплен на поверхности, проходит процедуру сравнения с информацией, которая «загружена» в память. Если присутствует совпадения описания, то клетка возвращается восвояси, если же нет, то происходит связь, за создание которой отвечает антитело, которое крепится к поверхности.

Ферментативная реакция тем временем позволяет веществам преобразиться в новые. На материал выполняется воздействие ферментом. При этом ферментальное различие обеспечивается разными субстратами. Продукт, который стал следствием этой реакции, отправляется на определение количества возбудителя, определение которого основывается на плотности растворной окраски.

Особенности метода

Иммуноферментный анализ крови назначается, когда нужно диагностировать аллергию, болезни, имеющие вирусное происхождение. Есть и анализ ИФА на сифилис и целый ряд других инфекций, передача которых происходит при незащищенном половом контакте. Такая диагностика становится все более популярной в сравнении с ПЦР. Дело в том, что ПЦР предполагает работу с мазками. В отличие от ПЦР результаты ИФА могут быть получены при кровяных проверках.

Кроме этого, анализ крови методом ИФА может назначаться, когда нужно установить присутствие иммунодефицита, диагностировать онкологию, дать оценку тому, насколько эффективно лечение, определить гормональный уровень и пройти предоперационное обследование в комплексе.

Если сравнивать исследования методом ИФА, например, с ПЦР, то можно обнаружить целый ряд преимуществ. Основным является возможность полной диагностики даже на самых ранних стадиях развития. Кроме этого, результаты ИФА помогают в определении конкретной стадии заболевания, того, на каком уровне находится его развитие.

ИФА анализ в сравнении с ПЦР имеет более высокую эффективность, кроме того, сдавать его можно во время беременности, чтобы обнаружить ЗППП. Тот, кто сдал этот анализ, может узнать концентрацию ТТГ в сыворотке крови. Это очень важно, чтобы проверить, какова реакция щитовидной железы, присутствуют ли сбои в ее работе.

Дополнительными плюсами, впрочем, их имеет и полимеразная цепная реакция, является быстрота исследования, а значит, быстрое получение результатов. По достоинству оценивают врачи и точность результатов. Если речь идет о ЗППП, то уровень доходит до 98 процентов, как и в случае с концентрацией ТТГ.

Конечно, без недостатков не обходится. Однако в этом случае речь идет о косвенных особенностях теста. В частности, речь идет о том, что нельзя исключить возможные ошибки при определении норм. Иногда анализ, который сдавала абсолютно здоровая девушка, может продемонстрировать ложноположительный результат, или отрицательный в обратном случае. Однако классификация методов психологического исследования в большинстве случаев связывает такие недочеты с неправильной подготовкой или нарушением техники, с которой выполнялся забор материала.

Особенности выполнения

При ИФА анализе в большинстве случаев сдается кровь. Перед сдачей крови важно выдержать не менее чем восьмичасовое голодание, исключить прием ряда медицинских препаратов, которые оказывают влияние на результат анализа. Речь идет об антигистаминных медикаментах и гормональных препаратах, влияющих на работу щитовидки. Кроме этого, исключен должен быть алкоголь не менее чем за сутки. Обеспечьте отсутствие курения не менее чем за час до сдачи крови. Искажение результата возможно и при приеме наркотических веществ.

Прежде чем перейти к расшифровке, стоит упомянуть, какие способы измерения используются для такого теста. В результате анализа будут указываться антитела или иммуноглобулины Ig. Под ними понимаются те самые специфические белки, о которых ранее шла речь. За выработку их отвечают В-лимфоциты, как только в организм попадают вирусы, бактерии или грибки. Выделяется пять видов иммуноглобулинов, обозначающихся латиницей.

Отличия их связаны с разной молекулярной формой и массой. У них разный период полураспада, по-разному принимается участие или не принимается в инфекционных процессах. Варьируются и сроки, в рамках которых их можно обнаружить с момента, как произошло инфицирование.

Если классифицировать иммуноглобулины, используя в качестве основы молекулярный вес, то самые большие показатели у IgM. Особенностью такого типа иммуноглобулинов является отсутствие возможности прохождения через плацентарный барьер. Если IgM обнаруживается в анализе у новорожденного ребенка, речь идет о присутствии инфекции у плода.

В подавляющем большинстве в крови у человека содержатся иммуноглобулины IgG, меньше всего IgE. Говоря о работе в рамках инфекционных процессов, особенное значение стоит уделять вариантам A, M, G. IgE выступает в качестве маркера аллергической реакции. IgD обнаруживается только в тканях лимфоузлов и миндалин. Это важно с точки зрения создания иммунитета местного уровня.

Кроме этого, в анализе определяются антигены. Под ними понимаются вещества высокомолекулярного типа, которые известны своим органическим происхождением. В частности, речь идет о возбудителях заболеваний инфекционного и другого спектра. Кроме этого, имеются в виду и вещества, сигнализирующие о различных изменениях клеток, которые неизбежны при целом ряде болезней. Также указывается и иммунный комплекс, который демонстрирует комплекс антиген-антитело, которым принимается участие в иммунном процессе.

Обычно сроки изготовления зависят от конкретной лаборатории, в которую вы обратились. Ряд лабораторий в состоянии предоставить результаты в течение дня-двух, другим требуется неделя. Задержки могут быть связаны с необходимостью накопить определенное количество сыворотки.

Влияние на результаты и расшифровка

Несмотря на то, что ИФА считается одним из наиболее точных методов проверки, погрешности все-таки встречаются. Повлиять на правильность результатов может процедура взятия материала, неправильная его транспортировка и хранения материала. Прием медикаментов, как уже указывалось выше, присутствие скрытых заболеваний. Нарушение обмена веществ или иммунодефицит тоже не позволят получить верные показатели. В период жизни до года у новорожденных тоже могут быть не совсем верные показатели. Связано это с тем, что в организме присутствуют материнские антитела.

Говоря о расшифровке, в бланках анализа используется положительный или отрицательный знак, которым обозначаются результаты вычисления по каждому из иммуноглобулинных классов. В качестве вероятных вариантов будут выступать следующие.

Отсутствие обнаруженных IgG, IgA и IgM говорит о полном выздоровлении. Отрицательный результат по таким компонентам как IgM, IgA, IgG – это отсутствие иммунитета к инфекции.

Сочетание положительного и отрицательного результата по IgG, IgA в комплексе с положительным IgM говорит о присутствии в организме инфекции в острой форме. Положительный результат IgG комбинируемый отрицательными показателями по IgA и IgM соответствует поствакцинальному периоду или приобретению иммунитета в результате перенесенной инфекции.

Сочетание положительного или отрицательного результата IgG, IgA и отрицательного результата, IgM говорит о присутствии инфекции в хроническом ее течение. Положительный результат по трем компонентам: IgG, IgM, IgA обозначает обострение инфекции, которая находилась в хронической форме протекания. Кроме непосредственно уточнения антителовых классов, в рамках расшифровки анализа ИФА врач получает информацию об их количественных показателях. Важно подчеркнуть, что за расшифровку должен отвечать именно лечащий врач. Дело в том, что сочетание некоторых компонентов может натолкнуть его на мысль о полученном ложном результате, что приведет к повторной сдаче. Самостоятельная расшифровка в таком случае бесполезна.